马文智
- 作品数:33 被引量:55H指数:5
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- 精原干细胞移植受体的制备方法
- 本发明公开了一种精原干细胞移植受体的制备方法,具体包括如下过程:先对受体进行睾丸局部热应激处理,生精小管形成中空后,将白消安注入处理后受体的生精小管内。本发明能够实现精原干细胞移植受体的安全制备,采用本发明制备的受体对供...
- 马文智贾桦王佳马雯雯尹鹏珞鹿欣然
- 小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH、FSH+LH对Cx43表达的影响
- 2015年
- 目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)、FSH和促黄体生成素(LH)共同干预,观察FSH及FSH+LH干预对冻存卵巢卵泡缝隙连接蛋白(connexin-43,Cx43)表达的影响,从而判断最佳的激素保护方法。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),0.3IU·m L^(-1)FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及0.15IU·m L^(-1)FSH+0.15IU·m L^(-1)LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH)。通过免疫组织化学法、Western blot技术及荧光定量PCR检测,观察并分析各组卵巢组织Cx43蛋白表达量。结果免疫组织化学及Western blot检测结果表明Cx43蛋白表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),各组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05);荧光定量PCR检测结果显示Cx43mRNA表达量从高到低依次为OG-FSH+LH组、OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),且各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式更有利于冻融卵巢组织缝隙连接蛋白Cx43蛋白的表达。
- 陈杰常青杨延周裴秀英马文智马会明马会明黑常春于佳孙苗
- 关键词:小鼠卵巢促卵泡刺激素促黄体生成素玻璃化冻存缝隙连接蛋白
- 单次热应激对小鼠睾丸雄激素受体的影响被引量:3
- 2016年
- 目的探讨单次热应激对小鼠睾丸雄激素受体(AR)的影响。方法将6周龄C57雄性小鼠24只分为对照组(6只)和热应激处理组(18只)。小鼠睾丸热应激处理组给予单次43℃水浴,干预15 min,于1 d、7 d和14 d取睾丸,用免疫组织化学染色检测雄激素受体蛋白在睾丸组织中的定位及变化,蛋白印迹(Western Blot)检测睾丸中雄激素受体蛋白的表达,并进行统计学分析。结果免疫组织化学检测显示,AR定位在细胞的细胞核,在曲细精管的基底膜处以及间质细胞中表达,在第14天表达最强;Western blot检测显示,与对照组相比,热应激后雄激素受体蛋白的表达随着时间推移不断增多,且组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠睾丸经43℃水浴单次热应激15 min后,雄激素受体蛋白表达对生精细胞恢复有保护作用。
- 田洪成马良宏马会明杨晓霞耿芝马文智裴秀英王燕蓉
- 关键词:热应激小鼠睾丸雄激素受体
- 小鼠卵巢玻璃化冻存过程中FSH干预对VEGF及VEGFR-2表达的影响被引量:7
- 2013年
- 目的通过在玻璃化冻存不同时段给予小鼠卵巢组织重组人促卵泡刺激素(rFSH)干预,观察rFSH对VEGF以及VEGFR-2表达的影响,探索卵巢玻璃化冻存过程中最佳的FSH保护途径。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU.mL-1FSH干预玻璃化冻存组,包括全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(BG-FSH)以及冻存后添加FSH组(AG-FSH)。通过形态学技术观察正常卵泡百分比;采用免疫组织化学技术观察卵巢不同细胞VEGF以及VEGFR-2的表达;通过Western-blot方法观察并分析不同玻璃化冻存时段的FSH干预对卵巢VEGF以及VEGFR-2蛋白表达量的影响。结果正常卵泡百分比、VEGF及VEGFR免疫组织化学和Western-blot检测结果组间比较差异均有统计学意义。其中,OG-FSH组各项检测指标均高于其他各组(P<0.05),且BG-FSH、AG-FSH组与FCG相似,高于VCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH干预有利于提高正常卵泡数,以及VEGF、VEGFR-2蛋白的表达。
- 陈杰张宁王燕蓉裴秀英黑常春马会明常青马文智蔡玉芳孙苗
- 关键词:小鼠卵巢FSH玻璃化冻存VEGFVEGFR-2
- 单次热应激对小鼠睾丸增殖细胞的影响被引量:2
- 2015年
- 目的明确单次热应激对小鼠睾丸增殖细胞的影响。方法 6周龄雄性C57小鼠36只,随机分为热处理组和对照组。小鼠热处理组单次43℃水浴,干预15 min,于1、7和14 d取材,HE染色观察睾丸结构形态,免疫组织化学染色检测增殖细胞定位及变化,Western Blot检测Ki67蛋白表达,并进行统计学分析。结果应激处理组生精小管排列疏松,曲细精管中细胞数量明显减少甚至消失,细胞散落在曲细精管中;免疫组化可见,增殖细胞呈现动态变化过程,单次热应激处理后1 d增殖细胞显著减少,第7、14天增殖细胞数量开始慢慢恢复;Western Blot可见KI-67表达量在热应激处理后7 d表达量显著降低,第14天表达量慢慢恢复,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠睾丸经43℃水浴单次热应激15 min后,增殖细胞的动态恢复是后期精子生成的结构基础。
- 田洪成马文智马会明蒲静杨晓霞张永芳王永峰王蒙蒙李昕马良宏裴秀英王燕蓉
- 关键词:热应激睾丸增殖细胞
- 卵泡刺激素体外短暂干预对小鼠卵泡刺激素受体表达的影响
- 卵巢移植后的缺血缺氧是影响移植物存活的主要原因,FSH作为卵泡存活因子的作用在卵巢移植领域受到关注。故本研究的目的在于为体外卵泡刺激素干预提高卵巢移植后存活率提供FSH对FSHR影响的实验室依据。取6~8周动情间期小鼠卵...
