颜世举
- 作品数：24 被引量：48H指数：4
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响
- 2014年
- 目的:通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为探索microRNA-194作为骨肉瘤生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法:构建沉默及过表达microRNA-194的慢病毒载体;获得稳定感染的细胞株,改变细胞增殖相关生物学特性。结果:PCR及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确,过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108TU/ml及4×108TU/ml;microRNA-194沉默的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞增殖速度相较于其对照组明显上升;过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞增殖速度显著下降(P<0.01)。MicroRNA-194沉默的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞凋亡率相较于其对照组明显下降,过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。与对照组比较,过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞周期G0/G1细胞比例显著增加,G2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。结论:成功构建了microRNA-194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体;miR-194的表达水平对SOSP一9607细胞的增殖和凋亡造成显著影响。MicroRNA-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点,但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。
- 韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫肖春孙聪杨静杨彤涛周勇马保安
- 关键词：慢病毒骨肉瘤
- 人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响
- 目的 通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染入骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡...
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- 敲低趋化因子受体7(CCR7)抑制MG63骨肉瘤细胞的增殖和侵袭并诱导其凋亡被引量：1
- 2016年
- 目的研究小干扰RNA(siRNA)靶向抑制趋化因子受体7(CCR7)表达对MG63人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法设计并合成靶向抑制CCR7表达的siRNA,转入MG63细胞后,采用Western blot法检测CCR7蛋白水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖,TranswellTM侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 MG63细胞转染CCR7-siRNA后,细胞CCR7表达明显下调;同时细胞增殖明显减弱,侵袭和迁移能力明显下降,且细胞凋亡率升高。结论下调MG63骨肉瘤细胞的CCR7,可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移,并能诱导细胞凋亡。
- 章日春张弘韬鄂震马琼颜世举张恩尉马保安
- 关键词：骨肉瘤细胞细胞侵袭
- 人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响
- 目的 通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡...
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- 关键词：慢病毒骨肉瘤
- 周期性静水压对人软骨细胞IL-1β和MMP-3代谢的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:以正常成人软骨细胞及OA软骨细胞为研究对象,探讨在静水压作用下正常软骨细胞IL-1β和MMP-3代谢的变化,以及与OA软骨细胞之间的差异。同时观察在力学信号刺激下软骨细胞的IL-1β和MMP-3代谢有无相关性。方法:将体外培养的正常成人膝关节软骨第3代软骨细胞随机分为加压组和对照组。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。将加压组细胞放入高压恒温静水压加压系统,冲入含有95%的空气和5%的CO2混合气体,以10MPa进行加压2h,共加压5d。分别于加压前、加压第3天、加压第5天后取加压组、对照组和OA组细胞培养液检测IL-1β、MMP-3含量。同时采用MTT法分析3组细胞的增殖情况。对三组细胞中IL-1β与MMP-3的水平做双变量相关分析,采用方差分析对三组标本间的IL-1β、MMP-3含量进行比较。结果:各组细胞IL-1β与MMP-3两者间存在正相关关系。OA组细胞中IL-1β与MMP-3含量高于加压组和对照组,加压组高于对照组。加压组、OA组软骨细胞的生长曲线与对照组相比增殖高峰降低,平台时间缩短。结论:10MPa间歇性静水压加压可抑制软骨细胞增殖,增加IL-1β与MMP-3分泌。
- 肖春颜世举靳雷王鑫裘秀春范清宇马保安
- 关键词：IL-1ΒMMP-3
- 人工腰椎间盘置换研究应用进展被引量：1
- 2014年
- 椎间盘病变是脊柱外科的常见疾病,是成年人疼痛和致残的常见原因,常常给人带来沉重的肉体和经济负担。经过长时间的发展与脊柱外科手术的进步,常规手术治疗在临床上虽然取得了一定的疗效,但是没有保留脊柱的生理运动功能,对临近阶段的椎间盘的退变起到促进作用,并且腰椎运动节段的融合加快了邻近节段椎间盘和小关节的退变。腰椎独特的解剖学特点和生物力学的研究及不同材质和特点的人工椎间盘材料的发展使人工椎间盘手术成为可能。与常规手术方式相比,人工椎间盘假体设计与人生理的解剖结构更加吻合。术后可以保持瞬时和长期的稳定性,从而对邻近的椎间盘的退变起到抑制作用。取得了较好的疗效。人工椎间盘置换术作为治疗腰椎间盘除腰椎融合之外的另一合理选择,目的是使退变导致的疼痛可以稳定长期缓解,并重建椎间隙高度以保护神经,从而避免晚期关节突关节及邻近节段的病变,恢复脊柱的运动学和载荷特性。目前人工腰椎间盘有了长远的发展,适应症不断扩大,但仍有较多限制。期待在将来能够找出更加符合人体生物力学特点的材料和设计,使之成为一种更为有效的治疗腰椎疾病的治疗方式。现就人工椎间盘的类型、疗效、适应证、禁忌证以及术后并发症等方面予以综述。
