张庶民
- 作品数：187 被引量：532H指数：14
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划河北省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 破伤风毒素C片段的基因克隆、表达、纯化及免疫原性分析被引量：6
- 2004年
- 目的 对破伤风毒素C片段进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和免疫原性分析。方法 应用PCR技术直接从破伤风梭状芽孢杆菌的质粒DNA中扩增出 1370bp的破伤风毒素C片段(简称TTC)基因 ,将此基因片段插入到表达载体pET 2 2b(+)中 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达。用阴离子交换层析和金属离子螯合亲和层析方法进行蛋白纯化后 ,参照《中国生物制品规程 2 0 0 0年版》的免疫攻击实验方法测定其效价。结果 经SDS PAGE分析 ,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的15 %。免疫印迹实验证实该重组蛋白是破伤风毒素C片段抗原。纯化得到纯度为 96 .5 %的重组蛋白 ,纯化回收率达 4 0 %。免疫攻击实验测定其效价为 18.70 6IU/mg,ED50 为 2 0 μg。经加强免疫 ,1μg免疫剂量即能产生足够的抗体保护动物免受破伤风毒素的攻击。结论 所获得的重组蛋白具有良好的免疫原性 。
- 谭亚军雷殿良张庶民
- 关键词：破伤风毒素基因克隆蛋白纯化免疫原性PCR技术基因工程疫苗
- 吸附全细胞百白破乙肝四联疫苗效果观察被引量：5
- 2003年
- 目的 考察武汉生物制品研究所研制的全细胞百日咳、白喉、破伤风、乙肝联合疫苗的安全性和免疫原性 ,探讨联合疫苗的免疫程序。方法 进行 2期临床观察。将研究对象随机分为 3组 ,第 1组按照 2、4、6月龄接种吸附百白破乙肝 (CHO)联合疫苗 ;第 2组按照 3、4、5月龄接种吸附百白破乙肝 (CH0 )联合疫苗 ;第 3组按照 3、4、5月龄接种吸附百白破联合疫苗。 2期研究也随机分为 3组 ,第 1组按照 2、4、6月龄接种“百白破乙肝联合疫苗” ;第 2组按照 2、4、6月龄左侧上臂接种乙肝对照疫苗 ,右侧上臂接种百白破三联对照疫苗。结果 一期安全性试验观察对象 91名 ,其中接种四联疫苗的两组各有 1名体温有较弱升高 ,分别占接种例数的 3 3%。二期共接种 36 5例 ,完成全程免疫共 319例。其中四联疫苗 2 ,4 ,6月龄接种组有 4例出现副反应 ,发生率为 3 1%;按 2 ,4 ,6月龄左臂接种乙肝疫苗、右臂接种白百破三联疫苗组有 5例发生副反应 ,发生率 4 2 %;第 3组 0、1、6月龄接种乙肝对照疫苗 ,3、4、5月龄接种百白破三联对照疫苗 ,共有 14例发生副反应 ,发生率为 12 2 %。 1、2期临床观察均未发现严重副反应。接种四联疫苗后 ,接种对象血清白喉、破伤风、乙肝抗体阳转率均达 10 0 %,百日咳抗体阳转率大于 85 %。
- 张庶民侯启明马霄梁争论雷殿良王安绪马玉珍陈庚军汪玉兰李军
- 关键词：联合疫苗免疫程序免疫效果
- 以百白破疫苗为基础的联合疫苗研究进展和展望被引量：11
- 2012年
- 百日咳、白喉和破伤风联合疫苗（DTP）作为最早纳入WHO扩大免疫规划（EPI）的疫苗，已经在预防和控制这3种传染病方面发挥了重要作用。20世纪70年代，由于接种灭活全细胞百白破疫苗（DTwP）后出现了严重的不良反应，
- 卫辰侯启明张庶民陈平纡马霄
- 关键词：百白破疫苗联合疫苗扩大免疫规划百日咳全细胞
- 关于HCV不同区段抗原的反应性研究被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨各种丙型肝炎病毒 (HCV)抗原在诊断中的作用及其与HCVRNA的关系。方法 利用HCV不同区段抗原抗 -HCV酶联免疫试验 (EIA)和逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR) ,对不同临床型HCV患者进行检测。结果 各组患者均以抗 NS3和抗 C阳性率最高。但均有一定比例患者抗 NS4和抗 NS5阳性。与各单个片段抗 HCV阳性率相比 ,抗 HCV总抗体阳性率最高。结论 NS3和C抗原在检测抗 HCV中起很重要作用 ,但NS4和NS5抗原在抗 HCVEIA中的作用也不容忽视。联合应用不同区段HCV抗原将大大提高抗 HCVEIA试剂的灵敏度。
- 张庶民胡本忠庄辉祁自柏李河民张华远
- 关键词：丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒抗体抗原
- 百日咳流行病学研究进展被引量：16
- 2008年
- 百日咳是由百日咳鲍特菌感染引起的急性呼吸道传染病,人群普遍易感,尤以婴幼儿为重。全世界自20世纪50年代使用百日咳疫苗(Pertussis vaccine,PerV)以来,其发病率和死亡率有了很大程度的降低。但近些年,即使在PerV覆盖率较高的发达国家,百日咳的发病率又有了升高的趋势,而感染人群为已接种过PerV的青少年、成人为特点。产生这种现象的原因是多方面的,如:监测水平、免疫的持久性等。近些年百日咳鲍特菌的主要毒力基因的抗原漂移现象,作为又一解释原因引起了各国学者的关注。该文就百日咳的致病机制、流行病学特点、百日咳"再现"的原因等进行探讨。
- 张柳赵建宏张庶民
