顾颖
- 作品数：61 被引量：194H指数：8
- 供职机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 细菌糖基化基本元件及其应用研究进展
- 2021年
- 近年来,细菌糖基化修饰系统的研究受到了越来越广泛的关注。已有文献报道了诸多细菌糖基化修饰系统,包括最具有代表性的空肠弯曲杆菌的N-糖基化修饰系统以及脑膜炎奈瑟菌的O-糖基修饰系统。本文在已有的研究基础上进行了系统的归纳总结,讨论对细菌蛋白质糖基化系统的理解,同时综述了细菌蛋白质糖基化应用方面的相关进展。
- 李佳家周立志顾颖夏宁邵李少伟
- 关键词：糖基化原核表达系统糖基转移酶重组疫苗
- 可捕获HBV的preS1单克隆抗体的制备及性质初探被引量：4
- 2008年
- 用天然乙型肝炎病毒（HBV）颗粒（Dane颗粒和管状颗粒）和HBV前S1（preS1）区基因工程重组蛋白GST-preS1联合免疫Balb/c小鼠，经杂交瘤技术制备了7株单克隆抗体（mAb），采用ELISA、免疫捕获PCR等方式鉴定其有关特性.各株mAb分别为IgG1和IgG2a，轻链均为κ型.腹水mAb的滴度为1×10^7-1×10^9.用间接法ELISA显示，所有7株preS1 mAb均可以识别HBV天然抗原，其中mAb 4D11与HBV天然抗原的结合能力最强.通过竞争抑制法ELISA检测推断preS1（21-47）上至少含有两个B细胞表位，mAb 4D11、1G5、7B6和7H11具有共同的B细胞抗原识别位点；mAb 3H5、6F1和2A6识别另外一个位点.本研究获得的可与HBV天然抗原结合的preS1单抗为HBV preS1检测试剂的研制提供了重要工具，对HBV preS1具有中和免疫活性抗原的设计及相关研究有重要帮助.
- 顾颖朱子恒李少伟张军夏宁邵
- 关键词：单克隆抗体HBVPRES1
- 疫苗技术的研究进展被引量：1
- 2022年
- 疫苗是预防和控制传染病最经济、有效的手段,疫苗接种是通过诱导机体产生保护性免疫应答来预防和控制人类和动物疾病的常规方法。面对当今重大、复杂、突发、高变病原体,传统疫苗学方法难以满足需求,新型疫苗技术是应对未来全球健康挑战的有利武器。未来疫苗技术要着眼于更合理、更精准和更高效,保证安全性的同时,最大程度提高疫苗效力。此文梳理了目前疫苗技术的研究进展,并指出了未来的发展趋势,有利于提升对未知病原体的探索和主动防御的共识,促进创新性疫苗技术体系的发展。
- 张思博李婷婷薛文辉顾颖夏宁邵李少伟
- 关键词：新型疫苗病原体佐剂
- HIV-1 CAP2NC蛋白的表达及体外自组装
- 2018年
- 构建并表达HIV-1 CAP2NC蛋白,探索其体外自组装条件。通过PCR技术扩增HIV-1(NL4-3毒株)CAP2NC基因片段,并将其连接到原核表达载体pTO-T7,获得重组质粒pTO-T7-CAP2NC,然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经疏水层析纯化后获得重组蛋白CAP2NC。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CAP2NC可在大肠杆菌可溶高效表达,经纯化后纯度约为95%。ELISA检测表明重组蛋白CAP2NC可被HIV-1衣壳蛋白特异性单克隆抗体识别,具有较好反应活性。重组蛋白透析后在非原性SDS-PAGE中呈现为多种聚体形式。分子筛排阻层析分析CAP2NC蛋白透析后可进行组装,负染电镜进一步观察显示CAP2NC蛋白在RNA存在条件下,可形成空心管状颗粒,其形态结构与HIV-1病毒衣壳体外自组装形成的类似。上述结果表明HIV-1 CAP2NC蛋白具有体外自组装的性质,为进一步在体外研究非成熟病毒样颗粒结构奠定基础。
- 白诗梦张芝晴乔佳明沈鸿霖黄芳高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖
- 关键词：HIV-1自组装
- 悬浮驯化HEK-293FT细胞表达人乳头瘤病毒16型假病毒及其冷冻电镜结构解析被引量：3
- 2016年
