姚炜敏
- 作品数：11 被引量：41H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沙芭特在非细菌性前列腺炎症中的抗炎、抗纤维化及促进上皮细胞凋亡作用的研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨锯叶棕果实提取物沙芭特在非细菌性前列腺炎中的效应及其机制。方法前列腺上皮细胞RWPE-1经M1表型的单核巨噬细胞THP-1细胞上清液共培养,治疗组加用沙芭特(10μg/ml)培养,MTS检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、ELISA及Western blot检测炎症、纤维化及凋亡相关的蛋白分子(IL-1β、IL-17、TNF-α、Fas、COX2、Bax、TGF-β、DDR1、α-SMA及CollagenⅠ)的表达。消痔灵前列腺注射诱导大鼠非细菌性前列腺炎模型,用von Frey纤维检测沙芭特治疗前后各组大鼠的痛觉敏感性,然后麻醉SD大鼠,腔静脉取血后摘取前列腺组织并称重,免疫组化及ELISA检测炎症因子的表达,masson染色检测纤维化。结果沙芭特抑制RWPE-1的增殖并促进其凋亡。M1表型THP-1条件培养液能促进上皮细胞表达IL-1β、TNF-α及COX-2,沙芭特处理能抑制炎症刺激所致的炎症因子表达,Western blot检测表明沙芭特处理能抑制COX-2、DDR1、SMA及CollagenⅠ的表达,增加Fas及Cleaved-caspase 3的表达。消痔灵100μl每侧叶注射可以成功诱导前列腺炎症模型,沙芭特60mg/kg能减少大鼠前列腺组织炎症因子的表达,缩小前列腺体积,降低大鼠痛觉敏感性。结论沙芭特能抑制前列腺上皮细胞RWPE-1的增殖并促进其凋亡,减小前列腺体积,抑制炎症因子及纤维化相关分子的表达,减轻前列腺炎症及纤维化从而起到治疗作用。
- 杨涛吴柏霖周辉刘培军姚炜敏曾瑾余淦徐华叶章群
- 自发性高血压大鼠口服托特罗定的中长期耐受性研究被引量：2
- 2010年
- 目的:探索自发性良性前列腺增生大鼠模型(自发性高血压大鼠,SHR)口服托特罗定的中长期耐受性。方法:雄性13周龄SHR大鼠20只,随机分成4组,其中3组每组6只,分别给予托特罗定4.2 mg/(kg·d)、5.3 mg/(kg·d)、7 mg/(kg·d),以生理盐水配成悬液分两次灌胃给药,给药容量为1.5 ml/100g;剩余2只为对照组,给予同样体积的生理盐水,连续灌胃4周。灌胃期间观察大鼠的一般表现、进食、饮水、体重增长等,灌胃结束后检测主要脏器组织结构和功能变化情况。结果:灌胃期间各组大鼠表现正常,未出现药物引起的死亡;低剂量组日均进食、饮水量均较其他组明显增多(P<0.01);各剂量组体重与对照组比较差异无统计学意义,但是两周后低剂量组体重增长较中剂量组快(P<0.05),余各剂量组间比较差异无统计学意义;中、高剂量组肝脏比重较对照组为低(P<0.05),余重要器官比重与对照组比较差异无统计学意义;各剂量组肝功能与对照组相比变化不明显;肾功能水平各剂量组血CREA、UREA水平均对照组为低(P<0.05);各组主要脏器组织切片病理学观察未见异常改变。结论:自发性高血压大鼠口服托特罗定的中长期耐受性良好。
- 蔡建良姚炜敏李宁忱陈志强叶章群那彦群
- 关键词：良性前列腺增生托特罗定药物耐受性
- 脱特罗定持续干扰胆碱能神经支配时大鼠良性增生前列腺腺上皮细胞的影响被引量：2
- 2014年
- 目的观察脱特罗定持续干扰胆碱能神经支配对大鼠良性增生前列腺腺上皮的影响。方法将29周龄雄性自发性高血压（SHR）大鼠42只，分为实验组18只，对照组18只，正常对照组6只。实验组每天2次脱特罗定（3．5mg/kg体质量，溶解于1．0ml生理盐水）灌胃给药，对照组每天2次胃内灌人等量的生理盐水，正常对照组不做任何处理。每12周处死一批大鼠，比较各组SHR大鼠前列腺腹侧叶大体形态、湿重／体质量比值、干重／湿重比值，组织切片光镜、透射电镜下观察，免疫组织化学LC3—Ⅱ染色等。结果各阶段实验组SHR大鼠前列腺腹侧叶大体形态与对照组差异不明显，两组大鼠前列腺腹侧叶湿重／体质量比值随周龄均进行性升高，各阶段两者差异均无统计学意义（P〉0．05）；对照组大鼠前列腺腹侧叶干重／湿重比值随周龄进行性升高，但实验组升高趋势不明显，41周龄后两组差异有统计学意义（P〈0．01）；光镜下观察，对照组大鼠前列腺腺上皮细胞继续呈现良性增生状态且进行性明显，而实验组大鼠前列腺腺上皮细胞逐渐出现萎缩性改变，41周龄后两组差异较为明显；电镜下观察，对照组前列腺腺上皮细胞呈现随周龄进行性明显的细胞增生和分泌功能亢进，腺细胞胞质内自噬体、自噬前体和自噬溶酶体结构众多；而实验组腺上皮细胞增生表现和胞质内自噬体结构随大鼠周龄的增加而逐渐下降，41周龄后两组差异有统计学意义（P〈0．01）；典型的细胞凋亡现象在实验组和对照组各阶段差异均不明显；免疫组织化学实验发现，实验组大鼠前列腺腺上皮细胞胞质LC3-Ⅱ／LC3-Ⅰ阳性染色较同周龄对照组大鼠显著下降，其差异亦随大鼠周龄的延长而更明显，41周龄后差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组大鼠与正常对照组比较，上述差异均无统计学意
- 蔡建良姚炜敏苑学礼夏溟那彦群
- 关键词：良性前列腺增生胆碱能神经去神经支配
- VHL和ZBRK1相互作用在肾癌发生发展的分子机制研究
- 探讨VHL和ZBRK1相互作用在肾癌发生发展的分子机制.运用定量PCR及免疫荧光检测肾癌样本中ZBRK1的表达情况,分析其临床意义.ZBRK1与VHL相互作用结构域的确定以及共定位分析.运用酵母双杂交技术,定量PCR,免...
