厍睿
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：西北民族大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 天祝白牦牛LF基因克隆及分子特征被引量：2
- 2009年
- 【目的】哺乳动物乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)在抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等方面起着重要作用。本试验对天祝白牦牛乳铁蛋白基因的编码区进行克隆和分子特征分析。【方法】以处于干乳期的天祝白牦牛乳腺组织为材料,通过RT-PCR克隆了包含LF基因编码区的cDNA序列(GenBank收录号为EU547252);将克隆获得的天祝白牦牛LF基因的cDNA与奶牛相应序列进行比对;对天祝白牦牛LF蛋白(GenBank收录号为ACB29795)与其它物种LF蛋白进行序列比对和进化树分析;对牦牛LF蛋白的特性和结构进行预测。【结果】克隆获得天祝白牦牛LF基因cDNA片段长度为2344bp,其中LF基因编码区全长2124bp,编码708个氨基酸;序列分析显示,克隆获得的牦牛cDNA序列与奶牛该序列存在15个碱基的变异,其中位于LF基因编码区的变异有12个,这些突变造成4个氨基酸变异;天祝白牦牛LF蛋白与奶牛、人、小鼠、山羊、绵羊、猪、狗、马、骆驼、猩猩、鸡LF蛋白氨基酸相似度分别为99.4%、69.5%、63.5%、92.4%、91.5%、72.9%、69.1%、72.6%、75.3%、69.5%和50.9%;各物种LF蛋白进化树符合物种进化规律;同源建模预测LF3D模型显示,LF为多肽链在二级结构基础上折叠形成2个极相似的、对称的球状叶,即N叶和C叶,中间由1段对蛋白酶敏感的α-螺旋连接,呈"二枚银杏叶型"结构。【结论】从天祝白牦牛克隆获得LF基因编码区全长序列并揭示了其分子特征,为牦牛LF蛋白基因工程和蛋白质功能的研究奠定了基础。
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- 关键词：牦牛克隆分子特征
- 牦牛hepcidin基因编码区的克隆和原核表达被引量：1
- 2009年
- 采用RT-PCR从牦牛肝中扩增到了hepcidin基因,将其克隆至pGEM-T载体,转化DH5α感受态细胞,获得了阳性重组质粒,牦牛hepcidin基因编码区长289 bp,编码82个氨基酸(GenBank:EU863791);与黄牛相比,牦牛hepcidin基因编码区序列存在1个碱基的变异,但未引起氨基酸的改变;将牦牛hepcidin基因编码区连接至pGEX-4T-1表达载体,成功构建了原核表达载体pGEX-4T-hepcidin;IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示,35 ku处有特异性蛋白条带,表明牦牛hepcidin抗菌肽基因成功实现了原核表达。
- 厍睿潘和平阎萍裴杰
- 关键词：牦牛HEPCIDIN基因克隆
- 甘南牦牛Lfcin基因克隆及序列分析
- 2008年
- 利用PCR技术从甘南牦牛基因组DNA中扩增获得了含乳铁蛋白素(lactoferricin,Lfcin)基因的DNA序列,将该DNA序列连接于pGEM-Teasy载体并测序,将甘南牦牛含Lfcin基因的DNA序列与奶牛相应序列进行比对,同时对牦牛、人、小鼠等物种的Lfcin蛋白进行序列分析和进化树分析。结果:试验首次克隆获得了含甘南牦牛乳铁蛋白(lactoferrin,LF)第二外显子的DNA序列(在Gen-Bank中获得登陆号EU247256),共778 bp,其中LF基因第二外显子长165 bp,编码55个氨基酸,Lf-cin蛋白占25个氨基酸;序列分析结果显示,克隆获得的牦牛DNA序列与奶牛相应序列存在3个碱基的变异;牦牛和奶牛的Lfcin蛋白质序列完全相同;各物种Lfcin蛋白具有较高的同源性,Lfcin蛋白进化树符合物种进化规律。
- 裴杰阎萍厍睿马瑞林梁春年郭宪曾玉峰包鹏甲
- 关键词：牦牛克隆
- 牦牛Hepcidin基因的克隆与原核表达
- Hepcidin是2000年首先从人类血液中发现的一类富含半胱氨酸、性质独特的抗菌肽,其不仅具有显著的抗微生物活性,还被认为是一种关键的铁代谢调节因子。因其重要的医疗应用价值而备受关注。 论文以我国高原牦牛为研...
- 厍睿
- 关键词：牦牛HEPCIDIN基因克隆
- 文献传递
- 牦牛Hepcidin基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2009年
- 根据GenBank中公布的普通牛Hepcidin基因序列(登录号为XM-589792.3)设计1对特异性引物。采用RT-PCR技术从牦牛肝脏组织总RNA中扩增出Hepcidin基因的编码序列并进行测序分析,同时构建Hepcidin蛋白物种进化树。结果显示,经克隆获得牦牛Hepcidin基因322bp的cDNA序列(GenBank登录号为EU863791),含289bp的开放阅读框,编码82个氨基酸,包括22个氨基酸的信号肽;预测Hepcidin蛋白分子质量和等电点分别为8.88ku和9.24;与已知普通牛Hep-cidin序列的同源性达99%,不同物种Hepcidin蛋白具有高度的保守性,Hepcidin蛋白物种进化树符合物种进化规律。本研究为Hepcidin基因cDNA全长克隆及基因功能研究奠定了重要基础。
- 厍睿潘和平阎萍裴杰
- 关键词：牦牛HEPCIDIN基因克隆