- 韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫肖春沙浩董川杨彤涛周勇马保安
- 关键词：人工椎间盘疗效并发症
- YAP在骨肉瘤细胞中的表达及定位被引量：1
- 2016年
- 目的:研究YAP在骨肉瘤细胞中的表达情况和定位。方法:使用SOSP9607、MG63、U2-OS骨肉瘤细胞系和h FOB1.19成骨细胞系,进行qRT-PCR、Western blot实验和荧光共聚焦显微镜观察YAP的表达情况和所在的具体细胞位置。结果:YAP在骨肉瘤细胞中表达量非常高,高于正常的成骨细胞h FOB1.19。YAP在骨肉瘤细胞系中主要表达于细胞核内,而在成骨细胞系中主要表达于细胞质。结论:YAP在骨肉瘤细胞中高表达,在成骨细胞中低表达。在肿瘤细胞中主要位于细胞核内,而在成骨细胞系中主要表达于胞质内。可以推断YAP进入细胞核内,结合下游靶基因,促进肿瘤细胞的生长,参与骨肉瘤细胞的发生。这一发现可以为治疗骨肉瘤提供新的靶点。
- 贾楠张迎龙刘涛陈洁颜世举马琼范清宇
- 关键词：骨肉瘤HIPPO
- microRNA-15a模拟物对人关节软骨细胞增殖与凋亡的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:近年来研究表明,关节软骨细胞凋亡在骨关节炎发病过程中起到了重要的作用,本文旨在探讨microrna-15a模拟物对于原代人膝关节软骨细胞增殖与凋亡的影响。方法:取人外伤性截肢后的膝关节软骨,采用双酶消化法分离获得人膝关节软骨细胞,并进行体外培养,通过甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行软骨细胞鉴定。将培养的软骨细胞传代后取第1代细胞,分为实验组和对照组,实验组采用mir-15a模拟物(has-mir-15a mimics)转染软骨细胞,上调软骨细胞内mir-15a的表达量;对照组分为阴性对照组、空白对照组。采用MTT法测定细胞增殖曲线,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:原代细胞中细胞呈多角形、圆形与梭型,贴壁生长;甲苯胺蓝染色胞质呈深蓝色,Ⅱ型胶原染色胞质呈黄褐色,为特异性染色。经统计学分析,实验组与对照组相比增殖速率明显下降(P<0.05)。实验组凋亡率(7.13%±0.57)与阴性对照组凋亡率(2.66%±0.15)相比明显增高(P<0.05)。结论:采用双酶消化法成功分离并培养具有生物学特性的原代人膝关节软骨细胞,通过转染mir-15a模拟物外源性增加关节软骨细胞内mir-15a表达量可显著促进其凋亡并抑制其增殖,为阐明骨关节炎发病机制提供了新的理论依据,为临床治疗提供了新的靶点。
- 颜世举靳雷肖春王鑫孙聪张开亮裘秀春马保安范清宇
- 关键词：软骨细胞骨关节炎细胞增殖
- siRNA干扰FoxM1基因表达对人骨肉瘤MG63细胞增殖与凋亡影响研究被引量：11
- 2014年
- 目的通过抑制骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因表达,观察对骨肉瘤细胞系增殖与凋亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中FoxM1基因的表达。将骨肉瘤细胞株MG63分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转染FoxM1特异性siRNA(FoxM1-siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做处理。实时-聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法检测转染前后FoxM1基因在mRNA及蛋白表达水平的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中存在FoxM1基因的表达。实验组MG63细胞转染siRNA后,FoxM1的mRNA表达为0.39±0.09,低于阴性对照组的0.91±0.07,t=7.92,P<0.001;也低于空白对照组的0.96±0.08,t=8.68,P<0.001。实验组FoxM1蛋白表达为0.31±0.06,显著低于阴性对照组的0.81±0.10,t=7.20,P<0.001;也低于空白对照组的0.89±0.09,t=8.35,P<0.001。实验组MG63细胞增殖率为0.36±0.03,显著低于阴性对照组的0.61±0.02,t=12.86,P<0.001;也低于空白对照组的0.65±0.02,t=14.92,P<0.001。实验组MG63细胞凋亡率为(13.69±1.15)%,显著高于阴性对照组的(2.38±0.90)%,t=14.16,P<0.001;也高于空白对照组的(2.87±0.86)%,t=13.54,P<0.001。结论人骨肉瘤细胞株中存在FoxM1蛋白的表达;特异性siRNA可下调骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因的表达,对细胞的增殖具有负性调控作用,并能诱导细胞凋亡。
- 颜世举肖春靳雷王鑫韩康马保安范清宇
- 关键词：骨肉瘤FOXM1RNA干扰
- IL-8在循环肿瘤细胞自我种植促进人骨肉瘤进展中的作用机制被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨IL-8在循环肿瘤细胞自我种植促进人骨肉瘤进展中的作用。方法:免疫组织化学SP法检测30例临床骨肉瘤及10例骨软骨瘤病例肿瘤组织中IL-8表达;建立骨肉瘤原位荷瘤裸鼠模型后,实验组尾静脉注射红色荧光蛋白标记的肿瘤细胞(RFP-F5M2),对照组注射PBS,分别于第2、4、8周后将处理组原位瘤体冰冻切片置于荧光显微镜下观察自我种植细胞荧光强度;对原位肿瘤进行组织块法原代培养,细胞免疫荧光半定量检测IL-8表达水平。结果:93.3%骨肉瘤组织中IL-8表达阳性,骨软骨瘤中IL-8表达均为阴性。冰冻切片显示,随着时间增加,循环肿瘤细胞自我种植现象明显增加,实验组中第2、4、8周原位灶原代培养细胞免疫荧光显示IL-8表达量逐渐增加,并较对照组具有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-8在循环肿瘤细胞自我种植促进人骨肉瘤细胞增殖及转移中发挥着重要作用,可为骨肉瘤患者早期诊断和治疗提供一个新的策略。
- 刘涛马琼张迎龙刘永明姜扩颜世举贾楠文艳华范清宇裘秀春
- 关键词：循环肿瘤细胞IL-8骨肉瘤
