辛晓婷 作品数:12 被引量:25 H指数:4 供职机构: 兰州大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 甘肃省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
含有金纳米粒子的筛分介质对不同长度DNA片段的毛细管电泳分离 被引量:1 2009年 探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响。对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测。结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短。方法较适于分离较宽范围的DNA片段。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:毛细管电泳 金纳米粒子 DNA片段 肺癌组织蛋白质混合物检测方法学研究 被引量:4 2010年 采用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光法(NGS-CE-LIF)检测蛋白质,考察了分离条件对分离的影响,并对提取的肺癌组织蛋白质混合物进行分析,与毛细管电泳紫外检测(CE-UV)及常规蛋白质检测手段聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行比较。异硫氰酸酯(FITC)衍生蛋白质,筛分介质为0.05%(w/V)聚环氧乙烷(PEO,Mr=300000),以TBE缓冲液(pH10.0)为电极缓冲液,分离电压为15kV,柱温15℃,氩离子激光器(λex=488nm,λem=520nm)检测。在此条件下可对6.5~200kDa范围的蛋白质进行分离,分离效果较好,15min内完成分离,理论塔板数(N)均值为9.12×104/m,检出限为0.28mg/L。结果表明,本方法具有筛分介质浓度调节简便,分离效果好,时间短等优点,具有一定的实际应用价值;对提取肺癌组织蛋白质混合物进行检测,检测效率和效果优于CE-UV及PAGE。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华 马骏关键词:肺癌 聚环氧乙烷 异硫氰酸酯 激光诱导荧光检测 蛋白质 毛细管电泳和聚丙烯酰胺电泳法检测肺癌组织p53基因突变效果分析 被引量:1 2008年 目的筛选检测肺癌组织p53基因突变的优良方法,为临床早期诊断肺癌提供依据。方法分别运用毛细管电泳(CE)与聚丙烯酰胺电泳(PAGE)—限制性片段长度多态性(RFLP)两种方法对38例肺癌及癌旁正常组织p53基因第249位密码子点突变进行检测。结果RFLP-CE可检测到p53基因第249位密码子的野生型26 bp片段,用时<20 m in;RFLP-CE和RFLP-PAGE均能检测到基因突变,对29例非小细胞肺癌组织p53基因第249位密码子检测的突变率分别为31.03%(9/29)、20.69%(6/29),P<0.05。结论RFLP-CE可为大规模进行肺癌的早期诊断提供简便可靠的方法。 辛晓婷 王荣 高岚 贾正平 刘圆圆 刘勇关键词:毛细管电泳 限制性片段长度多态性 P53基因 点突变 影响毛细管电泳分离生物大分子的因素 被引量:2 2009年 目前毛细管电泳在分离方面的应用越来越广泛,但重复性一直是制约其应用的主要问题。随着毛细管电泳技术的发展,影响毛细管电泳结果的因素也发生着变化。本文对影响毛细管电泳分离生物大分子的因素进行综述,希望对使用毛细管电泳的使用者者有所帮助。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:毛细管电泳 影响因素 毛细管电泳法检测肺癌p53基因第七外显子的突变 被引量:2 2009年 p53基因点突变在肺癌的发生过程中起重要作用,检测基因点突变的方法学研究将有助于临床准确诊断肺癌。本实验用PCR扩增包含249位密码子的肺癌及癌旁正常组织p53基因第七外显子,扩增样品分别经96℃变性和HaeⅢ酶切处理,以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP和PAGE-RFLP对其突变情况进行检测,并从上样量、时间、检出限和检出率4个方面进行比较。PAGE凝胶浓度为15%;CE筛分介质PEO浓度3.0%,pH8.2,电压15kV,温度15℃,λex=488nm,λem=520nm荧光检测。检出率由高到低分别为:CE-SS-CP>PAGE-SSCP>CE-RFLP>PAGE-RFLP。CE-SSCP可作为大规模肺癌早期诊断的简便可靠的方法。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:基因突变 毛细管电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 单链构象多态性 限制性片段长度多态性 高效毛细管电泳用于以聚环氧乙烷为筛分介质分离DNA的机理研究 被引量:4 2010年 用毛细管电泳以聚环氧乙烷(PEO)为筛分介质对pUC19DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)Marker中的12条DNA片段进行了分离,并尝试用Ogston模型、爬行模型以及线性模型对分离机理进行研究,最终发现26~147bp的小片段,在低电场强度时能很好地符合Ogston模型理论,而190~501bp中等长度的DNA片段电泳迁移率与其尺寸间存在很好的负相关的线性关系,为此,提出一种新的线性模型来进行解释.此外,还探讨了PEO的浓度和电场强度对分离的影响.其结论可更好地从理论上指导对中小片段DNA的分离,对肿瘤基因突变点的分析和PCR扩增产物的分离分析具有重要的意义. 王荣 贾正平 董亚蕾 陈兴国 谢华 马骏 辛晓婷 李文斌 王娟 张强 张军莉关键词:高效毛细管电泳 无胶筛分 DNA分子 聚环氧乙烷 毛细管电泳检测基因突变方法学及其在肺癌中的应用研究 肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,它的发生和基因突变密切相关,所以建立分析基因突变的快速灵敏的检测方法至关重要,目前用于检测基因突变的方法多种多样。
限制性片段长度多态性(RFLP)常与PCR技术结合用于基因突变的检... 辛晓婷关键词:毛细管电泳 肺癌 基因突变 P53基因 RAS基因 文献传递 毛细管电色谱法在生物大分子中的应用 2008年 辛晓婷 王荣关键词:毛细管电色谱柱 生物大分子 毛细管电泳-限制性:片段长度多态性分析检测胃癌H-ras基因点突变 被引量:9 2009年 建立一种毛细管电泳快速高效检测限制性内切酶酶切产物的方法,使其更好地用于基因诊断.以甲基纤维素(Methyl cellulose,MC)为筛分介质,用pUC19 DNA/MspI(HpaⅡ)Marker标准DNA片段为实验对象,通过考察筛分介质的浓度、pH值、毛细管的温度和运行电压优化出分离小于600bp的双链DNA片段的最适条件,并将此方法应用于临床59例胃癌患者肿瘤组织H-ras基因12位密码子点突变情况的检测.MC是一种良好的筛分介质,运用其进行毛细管电泳对于遗传性疾病的诊断将更加快速、准确、简便、灵敏。 刘圆圆 王荣 贾正平 郭志强 辛晓婷 谢华 马骏 王娟 李文斌关键词:毛细管电泳 甲基纤维素 限制性片段长度多态性 H-RAS 基因突变 毛细管电泳方法快速检测肺癌组织p53基因第249位密码子点突变研究 建立准确检测肺癌组织中 p53基因点突变的方法.比较毛细管电泳(CE) 与聚丙烯酰胺电泳(PAGE)两种方法对肺癌及癌旁正常组织 p53基因第249位密码子点突变检测结果.运用 CE 与 PAGE 两种方法进行检测.毛细... 辛晓婷 王荣 贾正平 刘圆圆 马骏 谢华 张强关键词:毛细管电泳 限制性片段长度多态性 P53基因 点突变 文献传递