张王照
- 作品数：6 被引量：70H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院饲料研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国际科技合作重点项目计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学理学农业科学更多>>
- 木聚糖酶XYNB分子中折叠股B1和B2间的疏水作用对酶热稳定性的影响被引量：12
- 2005年
- 对来源于Streptomycesolivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模,并结合嗜热木聚糖酶氮末端芳香族氨基酸疏水作用的结构分析,设计了XYNB的T11Y定点突变,观察XYNB分子中折叠股B1和B2的疏水作用对酶的热稳定性的影响。将突变酶XYNB′在毕赤酵母中表达,表达的XYNB′经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNB′的耐热性比XYNB有明显的提高,但最适温度与原酶一样为6 0℃。另外,XYNB′的最适pH、Km值及比活性均有一定的改变。实验证实了木聚糖酶XYNB的氮端芳香族氨基酸之间的疏水相互作用与其热稳定性相关,为进一步的结构与功能研究提供了优良的基因材料。
- 杨浩萌姚斌罗会颖张王照王亚茹袁铁铮柏映国伍宁丰范云六
- 链霉菌Streptomyces olivaceoviridis A1木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌及毕赤酵母中的高效表达被引量：31
- 2003年
- 从橄榄绿链霉菌StreptomycesolivaceoviridisA1中克隆出木聚糖酶基因xynA ,将带与不带原基因信号肽编码序列的xynA分别以正确的阅读框架克隆到大肠杆菌表达载体pET 2 2b(+)上的pellB信号肽编码序列之后 ,得到 2种构建的重组载体 ,在重组大肠杆菌中木聚糖酶得到了表达 ,表达产物具有生物活性。进一步将不带原基因信号肽编码序列的xynA插入到毕赤酵母转移载体pPIC9中 ,转化毕赤酵母得到重组子 ,在重组子中木聚糖酶基因得到了高效分泌表达 ,在摇床培养水平上的表达量达到 2 0 0mg L ,且表达产物具有生物学活性。
- 张红莲姚斌王亚茹袁铁峥张王照伍宁丰范云六
- 关键词：链霉素木聚糖酶基因大肠杆菌毕赤酵母
- 弗氏链霉菌丝氨酸蛋白酶基因的克隆及表达被引量：16
- 2005年
- 从一株具有极强的降解羽毛能力的弗氏链霉菌菌株(Streptomycesfradiaevar.k11)中纯化得到了一种丝氨酸蛋白酶SFP2。经蛋白测序,得到部分氨基酸序列,设计简并引物,PCR扩增得到部分基因序列,通过构建基因文库,获得了包括信号肽序列在内的完整的基因sfp2(EMBL收录号AJ784940),开放阅读框全长924bp,包括114bp的信号肽编码序列和810bp的酶原编码序列,其中成熟蛋白编码基因长576bp,编码191个氨基酸,理论分子量为19.112kD。酶原编码基因和成熟蛋白编码基因均在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中得到了表达,酶原编码基因表达产物具有正常的生物学活性,证明了克隆基因的生物学功能。
- 李江石鹏君张王照韩晓宇徐玲玲张会图姚斌范云六
- 关键词：丝氨酸蛋白酶基因克隆
- 具有高比活性的新木聚糖酶XYNB的酶学性质研究及其编码基因的克隆和表达被引量：8
- 2003年
- 纯化了橄榄绿链霉菌Al产生的胞外木聚糖酶XYNB,并对其酶学性质进行了测定,XYNB具有优良的酶学性质,最适pH为5.2,最适温度为60℃,比活性高达2869.78 U/mg,对金属离子及EDTA和SDS等具有较好的抗性,根据木聚糖酶成熟蛋白N端氨基酸序列测序结果设计引物,克隆了此酶的成熟蛋白编码基因xynB,基因全长576 bp,(G+C)含量为64.3％,编码191个氦基酸,理论分子量为20.839kD,是一种新的木聚糖酶基因.构建了xynB表达载体并在大肠杆菌中得到了表达,表达产物具有正常的生物学活性.
- 张红莲姚斌王亚茹张王照袁铁铮
- 关键词：木聚糖酶XYNB酶学性质编码基因
- 饲用木聚糖酶的研究进展被引量：8
- 2005年
- 张王照王亚茹杨浩萌
- 关键词：木聚糖酶饲料添加剂分子生物学最适PH值基因工程
