张文强
- 作品数：16 被引量：45H指数：4
- 供职机构：山东省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生金属学及工艺更多>>
- 新城疫病毒F蛋白细胞融合活性位点中保守氨基酸基因突变分析被引量：10
- 2006年
- 为了确定新城疫病毒融合蛋白(F)分子上活性位点中保守氨基酸在F蛋白的细胞融合作用,弄清F细胞融合的分子机理,采用基因定点突变法,创造一个酶切位点,用酶切反应初步筛选突变株,然后用DNA序列分析进一步确定,并于真核细胞内进行表达,Giemsa染色定性和指示基因法定量检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测表达效率情况。结果表明,NDV F第117位苯丙氨酸(F)突变成亮氨酸(L)时对细胞融合作用没有显著影响。R112和K115同为保守序列,分别突变为G时,细胞融合活性只有原来的44%,下降了56%。细胞表面表达效率没有明显的改变。N147突变为K时,细胞融合活性明显下降,只有原来的15%,而细胞表面表达效率没有明显的改变。L154为保守序列,突变为K时,细胞融合活性消失,说明L154是一个非常关键的氨基酸,对维持F蛋白的细胞融合活性非常重要。细胞表面表达效率也有所下降(为原来的94%)。D462属于高度保守氨基酸,当突变为N时,细胞融合活性消失,但经细胞表面表达效率分析证明,此突变蛋白未表达于细胞表面,证明在细胞浆转运至细胞表面的过程中发生了问题。当突变为R和E时,细胞融合活性未发生改变,但细胞表面表达效率有所下降,分别为野毒株的63%和44%。说明NDV F分子上与HN相互作用的特异性区域中的某些保守氨基酸在细胞融合中发挥着重要作用,对F蛋白的折叠、加工、转运等,发挥着不同作用,从而影响F蛋白的细胞融合作用和/或在细胞表面的表达量。
- 王志玉任桂杰温红玲宋艳艳王桂亭姚苹许洪芝张文强
- 关键词：副粘病毒融合蛋白细胞融合基因新城疫病毒
- 副粘病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白结构与功能的研究进展被引量：1
- 2005年
- 副粘病毒的血凝素-神经氨酸酶和融合蛋白具有重要的生物学活性,其中前者具有受体识别活性、神经氨酸酶活性和促进融合蛋白的细胞融合作用.本文对近年来血凝素-神经氨酸酶结构和功能方面的研究进展进行了综述.
- 张文强王志玉
- 关键词：神经氨酸酶蛋白结构副粘病毒血凝素生物学活性融合蛋白
- 肠道病毒感染诱导宿主细胞自噬的研究进展被引量：2
- 2019年
- 细胞自噬是一种高度保守的生理代谢途径,是维持细胞稳态的重要过程。一些病毒已经进化出逃逸自噬依赖性降解的方法,甚至进化出利用自噬以促进自身复制的机制。肠道病毒感染细胞时,能激活自噬途径,诱导自噬体的形成。本文对肠道病毒感染与细胞自噬的研究概况与进展作一综述,为进一步解析肠道病毒感染与细胞自噬之间相互作用的机制提供参考。
- 刘子薇张文强温红玲
- 关键词：细胞自噬细胞凋亡肠道病毒
- 人副流感病毒3型HN糖蛋白N-糖链的功能研究被引量：3
- 2013年
- 为了研究人副流感病毒3型(hPIV3)HN糖蛋白N-糖链的功能,采用基因定点突变技术构建糖基化位点突变体,然后检测各突变株的蛋白电泳速率、细胞表面表达量、受体结合活性、神经氨酸酶活性和促细胞融合活性。HN分子的G1、G2、G3和G4 4个糖基化位点分别和联合突变后发现G1、G2和G4及其联合突变株(G12、G14、G24和G124)电泳速率加快,而G3突变株电泳速率没有变化。各突变株的表达效率,神经氨酸酶活性与野毒株相比差别无统计学意义(P>0.05),但受体结合活性和促细胞融合活性均有不同程度的降低(P<0.05)。G1、G2和G4位点突变后受体结合活性分别为突变前的83.94%、76.45%和55.32%,而促细胞融合活性降为突变前的80.84%、77.83%和64.16%。联合突变株G12、G14、G24和G124血吸附活性进一步降低,为突变前的33.07%、20.67%、19.96%和15.11%,促细胞融合活性进一步降低为突变前的46.36%、12.04%、13.43%和4.05%。结果表明:hPIV3HN糖蛋白的糖链对HN糖蛋白的受体结合活性和促细胞融合活性有重要影响,推断糖链的丢失可能会引起HN糖蛋白头部结构(受体结合活性位点所在区域)或者方向的改变或者无法与宿主细胞膜表面的凝集素受体(一种与N-糖链结合的受体)结合,进而导致受体结合活性和促细胞融合活性的降低。
