陈霖霏
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：汕头大学医学院炎症与免疫性疾病研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肥大细胞羧基肽酶的单抗2A9识别表位的预测和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的：分析人肥大细胞羧基肽酶（hMC-CP）的单克隆抗体（mAb）2A9识别表位所在区域．方法：根据肥大细胞hMC-CP的二级结构、亲水性、表面可能性和抗原性指数，对hMC-CP的B细胞表位进行预测．依据预测结果，采用缺失突变的方法，分别扩增编码hMC-CPN端第1～111（P1P2），97～202（P3P4）和1～202（P1P4）位氨基酸的cDNA，并构建重组原核表达载体pET-44／P1P2、pET-44／P3P4和pET-44／P1P4．用IPTG诱导表达融合蛋白，并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析．结果：B细胞表位预测结果显示，hMC-CP的N端第1～202位氨基酸含有多个潜在的B细胞表位．PCR扩增出的3个目的片段，其DNA序列同NCBI公布的序列完全一致．Western blot结果显示：E．coli BI21（DE3）表达的融合蛋白P3P4和P1P4均与mAb2A9反应；而融合蛋白P1P2与mAb 2A9不发生反应、结论：用多参数综合测评的方法，可获得满意的hMC-CPB细胞表位预测结果，本研究中mAb 2A9识别的表位位于hMC-CP的112-202位氨基酸区域．
- 周艳春侯一峰陈霖霏郑晓璇何韶衡
- 关键词：基因表达
- 抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的制备抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(hSL-PI)单克隆抗体(mAb)。方法以hSLPI为免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hSLPI mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞术、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得4株可稳定分泌抗hSLPI mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb均为IgM。Western blot分析表明,此株mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为12000。免疫组化染色表明,mAb与肺和结肠组织的上皮细胞、疑似肥大细胞、扁桃体和包皮组织的疑似肥大细胞的反应性均呈阳性。流式细胞术分析显示,4株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞中的SLPI均呈阳性反应。激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物主要位于A549细胞的胞质内。结论成功地制备抗hSLPI mAb,为变态反应性疾病和炎症性疾病的研究工作提供了有用的试剂。
- 陈玉珍何韶衡周艳春黄阗刘岳宁陈霖霏
- 关键词：单克隆抗体
- 蛋白酶活化受体-1单克隆抗体的制备与鉴定
- 2007年
- 目的制备蛋白酶活化受体-1(PAR-1)单克隆抗体(mAb)。方法以PAR-1特异性片段为免疫原(13肽)免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR-1 mAb。采用捕获酶联免疫吸附试验(capture ELISA)鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Dot blot、免疫组化染色法、流式细胞仪分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得2株可稳定分泌抗PAR-1 mAb的杂交瘤细胞,其亚型分别为IgMI、gG2b。免疫组化染色表明,mAb与人扁桃体、结肠组织中的淋巴细胞、包皮组织中的成纤维细胞、肺组织中的巨噬细胞反应呈阳性。流式细胞仪分析显示,2株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞胞浆内及细胞膜上的PAR-1均呈阳性反应。激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物在A549细胞胞浆内及细胞膜上均可见。结论成功地制备出抗PAR-1 mAb,为进一步研究炎症性疾病提供有用的试剂。
- 马文静何韶衡周艳春陈玉珍黄阗方泽漫陈霖霏
- 关键词：蛋白酶活化受体-1单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的制备抗人白介素-28A(hIL-28A)单克隆抗体(mAb)。方法以hIL-28A融合蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hIL-28A mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得2株稳定分泌抗hIL-28A mAb的杂交瘤细胞,但2株mAb均与hIL-29有弱交叉反应。2株mAb的类别均为IgM。Western blot分析表明,此mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为19 000。免疫组化染色表明,mAb与包皮和肺组织中的上皮细胞、结肠组织中的疑似巨噬细胞呈阳性反应。流式细胞仪分析显示,2株mAb与人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞的反应均呈阳性。激光共聚焦扫描显微镜观察到荧光标记的阳性反应物主要位于HUVEC细胞胞浆内。结论成功地制备抗hIL-28A mAb,为病毒感染性疾病、肿瘤和其他疾病的研究提供新的手段。
- 陈玉珍何韶衡周艳春黄阗李明才刘岳宁陈霖霏傅意玲方泽漫
- 关键词：单克隆抗体