- 余淦姚炜敏陈科肖海兵曾瑾徐华叶章群
- 连接桥粒斑珠蛋白通过调节HIF2α并降低其稳定性抑制肾细胞癌的肿瘤发生
- 2022年
- 背景与目的低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 2α,HIF2α)活性增高常见于肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的进展过程。HIF2α在ccRCC中的功能和作用机制仍不清楚。本研究阐释了连结桥粒斑珠蛋白(junction plakoglobin,JUP)和HIF2α在ccRCC中的作用。方法采用亲和纯化联合质谱(affinity purification and mass spectrometry,AP-MS)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-s-transferase,GST)沉降和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)法筛选和鉴定出可与HIF2α相互作用的蛋白质。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting法检测人ccRCC样本中JUP的表达情况。采用荧光素酶报告基因、染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)、环己酰亚胺追踪实验、泛素化检测研究JUP对HIF2α活性的调节。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测、集落形成实验、transwell迁移实验、异种移植瘤模型研究JUP敲减或过表达对肾癌细胞致瘤活性的影响。结果我们的研究发现,JUP是一种新的HIF2α结合蛋白,通过将VHL(von Hippel-Lindau,VHL)和组蛋白去乙酰化酶1/2(histone deacetylases 1/2,HDAC1/2)招募到HIF2α并调节其稳定性和转录活性来发挥重要作用。在体内和体外实验中,敲减JUP可促进肾细胞癌的致瘤活性;相反,JUP过表达则可抑制肾细胞癌的致瘤活性。另外,在ccRCC临床样本中JUP低表达,而且其低表达与低氧评分升高及预后更差相关。结论本研究表明JUP在ccRCC进展过程中通过调节HIF2α信号通路发挥重要作用,JUP可作为一个潜在的治疗靶点。
- 陈科曾瑾孙旖欧阳为余淦余淦张杨军周辉肖巍胡峻珲姚炜敏肖克峰肖巍陈志强叶章群邢金春
- 关键词：肾细胞癌转录活性
- 稳定表达绿色荧光的大鼠胚胎来源肝干细胞被引量：1
- 2010年
- 背景:胎肝来源肝干细胞作为细胞移植的供体来源具有优势,但有鉴于干细胞特质,其培养困难,传代后易分化生长;且现有干细胞示踪定位技术欠成熟,这些均是制约肝干细胞移植的重要因素。目的:观察原代肝干细胞电转pEGFP-Cl质粒是否能获得稳定表达绿色荧光的肝干细胞。方法:联合机械分离和胶原酶消化法体外分离孕13.5dSD大鼠胚胎来源肝细胞,应用特异培养基培养分离细胞,随后通过半量换液法纯化出肝干细胞,采用细胞免疫荧光法对贴壁细胞进行鉴定,并用pEGFP-Cl质粒电转染原代肝干细胞后持续表达绿色荧光作示踪定位标志。结果与结论:原代培养的胎肝干细胞24h后可见细胞半贴壁,形态基本相同,呈圆形或卵圆形;第2天观察细胞为大小几乎一致的圆形;培养第3天出现一些由3,5个形态一致的细胞集落,细胞直径6～10μm;细胞集落不断增大,至第5天集落中细胞数量增至10个左右,集落由大小不等的致密圆形细胞组成,界限清楚;第8天后细胞呈上皮样铺展;第12天时,细胞变大呈煎蛋样摊开,形态不规则,细胞浆内可见颗粒,生长变得缓慢;传代后细胞扩增速度无明显变化,至第3代仍保持较均一的上皮细胞状;通过细胞免疫荧光法检测出培养第5天的贴壁细胞表达干细胞标志物CD34和胆管细胞标志物CK19;经筛选pEGFP-Cl质粒电转染后的原代肝干细胞能稳定表达绿色荧光。实验成功构建转染了绿色荧光蛋白的肝干细胞。
- 杨欢叶章群陈志强王博涵姚炜敏
- 关键词：肝干细胞CD34CK19转染
- 长链非编码RNA PTENP1在肾透明细胞癌中的功能及分子机制研究
- 目的:研究长链非编码RNA PTENP1在人肾透明细胞癌中表达及调控，并进一步探索其功能及分子机制。 方法:运用lncRNAs芯片技术及qTR-PCR方法初步分析lncRNAs在人肾透明细胞癌中表达谱。用qRT-PCR...
