刘华雷
- 作品数：228 被引量：983H指数：20
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 一株鸵鸟源新城疫病毒的分离及其分子生物学特性被引量：2
- 2007年
- 从2005年山东省某鸵鸟饲养场发病鸵鸟分离出1株新城疫病毒,命名为SD01,采用一步法RT-PCR扩增了该分离株F基因的重要功能区片段(535 bp),并将其克隆到pMD18-T载体中,进行序列测定,研究了其分子生物学特性。序列分析结果表明,该分离株F基因裂解位点的氨基酸组成与NDV强毒株的特征性结构一致(112R-R-Q-K-R-F117);遗传进化分析表明,该分离株在分类地位上属于基因Ⅶd型,与目前报道的鸵鸟源和其他禽类NDV毒株基因型一样,说明目前我国流行的仍然是NDV基因Ⅶ型。提示,对于鸵鸟新城疫的防治,除进行疫苗免疫之外,采取生物安全措施也是非常重要的。
- 汪艳刘华雷伏小平郑东霞徐天刚王志亮
- 关键词：鸵鸟新城疫病毒分子鉴定进化树
- 影响H9N2亚型禽流感病毒生物学特性的关键氨基酸位点分析
- 2024年
- H9N2亚型禽流感病毒是在我国家禽中流行最为广泛的亚型,严重影响养禽业健康发展,具有感染哺乳动物的能力。可感染人类的H5N1、H7N9、H10N8和H3N8等新型流感病毒中多次发现H9N2亚型禽流感病毒的内部基因,而这些感染人类的新型流感病毒对公共卫生安全造成了巨大威胁。文章围绕H9N2亚型禽流感病毒,总结了影响该亚型病毒致病性、受体结合、复制能力以及在家禽或哺乳动物中与传播有关的关键功能氨基酸位点突变的研究进展,以期进一步解析H9N2亚型禽流感病毒及其内部基因在新型流感病毒产生过程中的机制和作用。
- 周婉婷彭程蒋文明宋厚辉刘朔刘华雷
- 关键词：禽流感病毒H9N2生物学特性
- H_9N_2亚型AIV HA基因的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：20
- 2005年
- 根据GenBank公开发表的禽流感病毒(AvianInfluenzaVirus,AIV)H9N2亚型血凝素基因(HA)序列设计引物,用PCR方法从重组质粒pUCHA中扩增H9N2亚型禽流感病毒去除信号肽的血凝素基因,将该片段定向插入到原核表达载体pET32a(+)中,构建原核表达载体pETHA。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导,HA基因获得表达,经定位分析,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确定了表达HA基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.7mmol/L,诱导时间为3h。Westernblot分析表明,重组蛋白能与H9N2亚型AIV阳性血清发生特异性反应。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测H9亚型AIV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为25μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶80,阳性标准初步定为:OD待检血清>0.5且OD标准阳性血清>1.0;OD标准阴性血清<0.1。
- 郑其升刘华雷张晓勇周斌曹瑞兵任雪枫李鹏陈溥言
- H5亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法的建立与应用被引量：2
- 2019年
- H5亚型禽流感病毒HA序列差异越来越大。为更准确地检测H5亚型禽流感病毒,对GenBank中发表的H5亚型禽流感病毒HA序列以及本实验室保存病毒序列进行比对,同时设计1对引物和1条探针,建立了H5亚型禽流感病毒实时RT-PCR方法,并对该方法的反应体系和反应参数进行了优化。以本实验室分离测序确定的30份H5亚型禽流感病毒RNA为模板,将该方法与两种商品化H5亚型禽流感病毒检测试剂盒进行比对,发现该方法与两种商品化试剂盒的检出率分别为100%、98%、98%。敏感性试验显示,该方法可以检测出0.1 fg的RNA模板,灵敏度比两种商品化试剂盒均提高了10倍。结果表明,该方法具有更高的特异性和敏感性,可用于H5亚型高致病性禽流感的早期诊断。
- 蒋文明李阳程善菊刘华雷
- 关键词：H5亚型禽流感实时RT-PCR敏感性
- 人-猪链球菌2型2005四川分离株的鉴定和耐药特性研究
- 猪链球菌2型是一种人畜共患传染病,常给养猪业及公共卫生构成严重威胁。多年来,是多年来一直困扰着我国养猪业发展,成为猪群流行疾病中的主要传染病之一。2005年7月份以来,四川省资阳、内江等地猪群和人暴发了急性败血型链球菌感...
