夏立亮
- 作品数：5 被引量：10H指数：3
- 供职机构：长春理工大学更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 重组蛋氨酸裂解酶的表达、复性及活性研究被引量：6
- 2010年
- 探索以包涵体形式表达的重组蛋氨酸裂解酶的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。将阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶重组表达载体PET-15b-mgl1转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并对表达条件进行优化,获得大量表达。通过对包涵体的纯化及复性研究,检测重组蛋氨酸裂解酶的免疫活性及酶活性。Western blotting结果表明,重组蛋氨酸裂解酶免疫小鼠制备的多抗可以和从阴道毛滴虫中提取的天然蛋氨酸裂解酶发生特异性反应。活性检测结果显示复性蛋氨酸裂解酶有活性,复性效率达到25%左右。以包涵体形式表达的蛋氨酸裂解酶经变性、纯化及复性后,获得大量有活性的酶,为深入了解其结构、功能及酶学性质,开展其在临床检测中的应用研究奠定基础。
- 孔晨虹夏立亮徐顺利于源华蒋琴杨佳新
- 关键词：同型半胱氨酸基因表达包涵体复性
- 蛋氨酸裂解酶的基因克隆及表达
- L-蛋氨酸γ-裂解酶(MGL)能催化L-蛋氨酸及同型半胱氨酸的α，γ-裂解反应，被应用于肿瘤治疗及同型半胱氨酸血症的诊断。本文实现了阴道毛滴虫蛋氨酸γ-裂解酶基因克隆与表达，并对重组酶的性质进行探索。
从阴道毛滴虫...
- 夏立亮
- 关键词：抗癌剂同型半胱氨酸血症阴道毛滴虫基因克隆热稳定性
- 文献传递
- 阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的基因克隆及重组酶性质分析被引量：3
- 2010年
- 为研究重组阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的活性,从阴道毛滴虫提取RNA,经过RT-PCR克隆蛋氨酸γ-裂解酶基因,与pET-15b质粒连接构建原核表达载体pET-15b-mgl1,并测序。转化宿主菌BL21后进行诱导表达,分离纯化目的蛋白并研究其酶学性质。以L-蛋氨酸、DL-同型半胱氨酸、L-半胱氨酸为底物测定重组酶Km值为0.318、2.14、1.62mmol/L,比活性分别为20.17、318.69、56.96μmol/min/mgprotein。MGL最适pH在5.0到6.0之间,在50℃可稳定30min无活性损失。实验结果显示重组酶具有较高的活性和较好的热稳定性,为临床应用研究奠定基础。
- 夏立亮侯巍王保学刘华高伟蒋琴李鑫于源华
- 关键词：抗癌剂同型半胱氨酸血症基因克隆阴道毛滴虫
- L-蛋氨酸γ-裂解酶的研究进展被引量：4
- 2009年
- L-蛋氨酸γ-裂解酶是一种磷酸吡哆醛依赖型多功能酶,属于γ-蛋白家族。它能催化L-蛋氨酸及同型半胱氨酸的α,γ-裂解反应,被应用于肿瘤治疗及同型半胱氨酸血症的诊断。综述了蛋氨酸γ-裂解酶的来源,酶学性质,基因克隆与表达,酶的空间结构、活性位点及其应用,并对其在制备及应用中存在的问题和前景作了分析与展望。
- 夏立亮于源华薛冉王保学
- 关键词：同型半胱氨酸血症
- 蛋氨酸裂解酶的基因序列及真核表达
- 一种蛋氨酸裂解酶的基因序列及真核表达，涉及基因工程领域，其基因序列及真核表达是：从人阴道毛滴虫中克隆出蛋氨酸裂解酶基因片段，经测序这段序列全长1191bp，将该基因片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPic9k上，再转化到...
- 于源华姚健夏立亮王保学侯巍杨佳新
- 文献传递
