刘喜平
- 作品数：8 被引量：26H指数：4
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省自然科学基金贵州省社会发展科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 正安野木瓜多糖的提取及部分特征鉴定被引量：4
- 2010年
- 目的从贵州省遵义市正安县产野木瓜中提取并纯化野木瓜多糖(Stauntonia Chinensis Polysaccharides,SCP),对其特征进行初步研究。方法用水提醇沉法提取纯化SCP;苯酚-硫酸法测定野木瓜中多糖含量;红外光谱分析其结构特征;HPLC测定单糖组成;DEAE-Sepharose fast flow分析糖样的电荷分布;Sepharose CL-6B柱层析测定分子量分布。结果 100g野木瓜粉末通过90℃热水煮提,95%乙醇沉淀得到粗多糖,经重新溶解、Sevag法脱蛋白得到SCP3.40g,得率为3.4%。SCP为米黄色粉末状固体,溶于水,不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂,其水溶液呈粘稠状,pH弱酸性,Molish反应出现紫色环呈阳性。红外吸收光谱分析结果证明所提取的SCP为含甲酯化糖醛酸的多糖类物质。SCP糖含量为51.6%,其单糖组成主要是半乳糖醛酸,甘露糖,葡萄糖醛酸,比例为46.3:18.5:10.3。同时也检测到少量的葡萄糖,半乳糖和阿拉伯糖。电荷分布测定表明SCP是中性糖和酸性糖的混合物。其分子量接近于58万da。结论 SCP为多糖混合物。
- 杨之敏于丽赵彬琳刘喜平冯赞杰钱民章
- CCR2受体介导单核细胞趋化蛋白1诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡
- 2009年
- 徐艳刘喜平尚惠锋钱民章
- 关键词：单核细胞趋化蛋白1CCR2人脐静脉内皮细胞反义技术
- CCR2介导MCP-1诱导的人内皮细胞凋亡被引量：7
- 2010年
- 本室前期工作发现,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)可诱导人内皮细胞(hVECs)凋亡.为进一步揭示MCP-1诱导凋亡分子机理,首先观察MCP-1对hVECs CC类趋化因子受体2(C-C motifchemokine receptor-2,CCR2)蛋白表达的影响.Western印迹结果显示,MCP-1以剂量依赖方式诱导CCR2在hVECs的表达.以脂质体为载体的CCR2反义寡核苷酸序列转染hVECs后,激光共聚焦显微镜及膜联蛋白(annexin)V-FITC/PI双染流式细胞术显示,CCR2反义寡核苷酸转染hVECs48h后可明显降低CCR2蛋白质的表达(P<0.05),抑制MCP-1诱导的hVECs凋亡(P<0.01).反义CCR2抑制凋亡结果与加入CCR2阻断剂RS102895后细胞凋亡测定结果一致.上述结果表明,MCP-1的主要受体CCR2介导了MCP-1诱导的hVECs凋亡.
- 徐艳刘喜平李琴山尚惠锋钱民章
- 关键词：单核细胞趋化因子1人脐静脉内皮细胞反义寡核苷酸
- 敲低DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)抑制Bel7402/5-Fu耐药肝癌细胞的细胞周期及机制被引量：2
- 2017年
- 目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对Bel7402/5-氟尿嘧啶(5-Fu)肝癌耐药细胞的细胞周期及机制的影响,探讨DNA-PKcs影响化疗敏感性的相关机制。方法采用MTT法检测Bel7402/5-Fu细胞转染siDNA-PKcs后,对5-Fu、阿霉素(ADM)的敏感性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;流式细胞术检测细胞周期;Western blot法检测细胞P21、细胞周期蛋白B1(cyclin B1)、细胞分裂周期蛋白2(CDC2)的蛋白表达情况;实时定量PCR检测细胞毛细血管扩张共济失调突变基因(ATM)、p53的mRNA水平,Western blot法检测细胞ATM、P53蛋白水平。结果敲低细胞DNA-PKcs水平后,siDNA-PKcs组5-Fu、ADM的半数抑制浓度(IC50)明显降低,S期细胞减少、G2/M期细胞增多,细胞周期抑制因子P21蛋白水平增加,cyclin B1、CDC2蛋白水平降低,ATM、p53的mRNA及蛋白水平增加。结论敲低DNA-PKcs水平,增加P21蛋白水平,同时抑制cyclin B1、CDC2蛋白水平,诱导Bel7402/5-Fu细胞G2/M期阻滞,其机制可能与ATM-p53信号途径有关。
- 李大玉刘云余春波刘喜平范芳
- 关键词：细胞周期
- 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制胆固醇诱导的人肝细胞C反应蛋白的表达被引量：1
- 2008年
