赵淑玲
- 作品数:11 被引量:55H指数:3
- 供职机构:中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 文山松毛虫质型多角体病毒S8片段cDNA克隆与原核表达被引量:3
- 2004年
- 文山松毛虫质型多角体病毒(DpwCPV)S8 片段被克隆和测序,该片段全长 1332bp,编码 390 个氨基酸组成的分子量大约为 43kDa 的蛋白 P44。根据本实验室测定出的马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV )基因组全序列,设计引物,扩增出文山松毛虫质型多角体病毒 S8 部分片段,并亚克隆出 p44 基因序列,然后将 p44 基因序列 cDNA克隆到表达载体 pET-28a 中,构建成表达质粒 pET-S8,用 IPTG 诱导大肠杆菌 BL21,经 SDS-PAGE 证明 p44 基因在大肠杆菌中获得成功表达,并对其编码蛋白序列进行了分析。
- 段兵赵淑玲张海元张小霞肖宇宙汤显春彭辉银
- 关键词:CPV基因组分析原核表达
- 马尾松毛虫质型多角体病毒S4的cDNA克隆及序列分析被引量:12
- 2003年
- 从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化第四片段S4,经RT-PCR扩增得到了S4的cDNA克隆并测定了其全序列。结果表明,S4全长由3262个碱基组成,包含一个编码1058个氨基酸的完整开放阅读框架。Blast同源分析显示,DpCPV s4与LdCPV S4、BmCPV S4和RRSV S2编码蛋白氨基酸的同源性分别为94%、92%和22%。另外,氨基酸序列部分区域与Methanosarcina mazei Goel的甲基化转移酶有同源性,且序列中含有鸟苷酸转移酶活性位点。
- 赵淑玲梁昌镛洪靖君彭辉银
- 关键词:马尾松毛虫质型多角体病毒CDNA克隆
- 马尾松毛虫CPV基因组S7的序列分析及部分序列的原核表达被引量:2
- 2003年
- 马尾松毛虫质多角体病毒(湖南株)基因组S7节段(AY180908)cDNA克隆及序列分析结果表明:S7由1501个碱基组成,编码由448个氨基酸组成的分子量为49.8 kDa的多肽P50。5′末端和3′末端具有5′-AGTAA-3′和5′-GTTAGCC-3′末端保守序列。该基因组与舞毒蛾质多角体病毒1型和家蚕质多角体病毒1型S7节段有很高的同源性,核苷酸序列同源性分别为97.2%和87.0%,氨基酸序列同源性分别为98.7%和92.8%。P50多肽与人型支原体的DnaK样蛋白在C-末端有相似性。本文报道了编码P50C259的cDNA序列的克隆并作了原核表达,当用1.0 mmol/L IPTG诱导2h,分子量约为37.3 kDa的融合蛋白在大肠杆菌BL21中得到大量表达。
- 洪靖君张海元赵淑玲段家龙彭辉银
- 关键词:马尾松毛虫原核表达
- 家蚕对马尾松毛虫质型多角体病毒的敏感性被引量:3
- 2003年
- 用虫体克隆技术 ,对马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株 (DpCPV HN)进行了分离纯化 ,鉴定为质型多角体病毒 1型。以家蚕春蕾×镇珠杂种F1 代及自交的F2 代 4或 5日龄幼虫进行毒力测定 ,以纯化的家蚕质型多角体病毒对F1 代幼虫的毒力测定为对照。结果表明 :家蚕品种春蕾×镇珠对家蚕质型多角体病毒敏感 ,马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株能引起其感染发病 ;马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株感染家蚕品种春蕾×镇珠F1 代幼虫和F2 代幼虫 2 8天后的半致死剂量(LD50 )分别为 885个和 18个CPB (质多角体 ) ,前者为后者的 4 9倍。马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株感染后的家蚕 ,其结茧率、化蛹率、羽化率、全茧量、茧层量和单蛾产卵数均有所下降 ,全茧量、茧层量、茧层率和单蛾产卵数与病毒感染剂量之间无显著关联。
- 洪靖君段家龙赵淑玲彭辉银
- 关键词:马尾松毛虫质型多角体病毒家蚕质型多角体病毒家蚕敏感性
- 马尾松毛虫质型多角体病毒全基因组序列的测定与分析
- 本论文由两章组成。 第一章对质型多角体病毒的研究作了综述性介绍,包括对质型多角体病毒的分类、多角体及病毒粒子、复制及组装、基因组结构和功能等方面作了阐述。另外,本章还对马尾松毛虫质型多角体病毒的研究作了重点的介绍。 第二...
