史巧云
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目哈尔滨市科技攻关计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一氧化氮供体和他汀对B组柯萨奇病毒感染的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究硝酸酯类和他汀类等一氧化氮(NO)供体的抗柯萨奇病毒B组3型(CVB3)的作用及其特点和机制。方法用TCID_(50)和空斑形成实验测定CVB3的毒力;MTT法确定NO供体药物的无毒性浓度;利用细胞病变效应(CPE)抑制实验和空斑形成抑制实验分析NO供体药物对CVB3在HeLa细胞和ECV-304细胞中增殖的抑制作用;并分析硝酸甘油(GTN)不同给药次数、NO浓度变化以及NO浓度与GTN对CVB3抑制效应间的相关性。结果硝酸酯类药物GTN、硝酸异山梨酯可明显抑制CVB3所致的CPE及空斑形成(P<0.05),他汀类药辛伐他汀、洛伐他汀均未显示抑制CVB3所致的CPE(P>0.05);CVB3接种前预先与GTN作用、CVB3接种同时加入GTN两种条件下CPE抑制率差异无统计学意义(P>0.05);CVB3攻击后多次给予GTN的组间CPE抑制率差异无统计学意义(P>0.05),但在CVB3攻击前不同时间点给予GTN的组间CPE抑制率差异有统计学意义(P<0.05);NO浓度与不同时间点给予GTN的CPE抑制结果呈正相关(r=0.97,P<0.01)。结论NO供体类药物硝酸酯类具有明确的抗CVB3感染作用,其抗CVB3增殖的作用与NO浓度呈正相关;他汀类药物在本实验条件下未观察到抗CVB3增殖作用,原因可能是细胞类型与他汀不匹配。
- 史巧云钟照华李晓波孙艳影张中海张凤民谷鸿喜
- 关键词：一氧化氮供体柯萨奇病毒B组3型硝酸酯类他汀
- iNOS基因和iNOS-VP1融合基因表达载体的构建和表达
- 目的：柯萨奇B组病毒(coxsackievirus group B，CVB)是人类病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)的主要病原。研究证明，约有25％CVB性心肌炎最终演变为扩张型心肌病(dilat...
- 史巧云
- 关键词：诱导型一氧化氮合成酶真核表达载体B组柯萨奇病毒INOS基因
- 文献传递
- Balb/c乳鼠心肌细胞的分离和体外培养方法的优化被引量：2
- 2007年
- 目的探讨Balb/c乳鼠心肌细胞分离和培养方法,优化出Balb/c乳鼠心肌细胞分离和培养的方法。方法取乳鼠心脏,采用胰酶和胶原酶Ⅱ消化方法分离乳鼠心肌细胞,比较消化次数和消化时间对原代乳鼠心肌细胞培养的影响。结果原代培养的Balb/c乳鼠心肌细胞生长迅速、自行搏动,细胞形态完整,细胞内肌丝、线粒体清晰。分离细胞时消化次数最好控制在不多于6次,每次消化时间不超过20min。2h差速贴壁可以提高心肌细胞纯度,经肌动蛋白鉴定,心肌细胞达94.6%。结论本研究优化了分离和原代培养Blab/c乳鼠心肌细胞的方法。
- 张中海包琳史巧云李晓波钟照华
- 关键词：心肌细胞原代细胞培养
- iNOS基因和iNOS—VP1融合基因真核表达载体的构建及初步表达
- 2007年
- 目的 构建pcDNA3．1介导的诱导性一氧化氮合成酶（iNOS）的基因表达载体和pcDNA3．1介导的iNOS与柯萨奇病毒B组3型（CVB3）结构蛋白VP1融和基因的表达载体。方法 应用PCR扩增和DNA重组技术构建pcDNA3．1-iNOS和pcDNA3．1-iNOS—VP1表达载体；应用真核细胞转染技术及间接免疫荧光技术进行所构建的真核表达载体的初步表达和鉴定。结果 经PCR扩增技术用特异引物从质粒pKSiNOS分离编码iNOS开放阅读框架的cDNA，TA克隆于pMD19-T载体，根据设计引物时加入的酶切位点将插入片断亚克隆于表达载体pcDNA3．1；经PCR扩增技术用特异引物从质粒pCR2．1-VP1分离编码CVB3VP1结构蛋白的cDNA，TA克隆于pMD19-T载体，根据设计引物时加入的酶切位点将VP1亚克隆于iNOS的表达载体pcDNA3．1-iNOS，从而构建含有iNOS和VP1融合基因的真核表达载体。限制性内切酶分析、PCR鉴定和测序证实重组体peDNA3．1-iNOS和peDNA3．1-iN—OS—VP1插入片断的大小和方向正确且开放阅读框架的读码框不变；重组质粒peDNA3．1-iNOS和peDNA3．1-iNOS．VP1在HeLa细胞中均有表达，但表达效率较低。结论 获得含iNOS基因和iNOS—VP1融合基因的真核表达载体，并将重组质粒进行了初步表达，为体外iNOS抗CVB3作用的研究奠定了物质基础。
- 史巧云钟照华张中海赵文然李小波张凤民
- 关键词：诱导型一氧化氮合成酶真核表达载体
- 硝酸甘油抗B组柯萨奇病毒的作用特点和机制
- 2005年
- 目的研究硝酸甘油(GTN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用特点和机制。方法比较先经GTN预处理及与GTN同时加入的两种处理方法相同滴度的病毒所引起的CPE抑制率的差异;分别测定并比较多次给予GTN及不同时间点给予GTN对CVB3感染的HeLa细胞组间的细胞病变效应抑制效果;测定GTN在HeLa细胞中不同时间点代谢产生的NO浓度,并做NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果的相关性分析。结果预加GTN组与同时加GTN组经等量病毒攻击所引起的CPE无显著性差异(P>0.05);多次给药的组间CPE抑制率无显著性差异(P>0.05),但不同时间点给药的组间CPE抑制率具有显著差异(P<0.05),NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果呈正相关(r=0.97,P<0.01)。结论GTN是通过其代谢产物NO来发挥抗CVB3作用的。
- 李晓波曾明孙艳影史巧云钟照华田野谷鸿喜张凤民周昌伟
- 关键词：硝酸甘油柯萨奇病毒一氧化氮
- CVB1 5’-UTR的突变对病毒毒力的影响
- 2006年
- 目的:构建CVB15’-UTR突变的变异毒株,并考察其毒力的变化．方法:通过对CVB1的感染性克隆质粒PNI4的CVB15’-UTR特定的几个碱基进行定点诱变,获得二株突变的质粒C、G,然后分别转染 HaLa细胞获得变异的CVB1毒株,比较三者的毒力．结果:成功地构建了两株仍具有感染性的CVB15’- UTR突变的变异毒株C和G,空斑形成实验的结果表明无论是空斑的数目还是其直径,在36 h和48 h,C株均显高于另一突变株G及标准株PNI4(P<0．05),在60h时,两突变株均高于标准株(P<0．05),而突变株间则无显著差异(P>0．05)．结论:变异毒株C、G仍然具有感染性,而且毒力明显增强,突变株之间的毒力虽然无显著性差异,但是C株的感染力却明显高于另一突变株G和标准株PNI4．
- 张静钟照华史巧云李晓波包丽丽
- 关键词：柯萨奇病毒B组突变
