张庶民
- 作品数：187 被引量：528H指数：14
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划河北省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 破伤风毒素C片段的基因克隆、表达、纯化及免疫原性分析被引量：6
- 2004年
- 目的 对破伤风毒素C片段进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和免疫原性分析。方法 应用PCR技术直接从破伤风梭状芽孢杆菌的质粒DNA中扩增出 1370bp的破伤风毒素C片段(简称TTC)基因 ,将此基因片段插入到表达载体pET 2 2b(+)中 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达。用阴离子交换层析和金属离子螯合亲和层析方法进行蛋白纯化后 ,参照《中国生物制品规程 2 0 0 0年版》的免疫攻击实验方法测定其效价。结果 经SDS PAGE分析 ,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的15 %。免疫印迹实验证实该重组蛋白是破伤风毒素C片段抗原。纯化得到纯度为 96 .5 %的重组蛋白 ,纯化回收率达 4 0 %。免疫攻击实验测定其效价为 18.70 6IU/mg,ED50 为 2 0 μg。经加强免疫 ,1μg免疫剂量即能产生足够的抗体保护动物免受破伤风毒素的攻击。结论 所获得的重组蛋白具有良好的免疫原性 。
- 谭亚军雷殿良张庶民
- 关键词：破伤风毒素基因克隆蛋白纯化免疫原性PCR技术基因工程疫苗
- 吸附全细胞百白破乙肝四联疫苗效果观察被引量：5
- 2003年
- 目的 考察武汉生物制品研究所研制的全细胞百日咳、白喉、破伤风、乙肝联合疫苗的安全性和免疫原性 ,探讨联合疫苗的免疫程序。方法 进行 2期临床观察。将研究对象随机分为 3组 ,第 1组按照 2、4、6月龄接种吸附百白破乙肝 (CHO)联合疫苗 ;第 2组按照 3、4、5月龄接种吸附百白破乙肝 (CH0 )联合疫苗 ;第 3组按照 3、4、5月龄接种吸附百白破联合疫苗。 2期研究也随机分为 3组 ,第 1组按照 2、4、6月龄接种“百白破乙肝联合疫苗” ;第 2组按照 2、4、6月龄左侧上臂接种乙肝对照疫苗 ,右侧上臂接种百白破三联对照疫苗。结果 一期安全性试验观察对象 91名 ,其中接种四联疫苗的两组各有 1名体温有较弱升高 ,分别占接种例数的 3 3%。二期共接种 36 5例 ,完成全程免疫共 319例。其中四联疫苗 2 ,4 ,6月龄接种组有 4例出现副反应 ,发生率为 3 1%;按 2 ,4 ,6月龄左臂接种乙肝疫苗、右臂接种白百破三联疫苗组有 5例发生副反应 ,发生率 4 2 %;第 3组 0、1、6月龄接种乙肝对照疫苗 ,3、4、5月龄接种百白破三联对照疫苗 ,共有 14例发生副反应 ,发生率为 12 2 %。 1、2期临床观察均未发现严重副反应。接种四联疫苗后 ,接种对象血清白喉、破伤风、乙肝抗体阳转率均达 10 0 %,百日咳抗体阳转率大于 85 %。
- 张庶民侯启明马霄梁争论雷殿良王安绪马玉珍陈庚军汪玉兰李军
- 关键词：联合疫苗免疫程序免疫效果
- 以百白破疫苗为基础的联合疫苗研究进展和展望被引量：11
- 2012年
- 百日咳、白喉和破伤风联合疫苗（DTP）作为最早纳入WHO扩大免疫规划（EPI）的疫苗，已经在预防和控制这3种传染病方面发挥了重要作用。20世纪70年代，由于接种灭活全细胞百白破疫苗（DTwP）后出现了严重的不良反应，
- 卫辰侯启明张庶民陈平纡马霄
- 关键词：百白破疫苗联合疫苗扩大免疫规划百日咳全细胞