- 目的研究核因子κB(NF-κB)信号通路阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对胆固醇诱导的人肝细胞C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)表达的影响。方法培养肝细胞L-02并将其分为3个组,即胆固醇作用组、PDTC+胆固醇作用组和对照组,分别作用细胞48 h。采用Western blot和免疫比浊法分别检测细胞内和细胞培养液中CRP含量,比较有无PDTC作用下CRP表达量的变化。结果胆固醇能显著诱导人肝细胞C反应蛋白的表达(P<0.05),且其诱导效应随浓度增加而增强;加入PDTC阻断NF-κB信号通路后,胆固醇诱导人肝细胞CRP基因表达的作用减弱(P<0.05)。结论PDTC阻断NF-κB信号通路后,CRP表达量下降,提示NF-κB信号通路可能参与了胆固醇诱导CRP基因表达的过程。
- 唐俊利徐海燕刘喜平钱民章
- 关键词：C反应蛋白胆固醇动脉粥样硬化核因子ΚB
- 研究生医学分子生物学教学改革与思考被引量：4
- 2013年
- 《医学分子生物学》是医学院校研究生课程教学中的一门重要基础课程,为适应高校教学改革的需要,本文对我校研究生的医学分子生物学课程教学中存在的问题进行剖析,从教学内容和方法上进行了有益的探索与实践,以期能更加完善医学研究生分子生物学课程的教学。
- 杨加伟陈静陆红玲冯赞杰刘喜平欧刚卫
- 关键词：医学分子生物学教学改革
- 虾青素对急性脑出血小鼠的神经功能的保护及机制研究被引量：6
- 2018年
- 目的观察虾青素(Astaxanthin;AST)对脑出血(ICH)小鼠脑组织炎症损伤后神经保护作用及机制研究。方法体外原代神经元细胞培养实验观察虾青素对血红蛋白(hemoglobin,Hb)诱导的原代神经元细胞损伤的影响;体内实验小鼠随机分为4组:假手术组、ICH模型组、虾青素治疗组(10 mg/kg和30 mg/kg),在ICH模型组和虾青素治疗组均采用小鼠脑立体定位仪尾状核注射自体血以建立小鼠ICH模型,假手术组注射等量生理盐水。虾青素治疗组于2 h、12 h、24 h、48 h间断灌胃给药,另2组以相同时间灌胃给予等量橄榄油处理,术后1 d、3 d、5 d、7 d对各组小鼠进行神经功能缺损评分(neurological deficit score,NDS),分别在给药3 d和7 d后取脑组织,应用Neu N染色观察小鼠脑组织神经元数量的病理变化,ELISA法检测脑血肿周围组织中的炎症细胞因子,包括白细胞介素IL-1β、凋亡相关因子Caspase-3和肿瘤坏死因子TNF-α的蛋白含量的在ICH中时间趋势的变化。结果 1 d、3 d,10 mg/kg和30 mg/kg虾青素都能减少ICH小鼠的NDS,虾青素治疗组中的ICH小鼠血肿周围组织中的IL-1β、Caspase-3和TNF-α蛋白表达明显低于ICH模型组(P<0.05),虾青素改善了ICH血肿造成的神经元细胞的继发性炎性损伤,进而抑制了神经元细胞凋亡。结论虾青素对ICH小鼠继发炎性损伤具有较好的神经元细胞保护的作用,其潜在的作用机制可能与虾青素改善ICH小鼠神经功能障碍,通过抑制炎症和凋亡的信号传导通路的过度激活,减少了炎症和凋亡相关蛋白持续的表达有关。
- 何洋高扬曹芳曹芳张强陈伟刘喜平刘喜平姚声涛
- 关键词：虾青素脑出血神经炎症神经保护
- 沉默DNA-PKcs对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu凋亡的影响被引量：2
- 2018年
- 目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、脂质体对照组、NC对照组、siDNA-PKcs实验组。采用噻唑蓝(MTT)法检测耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;Real-time PCR和Western blot分别检测细胞DNA-PKcs mRNA及蛋白的表达情况;倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化(Hoechst33342染色法);流式细胞术检测细胞凋亡情况(AnnexinV/PI双染法);Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-xl)蛋白的表达情况。结果 MTT检测Bel7402/5-Fu细胞的半抑制浓度(IC50)明显增高,耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药指数为13.13;DNA-PKcs的mRNA与蛋白表达水平明显减少,设计的siDNA-PKcs特异序列能有效沉默细胞DNA-PKcs的表达;Hoechst-33342染色检测结果显示siDNA-PKcs实验组细胞体积缩小、细胞核边集、呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,siDNA-PKcs实验组细胞凋亡率比其余组增加(P<0.01);Western blot检测结果显示siDNA-PKcs实验组Bax蛋白表达水平比其余组高,Bcl-xl蛋白表达水平比其余组低(P<0.01)。结论siDNA-PKcs能诱导肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡,并能上调促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平,抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的蛋白表达水平。
- 李大玉余春波朱欣婷刘喜平范芳李长福
- 关键词：药物耐受性