- 为了大量获得人乳头瘤病毒（HPV）16型的假病毒颗粒（PsV）,将贴壁生长的293FT细胞驯化成为悬浮细胞系进行大规模的悬浮培养,同时优化假病毒纯化方法,并使用冷冻电镜解析其三维空间结构。本研究通过逐步降低培养基中血清浓度和加入抗聚团剂等方法,获得了可在Wave生物反应器中大规模悬浮培养的293FT细胞,经过携有HPV16L1、L2基因和GFP报告基因的质粒转染,实现了大规模制备HPV16假病毒;利用CsCl等密度和蔗糖密度梯度超速离心的方法,获得高纯度的HPV16假病毒颗粒,滴度为8.2×10^5 TCID50/μL;蛋白印迹结果显示HPV16假病毒中含有L1和L2蛋白,定量ELISA测得L1蛋白的含量为156.0μg/mL;最后使用Tecnai G2F30冷冻电镜和Falcon电子直接探测相机采集冷冻HPV16假病毒的图像,应用AUTO3DEM软件解析其结构,结构分辨率为14A,呈现为T=7的等二十面体对称结构,直径为600A。本研究为HPV疫苗临床血清中和检测、高分辨率HPV16假病毒的结构解析及L1和L2相互作用研究奠定了良好基础。
- 王大宁刘亚静郑清炳李智海范飞柳欣林宋硕顾颖夏宁邵李少伟
- 关键词：人乳头瘤病毒假病毒
- 疫苗免疫原的研究进展和趋势被引量：2
- 2020年
- 疫苗是预防和控制传染病最为经济有效的手段,也是肿瘤、代谢性疾病、老年认知性疾病等慢性病具有潜力的防治手段。免疫原作为疫苗最为关键的要素,决定了疫苗效应的特异性和靶向性。以新型冠状病毒全球大流行为代表的重大、多发、高发、新发传染病的持续出现,给疫苗研发带来了巨大的挑战。免疫原选择和设计的理论依据不足是创新疫苗研究的共性关键科学问题。本文梳理了国内外近年来在疫苗免疫原研究方面的进展,指出在新一代疫苗革命背景下免疫原研究趋势和研究前沿。结合当前复杂免疫原的研究难点,提出了未来工作的建议,如:利用现代疫苗学相关的交叉前沿和创新,重点开展新型疫苗靶标发现、免疫原性精准设计理论、新型免疫增强或调控技术、仿人免疫评价体系和人体疫苗免疫应答机制等领域的工作。
- 李婷婷柳欣林张芝晴何茂洲张天英顾颖李少伟夏宁邵
- 关键词：疫苗免疫原性
- HIV-1 Env免疫原设计的研究进展被引量：1
- 2022年
- Env膜蛋白作为HIV-1病毒颗粒表面的主要抗原物质,是广谱中和抗体识别的靶点。但因Env高突变,高糖基化等因素,至今仍无有效的艾滋病疫苗问世。围绕Env的疫苗研究已经开展了近三十年之久,在表达系统、免疫原、免疫方式以及免疫应答类型等方面都不断有了新的突破。基于HIV-1 Env设计的免疫原在动物模型中逐渐展现出前景,为HIV疫苗的研究带来了曙光。本文主要围绕Env免疫原设计策略进展进行阐述,为后续的HIV-1 Env免疫原设计提供指导和思路。
- 陈格格邓婷婷李少伟顾颖
- 单克隆抗体人源化研究进展被引量：6
- 2002年
- 目前单克隆抗体大多数是鼠源的 ,在临床重复给药的治疗过程中有许多副作用。由于技术限制 ,最好的解决方法就是研制人源化抗体 ,以代替鼠源单抗用于临床。
- 顾颖
- 关键词：嵌合抗体
- HIV-1 Env三聚体抗原改造研究进展
- 2020年
- HIV-1疫苗研发是当前艾滋病研究的一大热点,其病毒表面包膜糖蛋白Env三聚体介导病毒与细胞融合,是HIV-1疫苗研究的重要靶点。因此,设计并在体外表达类天然Env三聚体对HIV-1疫苗的研发具有重要的意义。近年来,Env三聚体研究取得了显著的进展。SOSIP、NFL2P、UFO等抗原改造方法实现了类天然Env三聚体的体外表达,逐步解决了改造抗原产量低、结构不稳定等问题,且表达的Env三聚体抗原能在动物免疫中诱导机体产生较高的中和抗体水平。Env三聚体改造方法促进了HIV-1疫苗的研究。文中综述了SOSIP、NFL2P、UFO三种HIV-1 Env三聚体抗原改造方法,对比各个改造方法优缺点,并结合自身工作提出相关建议,为后续HIV-1抗原的相关设计提供指导。
- 沈鸿霖张芝晴李少伟顾颖
- 关键词：人类免疫缺陷病毒I型中和抗体
- HIV-1近膜端表位及其免疫原设计的研究进展被引量：1
- 2018年
- HIV疫苗所研究的免疫原设计主要针对HIV包膜蛋白进行,其gp41近膜端(Membrane-proximal external region,MPER)被证实是高度保守的线性表位。已报道的广谱中和抗体2F5、4E10及10E8靶向于该表位,但由于MPER自身免疫原性较差,为提高其免疫原性、更好激起机体体液免疫反应等考虑,进行MPER免疫原的设计以获得类似广谱中和抗体成为HIV-1研究的热点之一。本文对近年来MPER表位的研究及其免疫原的设计进行系统的综述,为后续在艾滋疫苗免疫原的设计上提供思路。
- 黄芳李少伟顾颖
- 关键词：HIV-1中和抗体
