尹元琴
- 作品数：41 被引量：128H指数：7
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划辽宁省教育厅课题基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原发性肝细胞肝癌细胞凋亡与bcl-2基因的关系被引量：4
- 2001年
- 目的 研究细胞凋亡相关基因bcl- 2与原发性肝细胞肝癌 (HCC)细胞凋亡的关系。方法 采用TdT酶介导的生物素化dutp缺口末端标记技术 (Tunel)和免疫组化SP法 ,检测肝癌组织的细胞凋亡指数和bcl- 2基因的表达并以慢性肝炎肝组织作为对照。结果 慢性肝炎肝组织细胞凋亡指数显著高于癌组织细胞 (P <0 0 1) ,bcl - 2在癌组织中的表达为5 1 3% ,在对照组中的表达为 2 5 %。肝癌组织中bcl- 2表达与癌组织凋亡指数呈负相关。结论 在HCC中 ,癌细胞凋亡明显受到抑制 ,其发生可能与bcl- 2基因调节障碍有关。
- 尹元琴任常山
- 关键词：肝细胞肝癌细胞凋亡BCL-2基因基因表达
- 细胞周期调控因子p27、Cyclin D1和DNA含量在食管癌中联合检测的意义被引量：7
- 2006年
- 目的探讨食管癌中CyclinD1、p27的表达及与DNA含量联合测定的意义及相互关系。方法收集食管癌组织及癌周正常组织标本,应用免疫组织化学检测CyclinD1、p27蛋白表达,应用流式细胞术检测DNA含量。结果食管癌组织中CyclinD1和p27蛋白表达阳性率分别为45.8%和33.3%,CyclinD1表达阳性组的DNA含量显著高于CyclinD1表达阴性组分别为(1.54±0.21)和(1.08±0.43),(P<0.05),而p27表达阳性组的DNA含量和SPF值低于p27蛋白表达阴性组分别为(1.10±0.19),(5.56±5.18)%和(1.66±0.28),(19.78±6.12)%,(P<0.05)。结论CyclinD1、p27蛋白与食管癌的发生、发展有关,检测CyclinD1、p27及DNA含量可作为诊断和评估食管癌恶性程度的重要指标.
- 马萍王晓华尹元琴姜又红隋承光孟凡东
- 关键词：CYCLINP27细胞周期调控因子食管癌
- HSV-1载体中介lacZ基因导入大鼠中枢神经系统及其表达的研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究用HSV-1载体将外源基因导入大鼠中枢神经系统的方法。方法将HSV-1载体接种于大鼠嗅神经末梢,在不同时间取各部位脑组织检测lacZ基因表达产物β-半乳糖苷酶活性,并观察大鼠脑组织局部及全身的病理学和免疫学变化。结果接种HSV-l载体后2d在嗅球中检测到β-半乳糖苷酶活性,接种后4d在嗅球、嗅前神经核、蓝斑、杏仁核、海马、颞叶皮质、间脑以及最后区均检测到β-半乳糖苷酶活性,并持续10周以上;脑组织及全身各脏器未见病理学及免疫学改变。结论HSV-1载体可通过大鼠嗅神经通路将外源基因导入中枢神经系统并在其中表达。
- 隋承光尹元琴任常山
- 关键词：基因转染单纯疱疹病毒I型
- 人白细胞介素32γ基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的构建人白细胞介素32γ(IL-32γ)基因重组腺病毒载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法从表达质粒pDONR223中扩增目的片段IL-32γ,定向克隆至穿梭载体pShuttle-GFP-CMV获得pShuttle-(ΔGFP)-IL-32γ,经I-CeuI+I-SceI双酶切处理后转移至腺病毒载体pAdxsi,得到Ad-IL-32γ进行PCR鉴定及滴度测定。将Ad-IL-32γ转染至人胚肾细胞HEK293中,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)确定Ad-IL-32γ的转染效率,并通过Western印迹检测目的基因IL-32γ的表达。结果目的片段IL-32γ转入穿梭载体后,酶切鉴定pShuttle-(ΔGFP)-IL-32γ正确。酶切穿梭载体将目的基因片段克隆至腺病毒载体pAdxsi得到Ad-IL-32γ病毒载体,酶切鉴定证实构建成功。Ad-IL-32γ病毒滴度为2×1010pfu/ml。转染HEK293细胞通过观察GFP判断转染效率,并通过Western印迹证实其在HEK293中的表达。结论成功构建IL-32γ重组腺病毒载体并证实其能在体外有效表达IL-32γ蛋白,为进一步基于Ad-IL-32γ的基因治疗研究奠定基础。
- 李松林朱妍妍李霏尹元琴
- 关键词：腺病毒基因治疗
- 人神经生长因子cDNA的克隆与表达
- 目前人们已将NGF应用于AD和帕金森氏病的临床治疗,但是目前的疗效并不是太好,这与给药途径有很大关系.因此研究用基因导入方法使NGF作用于靶部位,或许是提高疗效的途径之一.为此,首先需了解NGF基因导入真核细胞后的表达情...