- 赵淑玲
- 马尾松毛虫质多角体病毒NS5蛋白的表达和功能初步分析被引量:2
- 2006年
- 马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株第9个片段编码非结构蛋白NS5,利用pET-32a(+)载体带有组氨酸标记的重组蛋白进行表达,获得纯化的重组蛋白。利用凝胶电泳阻滞检测试验(EMSA)检测蛋白和核酸的结合作用,结果表明NS5蛋白能与病毒基因组dsRNA结合。
- 张万菊赵淑玲张小霞汤显春肖宇宙梅春蕾孙修炼彭辉银
- 关键词:原核表达
- 刚果红对棉铃虫中肠围食膜的影响及其病毒增效作用被引量:10
- 2006年
- 通过观察棉铃虫幼虫正常围食膜(peritrophicmembrane,PM)的形态、结构和组成,研究了刚果红对棉铃虫幼虫围食膜的破坏作用及其对棉铃虫核多角体病毒(HaNPV)的增效作用。结果表明,棉铃虫的围食膜分布于整个中肠,包裹着食物呈液囊状,类似于Ⅰ型围食膜;健康的围食膜呈无色、透明网状结构,并具有一定韧性,经刚果红染色后呈现桔红色。使用不同浓度梯度的刚果红喂食5龄幼虫,结果显示摄取含1.5%和2.0%刚果红的饲料2.5h后,宿主不能形成完整的围食膜,而是形成易脆无弹性的围食膜碎片。经过恢复实验后发现,刚果红对围食膜的破坏作用是瞬时的,可以在较短时间内得到修复。用1.0%刚果红喂食初孵幼虫,发现1.0%刚果红对棉铃虫的幼虫生长不能产生明显的影响。1.0%刚果红能加强棉铃虫幼虫对HaNPV的敏感性,缩短病毒杀虫时间,能使5龄幼虫的病毒感染致死率达到63%,对HaNPV具有非常显著的增效作用。
- 张小霞梁振普彭辉银张忠信汤显春李罡赵淑玲肖宇宙张万菊
- 关键词:棉铃虫刚果红棉铃虫核多角体病毒中肠围食膜
- 分月扇舟蛾颗粒体病毒的初步研究
- 本文研究分析了从自然罹死的分月扇舟蛾(Clostera anastomosis (Linnaeus))幼虫中分离到的一种颗粒体病毒(Granulosis virus 简称GV)。取CaLGV 在电镜下观察,形态为椭圆形,...
- 汤显春彭辉银张小霞赵淑玲肖宇宙张万菊
- 文献传递
- 分月扇舟蛾颗粒体病毒的形态和限制性内切酶图谱分析
- 2004年
- 将从自然罹死的分月扇舟蛾Closteraanastomosis (L .)幼虫中分离到的一种颗粒体病毒 (简称CaL GV)置于电子显微镜下观察 ,其形态为椭圆形 ,大小为 (30 4 .5 3× 139.0 9)nm ;经碱解病毒粒子为杆状 ,大小为(2 4 6 .2 1× 6 1.36 )nm ;经酚∶氯仿∶异戊醇 (2 5∶2 4∶1)抽提 ,氯仿∶异戊醇 (2 4∶1)洗涤 ,2倍体积无水乙醇沉淀 ,抽提的核酸经EcoRⅠ ,HindⅢ ,NcoⅠ ,PstⅠ限制型内切酶酶解 ,1×TAE缓冲液 ,0 .8%琼脂糖凝胶电泳 ,获得CaLGV核酸酶解图谱。以λDNA HindⅢ酶解片段在凝胶中的迁移率与相应片段分子量的对数值做标准曲线 ,求得CaLGV平均分子量为 10 0 .4 8kb ,核酸含量为OD2 60 /OD2 80 =1.89。
- 汤显春彭辉银张小霞赵淑玲肖宇宙
- 关键词:限制性内切酶
- 分月扇舟蛾颗粒体病毒的生物活性测定
- 本文用分月扇舟蛾颗粒体病毒对3龄分月扇舟蛾健康幼虫进行了生物活性测定,测定结果为分月扇舟蛾颗粒体病毒浓度在1×105PIB/mL时,感染3龄健康幼虫的回归方程为y=1.055+4.983x,Lt50为6.4天,其95﹪置...
- 汤显春彭辉银张小霞赵淑玲肖宇宙张万菊纪昌艳李罡
- 关键词:昆虫病毒分月扇舟蛾
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