颜金鹏 作品数:13 被引量:51 H指数:4 供职机构: 中南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
异源四倍体鲫鲤雌核发育后代及其亲本RAPD分析 被引量:4 2007年 颜金鹏 刘少军 刘筠关键词:异源四倍体鲫鲤 雌核发育 新型和改良多倍体鱼研究 刘少军 刘筠 周工健 罗凯坤 姚占州 刘锦辉 段巍 郭新红 刘季芳 陶敏 张纯 覃钦博 龙昱 颜金鹏 王静 孙远东 该项目得到国家自然科学基金重点课题、面上课题(2项)、科技部农业科技成果转化基金等课题的资助。鱼类是脊椎动物中种类最多的动物,自然界中许多鱼的染色体数目呈现接近倍性分布。具有不同染色体数目的鱼是怎样形成的?这是值得研究的...关键词:关键词:遗传育种 生物进化 磷酸钙纳米介导自杀基因载体的构建及其应用研究(英文) 被引量:1 2009年 构建由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因PCDNA3.1(-)CVyCDglyTK表达载体和分别由CEA启动子和巨细胞病毒(CMV)增强子驱动的融合自杀基因PCDNA3.1(-)CEAyCDglyTK、PCDNA3.1(-)CMVyCDglyTK表达载体,以磷酸钙纳米为载体分别转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LOVO细胞和CEA阴性的HeLa细胞,Lovo细胞在感染以上3种质粒表达载体后均有yCDglyTK mRNA表达,且对5-FC的敏感性明显增强;HeLa细胞在纳米PCDNA3.1(-)CMVyCDglyTK复合物感染后有yCDglyTK mRNA表达,对5-FC的敏感性增强,而在另外两种复合物感染后则没有yCDglyTK mRNA表达,5-FC对其亦无杀伤作用.结果表明靶向性基因治疗载体能使融合自杀基因在CEA阳性细胞中专一性表达,达到靶向治疗肿瘤的目的. 张利元 刘霆 颜金鹏 杨魁 余术宜 颜世能 谢薇 陈玉祥关键词:癌胚抗原 自杀基因 基因治疗 杀菌/渗透性增强蛋白功能及应用前景 被引量:4 2011年 杀菌/通透性增强蛋白(BPI)是存在于中性粒细胞中的阳离子蛋白,约为55 kD.BPI能与革兰氏阴性菌外膜上的脂多糖结合,增加外膜对抗菌药的通透性,具有特异性杀灭革兰氏阴性菌及结合/中和内毒素的生物学功能,在革兰氏阴性菌感染的治疗方面有良好的发展前景.近年来,国内外对BPI研究颇多,并逐渐发现BPI还具有调理作用、抗真菌、抗原虫和抑制血管生成等许多功能,被学者称为未来的"超级抗生素".本文主要就BPI的结构、分布、生理功能、作用机理及临床研究方面的研究进展作一综述. 颜金鹏 王丽 李善妮 邓丽明 韩旭关键词:中性粒细胞 革兰氏阴性菌 内毒素 异源四倍体鲫鲤雌核发育二倍体后代的RAPD和微卫星分析 异源四倍体鲫鲤是世界上首例人工培育的两性可育的四倍体鱼,为探讨自然界鱼类多倍体的形成机制提供了非常重要的理论依据和实验材料。异源四倍体鲫鲤拥有4套染色体并能产生二倍体卵子,为了阐明异源四倍体鲫鲤的性别决定机制和二倍体卵子... 颜金鹏关键词:异源四倍体鲫鲤 雌核发育 微卫星 遗传纯度 文献传递 异源四倍体鲫鲤雌核发育后代的RAPD分析 被引量:9 2005年 在优化RAPD(随机扩增多态性DNA)检测条件基础上,从134个随机引物中筛选出53个扩增较好且多态性强的引物,对异源四倍体鲫鲤第1代(G1)、第2代(G2)人工诱导的雌核发育二倍体后代群体的DNA多态性及分子标记进行了分析。结果显示,53个随机引物在G1群体和G2群体中检测到的位点数分别为541、511,其中多态性位点数分别为70、52,多态位点比例分别为12.94%、10.18%。两个群体的平均遗传距离分别为0.0732、0.0464。研究表明,经过连续2代人工雌核发育,G2的遗传多样性明显减少,种质进一步纯化。还从53个随机引物的扩增谱带中找到了2个引物(S50、S223)的特异扩增谱带,可以作为第1、2代雌核发育群体间的分子遗传标记。由计算机软件程序构建的分支系统树清晰地反映了两个雌核发育群体及其个体间的相互关系。 颜金鹏 刘少军 孙远东 张纯 刘筠关键词:异源四倍体鲫鲤 雌核发育 随机扩增多态DNA RAPD 异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和它们父母本线粒体DNA12SrRNA基因遗传变异的分析 被引量:17 2004年 采用质粒克隆测序方法 ,获得了异源四倍体鲫鲤 5个个体、异源四倍体鲫鲤雌核发育二倍体后代 2个个体、三倍体湘云鲫 2个个体及红鲫、湘江野鲤和日本白鲫各 1个个体的线粒体DNA 12SrRNA基因的全序列。经对比发现 ,异源四倍体 5个个体共享 2种单元型 ,异源四倍体鲫鲤雌核发育二倍体后代 2个个体、三倍体湘云鲫 2个个体以及红鲫、湘江野鲤和日本白鲫各 1个个体分别共享 1种单元型。用MEGA 1 0软件分析了它们的碱基组成和核苷酸序列差异 ,用邻接法构建系统进化树。它们间的序列同源性在 95 %~ 99%之间 ,异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和它们母本 (分别为红鲫和日本白鲫 )之间的序列同源性大于异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和它们父本(分别为湘江野鲤和异源四倍体鲫鲤 )之间的序列同源性 ,结果表明 :异源四倍体鲫鲤和三倍体湘云鲫在线粒体DNA 12SrRNA基因上具有母性遗传特征。