- 尹元琴
- 关键词：神经生长因子克隆生物活性
- 文献传递
- 原核细胞中人神经生长因子基因的克隆
- 2003年
- 目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌。结果:βNGF cDNA经BamHI和PstI 双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆。结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA。
- 尹元琴马萍隋承光任常山
- 关键词：神经生长因子克隆原核细胞CDNA限制性内切酶
- 丙型肝炎抗原和乙型肝炎表面抗原在原发性肝细胞癌肝组织中的定位被引量：1
- 1994年
- 用免疫组化技术对６４例原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织进行丙型肝炎抗原（ＨＣＡｇ）和乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）定位和分布的研究。结果见ＨＣＡｇ呈粗颗粒深着色，弥漫性分布于全核，部分核仁可显色。肝性细胞多数散在分布于癌组织中，少数集中分布。ＨＢｓＡｇ呈棕褐色细颗粒，分布于细胞浆和细胞膜，阳性细胞多数呈聚集性分布，少数呈散在分布。６４例ＨＣＣ癌组织中的ＨＣＡｇ阳性率为１２．５％（８／６４），ＨＢｓＡｇ阳性率为２６．５％（１７／６４）。１５例癌周组织，呈现ＨＣＡｇ或ＨＢｓＡｇ染色阳性者占６．６％，３３％。揭示ＨＣＶ在ＨＣＣ的发生中，有相当一部分以与ＨＢＶ双重感染形式存在。
- 尹元琴周子文王占英王兆荃
- 关键词：丙型肝炎抗原表面抗原肝细胞癌
- 人神经生长因子cDNA的体外扩增被引量：1
- 2001年
- 目的 提取人胎盘组织中RNA ,以其中的mRNA为模板 ,扩增人 βNGFcDNA ,并测定核苷酸序列 ,为进一步克隆及表达 βNGFcDNA奠定基础。方法 采用异硫氢酸胍法提取RNA ;采用RT -PCR技术扩增人 βNGFcDNA ;Sanger双脱氧链终止法测定核苷酸序列。结果 从人胎盘组织中提取RNA ,以其中的mRNA为模板 ,扩增出人 βNGFcDNA ,经琼脂糖凝胶电泳鉴定为目的片段 ,序列测定证实与实际序列相符。结论 以人胎盘组织中的mRNA为模板 ,运用RT -PCR技术扩增 βNGFcDNA ,扩增时在 5′端以限制性内切酶酶切位点加以修饰 ,以便于 βNGF基因的克隆及表达。
- 尹元琴任常山
- 关键词：神经生长因子CDNA体外扩增
- 干扰素-γ增强全反式维甲酸诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)和全反式维甲酸(all-trans retinoicacid,ATRA)联合作用抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长及诱导细胞凋亡的作用。方法用IFN-γ和ATRA处理SMMC-7721细胞后,应用MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖抑制率,电镜观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测核因子(Nuclear Factor-kappaB,NF-κB)的表达变化。结果ATRA作用于SMMC-7721后,细胞生长受到抑制,并且诱导细胞凋亡发生,和IFN-γ联合作用后,这种作用加强;SMMC-7721细胞中NF-κB的表达在ATRA作用后减少,ATRA与IFN-γ联合作用后进一步减少。结论IFN-γ可以增强ATRA对于肝癌细胞的生长抑制及诱导细胞凋亡的作用,并且明显下调了NF-κB的表达。
- 尹元琴王晓华马萍付立业王扬
- 关键词：肝细胞肝癌全反式维甲酸干扰素-Γ核因子-ΚB
- 乙肝疫苗增强细胞因子诱导的杀伤细胞对于转乙型肝炎病毒基因小鼠的治疗作用被引量：3
- 2010年
- 目的观察乙肝疫苗是否增强细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cell，CIK）对于乙型肝炎病毒转基因小鼠（hepatitis Bvirustransgenicmice，HBV—Tg）的抗病毒作用。方法给予HBV—Tg腹腔注射CIK细胞，皮下注射乙肝疫苗，用荧光定量PCR检测外周血中HBV DNA水平变化，流式细胞仪检测外周血中T淋巴细胞亚群，并用HE染色观察肝脏的组织病理改变。结果CIK细胞降低了HBV—Tg鼠外周血中病毒载量，血中CD3^＋、CD4^＋及CD8^＋细胞增多，乙肝疫苗和CIK细胞联合应用后，这种作用增强。结论乙肝疫苗增强了CIK对于HBV—Tg小鼠的治疗作用，这种增强作用是否通过增加体内CD3^＋、CD4^＋及CD8^＋细胞，尤其是CD8^＋细胞而实现，有待进一步研究。
- 尹元琴都姝妍王扬戴晓淳舒红隋承光孟凡东姜又红
- 关键词：乙型肝炎转基因小鼠CIK细胞乙肝疫苗