- 关于HCV不同区段抗原的反应性研究被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨各种丙型肝炎病毒 (HCV)抗原在诊断中的作用及其与HCVRNA的关系。方法 利用HCV不同区段抗原抗 -HCV酶联免疫试验 (EIA)和逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR) ,对不同临床型HCV患者进行检测。结果 各组患者均以抗 NS3和抗 C阳性率最高。但均有一定比例患者抗 NS4和抗 NS5阳性。与各单个片段抗 HCV阳性率相比 ,抗 HCV总抗体阳性率最高。结论 NS3和C抗原在检测抗 HCV中起很重要作用 ,但NS4和NS5抗原在抗 HCVEIA中的作用也不容忽视。联合应用不同区段HCV抗原将大大提高抗 HCVEIA试剂的灵敏度。
- 张庶民胡本忠庄辉祁自柏李河民张华远
- 关键词：丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒抗体抗原
- 百日咳流行病学研究进展被引量：16
- 2008年
- 百日咳是由百日咳鲍特菌感染引起的急性呼吸道传染病,人群普遍易感,尤以婴幼儿为重。全世界自20世纪50年代使用百日咳疫苗(Pertussis vaccine,PerV)以来,其发病率和死亡率有了很大程度的降低。但近些年,即使在PerV覆盖率较高的发达国家,百日咳的发病率又有了升高的趋势,而感染人群为已接种过PerV的青少年、成人为特点。产生这种现象的原因是多方面的,如:监测水平、免疫的持久性等。近些年百日咳鲍特菌的主要毒力基因的抗原漂移现象,作为又一解释原因引起了各国学者的关注。该文就百日咳的致病机制、流行病学特点、百日咳"再现"的原因等进行探讨。
- 张柳赵建宏张庶民
- 关键词：百日咳流行病学
- 流感嗜血杆菌D蛋白作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果评价
- 2021年
- 目的对流感嗜血杆菌D蛋白(protein D,PD)作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果进行评价。方法采用CDAP活化法,将PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌多糖结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/c小鼠,腹部皮下免疫3次,每次加强免疫前及末次免疫后7 d经眼眶采血,分离血清,间接ELISA法检测抗体水平及亚类,同时在末次免疫后7 d取小鼠脾脏,检测细胞免疫水平。结果 PD与A群多糖结合后能增强抗-多糖抗体的IgG水平,第3次免疫后抗体水平达1∶12 800,显著高于单独多糖组(1∶400)(P<0.05);其脾细胞经多糖及多糖蛋白混合物刺激后,IFNγ和IL-4的斑点形成细胞数量与多糖组比较均升高(P<0.05);但Th1/Th2亚群比值与单独多糖组比较并未增高(P>0.05),反而显著低于GAMP-TT组和单独PD组(P<0.05)。结论重组PD与A群多糖结合后能够增强多糖的免疫原性,既可提高体液免疫反应能力,又可激发细胞免疫反应,提示PD具备作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白载体的潜力。
- 王丽婵谭亚军卫辰张庶民张华捷马霄
- 关键词：流感嗜血杆菌A群脑膜炎奈瑟菌
- 无细胞百白破联合疫苗的安全性及免疫原性研究被引量：8
- 2009年
- 目的评价玉溪沃森生物技术有限公司研制的吸附无细胞百白破联合疫苗（DTaP）的安全性和免疫原性。方法在广西苍梧县选择600名3～5月龄，未接种过DTaP、无百日咳白喉破伤风病史的健康儿童进行临床研究，采用随机、盲法以及同类疫苗平行对照方法，将观察对象按2：1比例随机分别接种试验疫苗和对照疫苗（武汉所产DTaP），在观察期内对接种对象进行安全性观察，采集接种前后血清标本，采用ELISA法测定白喉和破伤风的抗体水平和免疫前后血清中抗Pr和FHA抗体效价。结果两疫苗组均未见严重局部和全身反应，局部反应率（1．02％）及全身反应率（21．38％）与对照组（分别为0．84％，18．15％）比较无统计学差异。免疫后抗白喉抗体（D）、抗破伤风抗体（T）、抗百日咳毒素抗体（PT）、抗丝状血凝素抗体（FHA）阳转率分别为100％、100％、97．32％和93．45％，与对照组（分别为95．78％、100．0％、88．55％和86．67％）比较D、PT、FHA抗体阳转率有统计学差异。免疫后D、T、PT、FHA抗体GMT水平分别为0．498、3．610、46．780和38．320，与对照组（0．381、2．160、33．380、32．840）比较有显著差异。结论国产新的DTaP反应轻微，安全性好，抗体应答与同类上市疫苗相似，可以推广使用。