另一值得注意的地方是异源四倍体鲫鲤经过 9代 (F3 F11)繁殖后 ,在 5个个体中发现了 2种单元型 ,说明在四倍体基因库中存在遗传多样性 ,为四倍体基因库的繁殖。 郭新红 刘少军 颜金鹏 刘筠关键词:RRNA基因 DNA序列 异源四倍体鲫鲤 三倍体湘云鲫 异源四倍体鲫鲤Sox9a基因保守区序列的克隆及内含子剪接位点分析 被引量:13 2004年 用特异于HMG box保守区的兼并引物扩增了异源四倍体鲫鲤及其原始亲本 (红鲫和鲤鱼 )的Sox基因 .异源四倍体鲫鲤的扩增产物共有 4条带 ,大小分别约为 2 0 0 ,6 0 0 ,90 0和1 90 0bp,而其原始亲本的扩增产物只有 3条带 ,且在雌雄个体中未发现性别特异扩增带 .回收雄性四倍体鱼 6 0 0bp扩增带 ,经亚克隆及测序分析得到一个新的编码 71个氨基酸残基的基因 .该基因与虹鳟鱼 (Oncorhynchusmykiss)、蟾蜍 (Xenopuslaevis)、鲤鱼 (Cyprinuscarpio)等的Sox9基因相似性达 97% ,据此命名为Atsox9a .通过计算机分析和RT PCR方法确定该基因含有内含子 ,并获得其内含子的序列和剪切位点 ,此内含子剪切位点在进化上是保守的 . 刘季芳 刘少军 张纯 孙远东 颜金鹏 刘筠关键词:异源四倍体鲫鲤 克隆 内含子 性别决定 缺血预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究 被引量:4 2017年 通过建立C57/B6雄性小鼠心肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)模型,探讨缺血预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。首先,将36只6~8周C57/B6雄性小鼠随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)及缺血预处理组(Ipost组)。然后,利用苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色、脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(Td T-mediated d UTP-biotin nick end labeling,TUNEL)染色、免疫组化及蛋白质印迹方法,对比3组小鼠的心肌病理学改变、心肌细胞凋亡情况、梗死心肌边缘区微血管密度(microvessel density,MVD)的变化,以及肿瘤相关蛋白质PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,即人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因的编码产物)、自噬相关蛋白质LC3I/II和腺苷酸活化蛋白激酶(5-AMP activated protein kinase,AMPK)的表达水平。结果显示,I/R组心肌组织细胞水肿、炎症细胞浸润等组织病理学变化情况较Sham组明显,而Ipost组中的情况相比I/R组有明显改善;同时,Ipost组心肌凋亡率高于Sham组,但显著低于I/R组(P<0.01);Ipost组梗死心肌边缘区域的微血管密度显著高于I/R组(P<0.01)。此外,缺血预处理后,PTEN的表达水平降低,AMPK磷酸化水平以及LC3I/II蛋白的表达水平均增强。由此可见,缺血预处理可减轻I/R损伤,减少心肌梗死面积,减轻心肌水肿,对心肌细胞有明显的保护作用,其机制可能与梗死心肌中PTEN表达下调、AMPK磷酸化水平增强、心肌细胞自噬增强和凋亡减少有关。 李佳妮 李嘉欣 颜金鹏 叶艳琼 罗玲 杨斌 詹纪春 苏其利 庄建 陈寄梅 朱平 赵明一关键词:缺血再灌注损伤 缺血预处理 PTEN 凋亡 自噬 小鼠 利用ATPase基因研究杂交多倍体鲫鲂线粒体母性遗传 被引量:2 2008年 三倍体鲫鲂、四倍体鲫鲂和五倍体鲫鲂是通过红鲫♀×团头鲂♂亚科间远缘杂交形成的.采用PCR产物直接测序法,测定了5尾三倍体鲫鲂、6尾四倍体鲫鲂和6尾五倍体鲫鲂及其1尾父本团头鲂的线粒体DNA ATPase8和ATPase6基因的全序列,并与所获得的红鲫和外群斑马鱼的同源序列进行比较,同时分析了其碱基组成、变异情况以及核苷酸和氨基酸序列差异.红鲫、团头鲂、三倍体鲫鲂、四倍体鲫鲂和五倍体鲫鲂之间的序列分歧率为0.0%-21.6%,它们与外群斑马鱼之间的序列分歧率为27.0%-28.2%.用MEGA3.1软件中的Maxi mumparsi mony(MP),Mini mumevolution(ME),Neighbor joining(NJ)和UPGMA程序构建的分子系统树具有相似的拓扑结构.结果表明,人工杂交三倍体鲫鲂、四倍体鲫鲂和五倍体鲫鲂在线粒体ATPase8和ATPase6基因上具有严格的母性遗传特征.研究证明ATPase8和ATPase6基因是杂交多倍体鲫鲂遗传变异研究的一个很好的分子标记. 颜金鹏 郭新红 刘少军 肖俊 刘筠关键词:母性遗传