- 关键词：百日咳流行病学
- 流感嗜血杆菌D蛋白作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果评价被引量：1
- 2021年
- 目的对流感嗜血杆菌D蛋白(protein D,PD)作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果进行评价。方法采用CDAP活化法,将PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌多糖结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/c小鼠,腹部皮下免疫3次,每次加强免疫前及末次免疫后7 d经眼眶采血,分离血清,间接ELISA法检测抗体水平及亚类,同时在末次免疫后7 d取小鼠脾脏,检测细胞免疫水平。结果 PD与A群多糖结合后能增强抗-多糖抗体的IgG水平,第3次免疫后抗体水平达1∶12 800,显著高于单独多糖组(1∶400)(P<0.05);其脾细胞经多糖及多糖蛋白混合物刺激后,IFNγ和IL-4的斑点形成细胞数量与多糖组比较均升高(P<0.05);但Th1/Th2亚群比值与单独多糖组比较并未增高(P>0.05),反而显著低于GAMP-TT组和单独PD组(P<0.05)。结论重组PD与A群多糖结合后能够增强多糖的免疫原性,既可提高体液免疫反应能力,又可激发细胞免疫反应,提示PD具备作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白载体的潜力。
- 王丽婵谭亚军卫辰张庶民张华捷马霄
- 关键词：流感嗜血杆菌A群脑膜炎奈瑟菌
- b型流感嗜血杆菌D蛋白的原核表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 目的克隆b型流感嗜血杆菌(Haemophlilus influenza type b,Hib)D蛋白(hpd)基因,原核表达并纯化重组hpd蛋白,为下一步开发以D蛋白为基础的结合疫苗奠定基础。方法从Hib CMCC株基因组DNA中PCR扩增hpd基因片段,克隆入载体pET-30a(+),构建重组原核表达质粒pET-30a-hpd,转化入感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经6 mol/L尿素变性、DEAE阴离子交换柱纯化、透析复性后,采用Western blot法鉴定其反应原性。结果重组表达质粒pET-30a-hpd经PCR及测序证明构建正确;表达的重组蛋白以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的40%;经一步过柱纯化可得到纯度达95%左右的重组蛋白;纯化的重组蛋白可与Hib免疫小鼠制备的抗血清发生特异性反应。结论已成功克隆了Hib hpd基因,并在大肠杆菌中表达了重组hpd蛋白,为下一步开发以D蛋白为基础的结合疫苗奠定了基础。
- 杜倩张华捷王一飞张庶民
- 关键词：原核细胞基因表达
- 百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素基因的克隆及原核表达
- 2010年
- 目的克隆百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素(CyaA,ACT)基因,表达并纯化重组CyaA蛋白。方法从百日咳杆菌CS株的基因组DNA中PCR扩增CyaA编码基因,克隆入载体pET30a,构建重组原核表达质粒pET30a/cyaA,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经8mol/L尿素变性、透析复性、DEAE阴离子交换柱纯化后,采用Western blot法鉴定其反应原性。结果重组原核表达质粒pET30a/cyaA经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%;纯化的重组蛋白纯度达90%左右,可与全细胞百日咳疫苗和无细胞百日咳疫苗免疫血清结合。结论已成功克隆了百日咳杆菌cyaA基因,并在大肠杆菌中表达了重组CyaA蛋白,为进一步开展CyaA的应用研究奠定了基础。
- 石碧珠张华捷孟民杰张庶民
- 关键词：百日咳杆菌克隆
- 应用Vero细胞法测定重组减毒绿脓杆菌外毒素A的残余毒力被引量：1
- 2003年
- 绿脓杆菌外毒素A(ETA)有ADP -核糖基转移酶的活性 ,在真核细胞中通过催化ADP -核糖基团从NAD+转移到EF 2 (延长因子 2 ) ,使蛋白质合成终止 ,致细胞死亡 ,其作用机制、机理与白喉毒素相同。本文应用Vero细胞法测定了绿脓杆菌外毒素A的毒性 ,发现Vero细胞对绿脓杆菌外毒素A的敏感度高达 3.0× 10 -5mg/ml,且精密度高 ,准确性好 ,是一种有效、可行的绿脓杆菌外毒素毒力的测定方法。对 3批经基因工程减毒后样品的残余毒力进行了测定 ,发现样品基本无细胞毒性 ,毒力比原毒素低 2× 10
- 马霄田霖张庶民雷殿良
- 关键词：绿脓杆菌外毒素AETAVERO细胞毒力测定
- 冠心病患者MBL、Hs-CRP的变化及相关性分析
- ＜正＞【目的】测定冠心病患者血浆MBL、Hs-CRP含量,分析这些因素的变化及相关性,探讨冠心病的可能致病机制。【方法】收集100例冠心病（CHD）病人和60例健康对照者抗凝血,
- 贾天军程健君蔡念光孙黎罗强张庶民吕占军
- 关键词：冠心病MBLHS-CRP
- 文献传递