- 褚福禄温红玲侯桂华林彬张文强宋艳艳任桂杰孙成玺李振梅王志玉
- 关键词：细胞融合神经氨酸酶
- 人巨细胞病毒感染的危害及其疫苗研发进展被引量：6
- 2013年
- 人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）为疱疹科β属的双链DNA病毒.该病毒在细胞培养中增殖缓慢,细胞病变后肿大变圆,核内出现大型嗜酸性包涵体.20世纪50年代,Craig等根据HCMV在成纤维细胞中的病变特点,将其命名.妊娠妇女感染HCMV可导致流产、死产及幸存婴儿听力损失和发育迟缓,免疫力低下人群感染HCMV可导致致命的播散性感染,是其常见的机会性感染和死因.而人们对HCMV感染的危害却认识不足,未将其作为育龄妇女和院内感染的重要危险因素.虽然已有抗病毒药物对复发性感染和疾患有一定的疗效,但HCMV依然会对孕妇和免疫低下人群的健康造成影响.
- 刘晓林王同展王海岩张文强徐爱强
- 关键词：人巨细胞病毒感染疫苗研发双链DNA病毒HCMV感染成纤维细胞
- 2012-2020年山东省恙虫病流行特征及空间聚集性分析
- 2023年
- 目的分析山东省2012-2020年恙虫病流行特征及时空分布特征,掌握流行趋势,为精准防控提供科学依据。方法收集山东省2012-2020年报告的恙虫病病例资料,采用Excel 2021进行数据处理及图表绘制,SaTScan 10.5进行时空扫描分析,ArcGIS 10.5空间自相关分析和时空扫描结果可视化。结果2012-2020年山东省报告恙虫病病例8208例,覆盖90个县区,历年发病率总体呈下降趋势,2014年发病率最高,为1.53/10万;各年发病率具有明显的季节性,呈单峰分布,9-11月为发病高峰。病例以农民为主,占发病总数的89.08%(7151/8208),年龄以50~69岁年龄组为主,占发病总数的56.44%(4531/8208),不同年龄组发病率差异有统计学意义(χ^(2)=6921.41,P<0.01);男女病例比为0.77∶1(3483/4544)。2012-2020年各年病例分布具有空间相关性(Moran’s I>0,P<0.01)。空间自相关和时空扫描显示2012-2020年恙虫病病例主要集中在山东省中南部和东南沿海的低山丘陵地区。结论2012-2020年山东省恙虫病发病存在明显的空间聚集性,发病人群以农民为主,应对高发病率地区实施针对性的防控策略。
- 张金艳冯开军寇增强徐大力张文强丁淑军吕慧李栋
- 关键词：恙虫病空间自相关
- EV71诱导不完整的细胞自噬促进自身复制被引量：3
- 2019年
- 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)与细胞自噬之间的关系以及细胞自噬对病毒复制的影响。方法用雷帕霉素、氯喹(chloroquine,CQ)、3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)对人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma,RD)进行前处理,用Western blot和噬斑试验检测自噬的不同阶段对病毒复制的影响。结果EV71感染能够诱导RD细胞发生不完整的自噬。CQ处理组EV71的复制被促进,而雷帕霉素和3-MA处理组病毒的复制水平降低。mTOR是影响EV71复制的关键分子,用雷帕霉素抑制mTOR可抑制病毒RNA的合成。结论自噬的不同阶段对病毒复制的影响亦不同,抑制自噬溶酶体降解,病毒复制被促进,而抑制自噬早期阶段或促进自噬,病毒复制水平降低。mTOR可在RNA水平上影响EV71的复制。