- 王君玮王志亮赵永刚赵云玲郑东霞范伟兴刘华雷
- 关键词：猪传染病猪链球菌
- 文献传递
- 新城疫流行病学与防控技术研究与应用
- 王志亮刘华雷凌红丽赵云玲
- 该项目属于农业科学的畜牧兽医领域。新城疫是由新城疫病毒强毒引起的、严重危害养禽业的烈性传染病，在全球许多国家和地区均有发生或流行。该病是OIE法定报告疫病，我国农业部将其列为一类动物疫病，国务院颁布的《国家中长期动物疫病...
- 关键词：
- 关键词：新城疫流行病学防控技术
- 一株基因Ⅶ型新城疫病毒的分离及分子鉴定被引量：19
- 2002年
- 从一起新城疫暴发的病例中分离出 1株新城疫病毒 (NDV) ,命名为铜山分离株 (TS)。运用 RT- PCR技术 ,克隆了该分离株 F基因的重要功能片段 (约 0 .5 kb) ,并进行了序列测定。序列分析表明 ,TS分离株在 F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为 1 1 2 - R- R- Q- K- R- F1 1 7,与 NDV强毒株特征相符 ,且具有 10 1处的 K(赖氨酸 )和 12 1处 V(缬氨酸 ) 2个特征性氨基酸 ,与基因 型
- 刘华雷王永坤朱国强严维巍田慧芳周继宏
- 关键词：新城疫病毒RT-PCR病毒分离分子鉴定
- 一株Ⅶb型新城疫病毒的生物学特性研究被引量：5
- 2016年
- 本研究对2013年新分离的一株鸡源新城疫病毒(NDV)(P1125)进行了致病指数测定、F基因测序和遗传进化分析,并对La Sota疫苗免疫的保护效力进行了评价。结果显示,该分离株致死鸡胚平均死亡时间为44 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数为1.988,6周龄雏鸡静脉接种致病指数为2.71。F基因测序表明其编码区长度为1 662 bp,共编码553个氨基酸,F基因裂解位点氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,具有NDV强毒典型的分子特征,HN蛋白由571个氨基酸残基组成,属于C类NDV,表明该分离株为强毒株。遗传进化分析表明该分离株属于Ⅶb亚型。同源性分析显示该分离株与La Sota氨基酸相似率为88.4%。免疫保护试验表明,La Sota灭活疫苗能够对该分离株标准剂量攻击提供临床保护,但在攻毒1 d、3 d、5 d后均可以检测到排毒现象。本研究为研制专门针对我国流行株的新城疫新型疫苗及我国新城疫的防控具有重要意义。
- 赵明戈胜强王静静赵云玲郑东霞刘华雷单虎王志亮
- 关键词：新城疫病毒免疫保护
- 新城疫病毒样颗粒研究进展被引量：9
- 2014年
- 病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)是指利用异源宿主系统表达的病毒结构蛋白自行组装成不含病毒基因组、不能复制、不具有感染能力的病毒样蛋白颗粒。VLPs具备构想逼真、安全、稳定、可刺激体液和细胞免疫应答、作为载体表达其他抗原以及可设计成区分自然感染与免疫接种等诸多优点。这些优点使得VLPs在过去30年中成为新一代疫苗制备平台。作者就新城疫VLPs相关研究进展进行较为详尽的综述,以期为中国新城疫VLPs的研究提供参考。
- 戈胜强赵明吴晓东王静静刘华雷包静月王志亮
- 关键词：新城疫病毒病毒样颗粒疫苗
- 鸡副粘病毒病防制的探讨被引量：7
- 2000年
- 王永坤严维巍周继宏田慧芳朱国强钱忠明李玉峰刘华雷庄国宏王建业郁斌
- 关键词：防制症状
