唐建伟
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人白细胞介素-2在大肠杆菌高效表达及其纯化与鉴定被引量：7
- 1995年
- 研究了各种因素对IL-2表达的影响,发现(1)在本工作的条件下,消除IL-2基因3′端的部分非翻译区,能提高IL-2的表达效率;(2)IL-2基因终止密码子与终止信号间的距离对表达有影响,增加此距离(D)会大大降低IL-2表达效率;(3)启动子P_L与P_R串联与否对表达效率无关重要,即带P_R cIts857 P_L元件与带clts857 P_R P_L元件对表达IL-2的效率基本一致;(4)目的基因与选择基因的表达方向对表达IL-2的效率也无影响。在此基础上构建了高效表达的质粒(pLY-4),由它产生的IL-2达到菌体总蛋白的30％～40％,表达γ-干扰素时,可达60％～80％。还建立了简易迅速纯化IL-2的方法,分离包涵体后可达80％纯度,以后再用一步分子筛柱层析即可得到95％以上纯品。
- 虞建良范佩芳郑宏大孙兰英王子轩郑仲承李伯良陈寅唐建伟刘新垣
- 关键词：人白细胞介素-2大肠杆菌基因表达
- 合成的人γ-干扰素cDNA在大肠杆菌的高效表达被引量：5
- 1994年
- 合成了人γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）ｃＤＮＡ其特点是选用了大肠杆菌偏爱密码子，将合成基因克隆到含ＰＬ启动子的不同表达载体中，共获得９种不同的表达质粒，它们的ＳＤ与起始密码子ＡＴＧ间的距离（Ｄ）不同，在起始翻译区（ＴＩＲ）的最小自由生成能△Ｇ°ｆ２９８不同，故其表达量的差异也大，其中ｐＬＹ４－γ５表达的ＩＦＮ－γ的量占菌体总蛋白的６０％－８０％，为国际上所罕见。表达高的原因是由于选择（Ｄ）距离适当。
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- 关键词：基因表达CDNA大肠杆菌
- 两种新型白细胞介素-2的热稳定优越性被引量：12
- 1996年
- 研制成两种新型白细胞介素-2(新型IL-2),其一为125Ser-IL-2,另一为125Ala-IL-2(即原型IL-2中125位Cys分别被Ser或Ala取代)。两种新型IL-2均已被高度纯化,并已完成了中试,获准临床应用。发现新型IL-2的热稳定优越性。在65℃加热,新型IL-2的稳定性高于原型,失活比原型慢,被保留的活性也较原型多。在0.1％SDS中能使失活的IL-2逐渐恢复一定的活性,也是新型IL-2恢复活性高。同时,比较了其它条件下这三种重组rIL-2的稳定性及SDS对其复性的影响,发现三者之间差异很大。上述结果均证明:125Ala-IL-2的热稳定性最好,125Ser-IL-2次之,原型较新型差。
- 唐建伟刘爱萍虞建良范佩芳刘新垣
- 关键词：白细胞介素-2热稳定性