- 姚炜敏
- 关键词：肾透明细胞癌分子机制
- 倒置排石床治疗肾下盏残石的临床研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨倒置排石床辅助治疗肾下盏残石的作用。方法 79例经皮肾镜取石术(PCNL)、体外冲击波碎石术(SWL)和输尿管镜碎石术(URL)后出现肾下盏残石患者,残石直径小于4mm,随机、对照、单盲分为实验组和对照组。实验组40例患者使用倒置排石床治疗。对照组39例患者每日多饮水,保持尿量2 000mL以上。1个月后行腹部平片复查残石情况。结果实验组患者均顺利完成倒置排石床治疗。实验组和对照组患者年龄、性别、BMI及残石的大小差异无统计学意义(P>0.05)。肾脏的解剖参数如肾下盏长度、肾下盏肾盂夹角和肾下盏盏颈宽度实验组和对照组差异无统计学意义(P>0.05)。1个月后实验组的残石清除率达到75%而对照组仅为41%(P<0.05)。结论倒置排石床可提高肾下盏残石的清除率,可以作为PCNL、SWL和URL术后的辅助治疗方法。
- 王博涵刘军姚炜敏夏丁余虓郭小林陈志强叶章群
- 关键词：肾下盏残石
- 巨大膀胱平滑肌瘤1例报告
- 2016年
- 膀胱平滑肌瘤是一种罕见的间叶性良性肿瘤,2015年12月同济医院收治1例,现报告如下。患者,女,28岁。排尿不畅半年,加重2月余。无尿频、尿急、尿痛、血尿;无尿流中断、尿不尽感等不适。近2个月排尿困难、排尿费力症状加重,需靠腹压辅助排尿。当地医院B超：膀胱占位性病变。拟手术治疗,故转诊我院。
- 杨朝裕张剑平姚炜敏饶可刘继红郭小林
- 关键词：膀胱平滑肌瘤膀胱镜检膀胱区膀胱占位
- 产甲酸草酸杆菌甲酰辅酶A转移酶基因和草酰辅酶A脱羧酶基因慢病毒表达载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的构建尉人肠道米源产甲酸草酸杆菌（OxCF）甲酰辅酶A转移酶（FCoAT）基因（FRC）和草酰辅酶A脱羧酶（OCoAD）基因（OXC）的重组慢病毒pLenti6．3-FRC—IRES—EGFP和pLenti6．3-OXC—IRES—DsRED，为高草酸尿症的基因治疗奠定基础。方法采用Taq高保真DNA聚合酶从OxCF基因组中扩增FRC基因和OXC基因片段，用DNA凝胶回收试剂盒切胶回收，用DNA连接试剂盒将回收产物分别与pMD18-TSimple载体连接获得FRC和OXC的克隆载体，并转化大肠杆菌DH5a感受态细胞，挑取阳性克隆并测序，筛选携带完整目的基因质粒pMD18Tsimple—FRC和pMD18Tsimple—OXC，用BamHI酶切获得目的基因，连接FRC和携带绿色荧光蛋白的pLenti6．3／v5DEST—IRES—EGFP，连接OXC与表达红色荧光蛋白的pLenti6．3／v5DEST—IRES—DsRED，转化DH5a后挑取阳性克隆并测序。构建的慢病毒过表达载体pLenti6．3-FRC—IRES—EGFP和pLenti6．3-OXC—IRES—DsRED转染ttEK293T细胞，包装并测滴度。结果聚合酶链反应（PCR）从OxCF基因组中扩增分获得1．3kh和1．7kh的DNA片段，与Genbank中FRC（U82167）间碱基序列匹配率为95．88％，存在53个碱基的变异；与Genbank中OXC（M77128）间碱基序列匹配率为93．61％，存在109个碱基的变异；测序证实pLenti6．3-FRC—IRES—EGFP和pLenti6．3-OXC—IRES—DsRED分别含有大小正确的正向FRCcDNA和OXCcDNA，转染ttEK293T细胞实验24h后，在荧光显微镜下相应可见大量绿色荧光和红色荧光，两种慢病毒滴度分别为1．15×10^8TU／ml和9．75×10^7TU／ml。结论成功构建表达OxCF中草酸分解关键基闵FRC和OXC的重组慢病毒载体，并通过转染293细胞制备了高滴度慢病毒。
- 杨欢陈志强叶章群王博涵艾丽娅姚炜敏
- 关键词：慢病毒载体高草酸尿症