- 谢莎莎燕蓉张晓光孙苗马文智张庭元
- FSH对胎儿卵巢组织玻璃化冻存及冻融后短时培养的影响
- 2012年
- 目的通过对FSH干预下的胎儿卵巢玻璃化冷冻及解冻后短暂培养,观察FSH对卵泡储备的影响。方法将20周流产胎儿卵巢皮质切割成体积为5mm×4mm×2mm和10mm×4mm×2mm的皮质片,在玻璃化液、解冻液和培养液中添加10μg FSH.mL-1,通过两步渗透平衡法,将卵巢皮质进行玻璃化冻存。解冻后培养4.5h,通过卵泡形态学观察、不同发育期卵泡构成比和卵泡直径观察评价玻璃化冻存和解冻后的FSH干预下的培养效果。结果①不同发育阶段卵泡构成比及卵泡直径在冻融组之间及冻融组与新鲜组之间相比差异无统计学意义;②冻融组和冻融-培养组之间相比较,培养组卵泡直径增大,差别有统计学意义(P<0.05)。结论冻融过程的FSH添加不影响人胎儿卵巢大皮质片的玻璃化冻存及早期卵泡的构成比,但是体外添加FSH培养4.5h可使一定量的原始卵泡发育至早期初级卵泡阶段。
- 王艳盛陈杰黑长春王燕蓉马文智孙苗蔡玉芳王国平
- 关键词:胎儿卵巢玻璃化冻存FSH
- 槐果碱预防实验性肝硬变发生的形态学研究
- 用槐果碱治疗急性肝炎取得一定疗效,证实其有降低转氨酶,改善肝功能的作用。本实验用苦参碱对预防实验性肝硬变发生的作用进行了组织学、组织化学观察,为临床应用及探讨机理提供形态学依据。用本实验用Wistar大鼠48只,体质量1...
- 沈新生王燕蓉常青马文智黑常春蔡玉芳崔岫朱万平
- 单次热应激处理对小鼠睾丸生精细胞的影响被引量:11
- 2016年
- 目的:探讨单次热应激对小鼠睾丸生精功能可复性研究。方法:C57雄性小鼠36只,随机按1、7、14 d各分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别在43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取材。计算睾丸器官指数,HE染色观察睾丸组织结构变化,免疫组化染色检测早幼粒白血病锌指蛋白(PLZF)和联会复合体蛋白3(SCP-3)在睾丸组织中的定位及表达,Western印迹检测PLZF蛋白表达水平。结果:热应激组小鼠睾丸器官指数明显低于对照组(P<0.01)。HE染色可见,热应激组与对照组相比,热应激后第1天生精细胞排列松散,散落在生精小管中;第7天生精小管萎缩,排列疏松,生精细胞明显减少;第14天生精小管排列较为紧密,生精细胞数量增加,生精细胞层数增多。与对照组相比第1、7天热应激组SCP-3标记的精母细胞明显减少,第14天精母细胞数量开始恢复。Western印迹检测结果显示,PLZF蛋白在热应激处理后1 d表达量显著降低(0.19±0.02 vs 0.64±0.03,P<0.01),第7、14天又迅速增加(0.77±0.02、0.77±0.02),且显著高于对照组(P<0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后可致生精功能发生障碍,随着时间的推移,这种损伤具有可复性。
- 马文智田洪成马会明杨晓霞裴秀英王燕蓉马良宏
- 关键词:生精功能可复性
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中FSH干预对血管生成相关因子表达的影响被引量:2
- 2015年
- 目的在小鼠卵巢玻璃化冻融过程中给予重组人卵泡雌激素(r FSH)干预,通过观察其对卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSH-R)及与血管生成相关的Integrinαvβ3、Angpt-2、Kindlin-2蛋白表达的影响,提供FSH干预对卵巢血管生成相关因子影响的依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU·m L-1FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VG)。对3组卵巢内各级卵泡进行计数;通过免疫组化方法观察并分析各组FSH-R、Angpt-2、Kindlin-2在卵巢不同细胞中的定位;观察粘附分子Integrinαvβ3在各组卵巢细胞中表达,并进行亚基表达量的分析。结果FSH-VG组的原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡及总卵泡数均高于VCG组,但低于FCG组(P均<0.05),闭锁卵泡数VCG组高于FCG及FSH-VG组(P均<0.05);FSH-R与Angpt-2阳性表达呈现FSH-VG与VCG组均低于FCG组(P<0.05),但FSH-VG组高于VCG组(P<0.05);Kindlin-2阳性表达在FSH-VG组与FCG组之间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.01或<0.05);Integrinβ3蛋白表达量FCG与FSH-VG组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.05),Integrinαv的表达3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加FSH可以上调FSH-R及粗血管生成的相关因子Integrinβ3、Angpt-2和Kindlin-2蛋白的表达,提高正常卵泡数。
- 张红马文叶杨延周裴秀英常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军孔斌王燕蓉
- 关键词:小鼠卵巢RFSH玻璃化冻存ΑVΒ3