张燕君 作品数:48 被引量:159 H指数:8 供职机构: 山东大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
通过差减文库筛选文昌鱼神经胚中特异表达的基因 2010年 目的:构建文昌鱼12 h神经胚与6 h原肠胚的差减cDNA文库,以期从中挑选出在神经、肌肉、体轴发育过程中特异表达的基因,以便对文昌鱼早期胚胎的发育调控机制进行进一步研究。方法:分别从文昌鱼12 h胚胎和6 h胚胎提取总RNA,反转录成cDNA,以文昌鱼12 h胚胎的cDNA作为tester,并以6 h胚胎的cDNA作为driver,经过两轮杂交和抑制性PCR扩增,产物与T载体连接,经蓝白斑筛选,提取质粒DNA,EcoR I酶切鉴定插入片段,由此构建文昌鱼早期两个不同发育时期的差减cDNA文库。结果:对200个文库克隆进行了测序,筛选到一些可能在文昌鱼12 h神经胚中特异表达的基因。结论:成功构建了文昌鱼12 h/6 h胚胎差减cDNA文库,所获得的12 h神经胚中特异表达的基因,为进一步对文昌鱼早期发育调控机制进行研究提供了材料。 张磊 张磊 杨永杰关键词:文昌鱼 抑制性差减杂交 差减CDNA文库 特异表达基因 文昌鱼profilin同源基因的胚胎发育表达图式 被引量:1 2004年 本研究利用胚胎整体原位杂交技术结合系列组织学切片技术,以及Northern blot 分析,对进化上处于特殊地位的模式动物文昌鱼profilin 基因不同发育时期的表达图式进行了系统研究,揭示了该基因的动态表达图式与肌肉分化的过程一致,文昌鱼profilin 基因可能与胚胎早期肌肉的发育相关。同时,通过Southern blot 检测对青岛文昌鱼profilin 基因可能存在的同源体进行了探讨,试图为弄清文昌鱼肌肉发育分化的分子机制提供资料。 张晓辉 杨卉 黄向炜 王利凤 陈忠科 张燕君 张培军 张红卫关键词:文昌鱼 PROFILIN 同源基因 胚胎发育 表达图式 肌肉 文昌鱼体节极性相关新基因片段的初步研究 2001年 在克隆青岛文昌鱼hedgehog基因的同时 ,意外地得到了一个新的基因(Amphip1 7)片段 .对该基因片段的结构和功能的初步研究结果表明 ,该基因很可能在文昌鱼早期胚胎发育的体节形成与维持中起重要作用 .发现和研究这个新基因 。 毛炳宇 邢振兰 任前升 张燕君 张红卫关键词:文昌鱼 新基因 克隆 青岛文昌鱼hedgehog基因表达图式的研究 被引量:9 1999年 Hedgehog(hh)家族基因编码一类分泌性信号分子,在果蝇的体节和成虫盘等的图式形成和脊椎动物脊索、神经管、体节和肢等的发育中起着关键作用.探讨原索动物文昌鱼hh基因的功能,对于研究脊椎动物发育机制的进化具有重要意义.本文报道了用整体原位杂交方法,研究不同发育时期文昌鱼胚胎和幼体hh基因表达图式的结果,并对文昌鱼hh基因的功能和hh家族同源基因功能的演化进行了讨论.文昌鱼hh基因在脊索和神经管中的表达图式与脊椎动物Shh基因相似,其功能可能是介导脊索的诱导. 毛炳宇 张燕君 郭晓霞 张红卫关键词:文昌鱼 表达图式 发育 基因表达 青岛文昌鱼核糖体蛋白AmphiL37a基因的克隆和同源性分析 被引量:8 2001年 对青岛文昌鱼神经胚cDNA进行测序 ,获得了 3个AmphiL3 7a的EST ,经拼接得到编码文昌鱼核糖体蛋白的AmphiL3 7a基因全长cDNA序列并演绎出AmphiL3 7a的氨基酸序列 .通过对AmphiL3 7a蛋白的结构分析及其与多种脊椎动物和无脊椎动物中同种蛋白的同源性进行比较 ,发现AmphiL3 7a具有典型的四个半胱氨酸的锌指结构 ,与人、鼠、鸡的L3 7a ,尤其与果蝇、隐板石鳖等高等无脊椎动物核糖体L3 7a具有较高的同源性 ,说明文昌鱼在进化上更接近于高等无脊椎动物 ;同时说明核糖体蛋白L3 陈忠科 李琳 张燕君 王学刚 黄向炜 韩华 张红卫关键词:文昌鱼 核糖体 进化 热激通过泛素-蛋白酶体途径导致小鼠生精细胞中Cdc2含量降低 大多数哺乳动物的生精过程是热敏感性的,热激会导致精子发生过程阻滞。