- 刘子薇张文强宋绍霞赵丽王志玉温红玲
- 关键词：肠道病毒71型细胞自噬病毒复制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 山东省柯萨奇病毒B1型VP1区全基因序列分析
- 2016年
- 为了解柯萨奇病毒B1型（Coxsackievirus B1,CV-B1）山东地方株的分子流行病学特征,本研究对1994年至2015年山东省急性弛缓性麻痹（Acute flaccid paralysis,AFP）监测系统、环境污水监测和无菌性脑膜炎病例标本中分离到的CV-B1病毒进行了VP1序列测定、系统发生学分析和同源性分析。共分离到CV-B1病毒53株,其中AFP监测、污水和及脑炎标本各分离到41株、4株和8株。基于VP1完整编码区序列的系统发生学分析显示CVB1山东株与国内其他分离株属于一个大的分支,该分支内无国外分离株,国外分离株构成了其他两个分支。山东株之间的VP1核苷酸同源性为84.4%-100.0%,与其他国家分离株的同源性为77.9%-85.0%。研究结果表明,中国CV-B1分离株与国外株相比有较大的遗传差异,需要加强相关手足口病病毒学监测,关注不同传播链的新的基因亚型的肠道病毒的输入。
- 王海岩陶泽新李岩张文强刘晓林徐爱强
- 关键词：肠道病毒同源性
- MTT试验检测EV71 2A蛋白对宿主细胞损伤作用被引量：1
- 2016年
- 目的在Vero细胞、RD细胞和U87细胞3种细胞系中,研究EV71的2A蛋白对宿主细胞增殖能力的影响及对细胞的损伤作用,揭示2A蛋白在EV71的致病机制中所起的作用。方法将野毒株EV71SDLY 107株(强毒株)、EV71SDLY 1株(弱毒株)和嵌合毒株EV71SDLY 107-2A-1感染Vero细胞、RD细胞、U87细胞后,利用MTT试验测定3种细胞在感染病毒后不同时间点的存活情况,绘制细胞生长曲线,比较细胞增殖程度,并利用单因素方差分析法分析3种细胞在感染不同病毒48h后的存活率;结果 EV71SDLY 107株感染Vero细胞和RD细胞后细胞增殖程度和存活率均低于EV71SDLY 1株(t=41.64,P<0.001;t=33.28,P<0.001);EV71SDLY 107-2A-1嵌合株感染Vero细胞和RD细胞后,细胞增殖程度和存活率均高于亲本病毒EV71SDLY 107株,低于EV71SDLY 1株(t=17.97,P<0.001;t=42.09,P<0.01);EV71SDLY 107-2A-1株感染U87细胞后细胞存活率低于EV71SDLY 1株(t=8.85,P<0.001),但与EV71SDLY 107株感染后细胞存活率无统计学差异(t=0.74,P=0.603);不同细胞感染同株病毒48h后,U87细胞存活率均为最低,Vero细胞存活率均为最高。结论 EV71强毒株的2A蛋白对细胞产生的损伤作用大于弱毒株的2A蛋白,提示2A蛋白在EV71对宿主细胞的作用中发挥功能。
- 乔乔李静张文强马英伟庄志超白永娟赵丽王志玉温红玲
- 关键词：EV71细胞增殖存活率
- 甲型H1N1流感病毒HA蛋白结构和功能研究进展被引量：8
- 2012年
- 自2009年3月,甲型H1N1流感疫情相继在包括中国在内的许多国家暴发,对人体健康和社会经济发展造成了严重危害。血凝素(HA)蛋白是重要的病毒表面糖蛋白,主要有3种功能:①与宿主细胞表面受体结合;②引起病毒包膜与靶细胞间的膜融合;③刺激机体产生中和性抗体。本文综合了近年来的研究成果,对甲型H1N1流感病毒HA蛋白结构、主要功能、进化、抗原性的研究进展进行了综述。
- 张文强宋绍霞王同展
- 关键词：甲型H1N1流感病毒HA基因进化抗原性