- 黄莉荣李艳萍张庶民蔡祥勇候启明李峤黄镇
- 关键词：吸附无细胞百白破联合疫苗安全性免疫原性
- b型流感嗜血杆菌D蛋白的原核表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 目的克隆b型流感嗜血杆菌(Haemophlilus influenza type b,Hib)D蛋白(hpd)基因,原核表达并纯化重组hpd蛋白,为下一步开发以D蛋白为基础的结合疫苗奠定基础。方法从Hib CMCC株基因组DNA中PCR扩增hpd基因片段,克隆入载体pET-30a(+),构建重组原核表达质粒pET-30a-hpd,转化入感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经6 mol/L尿素变性、DEAE阴离子交换柱纯化、透析复性后,采用Western blot法鉴定其反应原性。结果重组表达质粒pET-30a-hpd经PCR及测序证明构建正确;表达的重组蛋白以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的40%;经一步过柱纯化可得到纯度达95%左右的重组蛋白;纯化的重组蛋白可与Hib免疫小鼠制备的抗血清发生特异性反应。结论已成功克隆了Hib hpd基因,并在大肠杆菌中表达了重组hpd蛋白,为下一步开发以D蛋白为基础的结合疫苗奠定了基础。
- 杜倩张华捷王一飞张庶民
- 关键词：原核细胞基因表达
- 百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素基因的克隆及原核表达
- 2010年
- 目的克隆百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素(CyaA,ACT)基因,表达并纯化重组CyaA蛋白。方法从百日咳杆菌CS株的基因组DNA中PCR扩增CyaA编码基因,克隆入载体pET30a,构建重组原核表达质粒pET30a/cyaA,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经8mol/L尿素变性、透析复性、DEAE阴离子交换柱纯化后,采用Western blot法鉴定其反应原性。结果重组原核表达质粒pET30a/cyaA经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%;纯化的重组蛋白纯度达90%左右,可与全细胞百日咳疫苗和无细胞百日咳疫苗免疫血清结合。结论已成功克隆了百日咳杆菌cyaA基因,并在大肠杆菌中表达了重组CyaA蛋白,为进一步开展CyaA的应用研究奠定了基础。
- 石碧珠张华捷孟民杰张庶民
- 关键词：百日咳杆菌克隆
- 应用Vero细胞法测定重组减毒绿脓杆菌外毒素A的残余毒力被引量：1
- 2003年
- 绿脓杆菌外毒素A(ETA)有ADP -核糖基转移酶的活性 ,在真核细胞中通过催化ADP -核糖基团从NAD+转移到EF 2 (延长因子 2 ) ,使蛋白质合成终止 ,致细胞死亡 ,其作用机制、机理与白喉毒素相同。本文应用Vero细胞法测定了绿脓杆菌外毒素A的毒性 ,发现Vero细胞对绿脓杆菌外毒素A的敏感度高达 3.0× 10 -5mg/ml,且精密度高 ,准确性好 ,是一种有效、可行的绿脓杆菌外毒素毒力的测定方法。对 3批经基因工程减毒后样品的残余毒力进行了测定 ,发现样品基本无细胞毒性 ,毒力比原毒素低 2× 10
- 马霄田霖张庶民雷殿良
- 关键词：绿脓杆菌外毒素AETAVERO细胞毒力测定