已有研究发现,热激所引起的生精细胞内Cdc2含量的降低可能是导致生精过程阻滞和生精细胞凋亡的原因之一,但其途径尚不清楚。 张燕君 李学坤 解艳艳 刘增英 孔维华文献传递 微量稀土元素铈对牛冷冻精液质量参数和精子膜流动性的影响 2015年 为了提高牛冷冻精液的质量,试验采用将微量稀土氯化铈(CeCl3)添加到冷冻稀释液中的方法,比较不同浓度CeCl3对牛精液冷冻后精子的活力、存活时间、畸形率、顶体完整率和膜完整率的影响。结果表明:添加0.30μmol/LCeCl3能显著提高冷冻后精子的顶体完整率(P〈0.05),添加0.10∽3.00μmol/LCeCl3能显著或极显著提高精子细胞膜的流动性(P〈0.05或P〈0.01),提示微量稀土CeCl3提高冷冻精子顶体完整率的机制可能与其提高了精子膜流动性有关。 何乃森 仲跻峰 彭正华 张燕君 王长法 孔维华关键词:冷冻精液 精子 顶体完整率 膜流动性 7种鼠传病原体多重PCR检测方法的建立与应用 被引量:3 2019年 目的应用QIAxcel毛细管电泳系统建立一种能够同时检测7种鼠传病原体的多重PCR检测方法。方法应用微生物数据分析云平台(https://analysis.mypathogen.org/)中'special marker gene'工作流,筛选恙虫病东方体、嗜吞噬细胞无形体、莫氏立克次体、土拉弗朗西斯菌、贝氏柯克斯体、问号钩端螺旋体和巴尔通体特异基因,据此设计引物。根据温度转换PCR原理构建特异性嵌合引物,建立多重PCR反应体系,应用QIAxcel毛细管电泳系统对扩增产物进行检测,评价该体系灵敏度、特异性和可重复性。通过对模拟样品和野外样品进行检测,评价该方法对样品的检测能力。结果特异性检测显示,每种病原体扩增均只出现单一目的条带,无交叉反应;多引物单模板灵敏度检测限为11~76拷贝/μl,多引物多模板灵敏度检测限为20~200拷贝/μl。经样品检测显示,多重PCR法检测能力与单重实时荧光定量PCR法相当,优于普通单重PCR法。结论运用QIAxcel毛细管电泳系统成功建立鼠传病原体多重PCR检测方法,可同时高效、快速检出7种病原体,为相关鼠传疾病的诊断、监测和流行病学调查提供有效手段。 康央 宋秀平 张燕君 刘起勇 栗冬梅关键词:多重PCR 毛细管电泳 人兽共患病 前列腺素E合成酶cPGES在小鼠睾丸中的表达及热激后变化 <正>为了深入了解具双重功能的cPGES在精子发生中的作用,本实验研究了cPGES在睾丸中的时空表达特点和热激后的表达变化。分选小鼠睾丸支持细胞和生精细胞,用western blotting的方法检测cPGES的表达情况... 张燕君 杜一 王登宇 崔海音 孙冰玉 孔维华文献传递 卵丘细胞凋亡对体外培养卵母细胞发育潜能的影响 被引量:2 2007年 目的研究体外培养中卵丘细胞凋亡对卵母细胞结构的影响,探讨体外受精中可用卵丘细胞凋亡率预测卵母细胞发育潜能的原因。方法对GV期人卵丘-卵母细胞复合体进行体外成熟培养,用HE染色、DAPI染色和原位末端标记(TUNEL)法标记3种方法对单卵卵丘细胞凋亡率进行检测。分为凋亡率高和低的2组,用光镜和透射电镜观察卵母细胞的结构。对MⅡ期卵母细胞进行体外受精,培养2d后在光镜下评价胚胎质量。结果卵丘细胞凋亡率低的卵母细胞结构和发育潜能良好;卵丘细胞凋亡率高的卵母细胞发育潜能差,存在各种结构异常,包括围卵周隙不均,对应不同部位的细胞质发育不同步;细胞质中出现堆积不均的细胞器团、次级溶酶体、及可能由溶酶体降解造成的大量空隙;线粒体外膜和嵴模糊、膨大,呈现凋亡迹象;第一极体碎裂;透明带异常增厚或变薄。相应的卵丘细胞微绒毛和细胞连接减少。结论揭示了卵丘细胞凋亡对卵母细胞结构的影响,揭示了卵丘细胞凋亡率影响卵母细胞发育潜能的原因。 杨永杰 张燕君 李媛关键词:卵丘细胞 卵母细胞 发育潜能 体外成熟 原位末端标记