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1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达被引量：6: 2010年; 目的构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA。结论成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础。; 资捷王前郑磊熊石龙蔡贞; 关键词：乙型肝炎病毒真核表达载体 BEWO细胞

HBeAg真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达被引量：2: 2010年; 目的构建乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法用PCR方法从质粒pMD18T-HBV中扩增HBeAg基因,克隆到pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,通过酶切、PCR及测序鉴定,并将该载体转染Bewo细胞,72h后,用Western免疫印迹和微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测HBeAg蛋白在胞内和上清中的表达。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建HBeAg表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达HBeAg,并可分泌HBeAg。结论构建了HBeAg真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,为研究胞内HBeAg对Bewo细胞Toll样受体表达的作用奠定了基础。; 资捷王前郑磊熊石龙蔡贞; 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒E抗原真核表达载体 BEWO细胞

HBeAg对慢性乙型肝炎孕妇胎盘组织TLR4表达的作用研究被引量：4: 2010年; 目的探讨HBeAg对慢性乙肝孕妇胎盘组织Toll样受体4(TLR4)表达的作用,及TLR4表达与胎盘持续感染HBV的关系。方法选取22例HBeAg阳性和24例HBeAg阴性慢性乙肝孕妇,及正常孕妇25例。以实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和免疫组化法检测胎盘组织中TLR4的表达,并采用实时荧光定量PCR和微粒子酶免疫分析法(MEIA)分别检测其血清HBV DNA和HBeAg水平。结果HBeAg阳性孕妇胎盘组织中TLR4mRNA的表达水平明显低于正常对照组和HBeAg阴性组(P<0.01),但与正常对照组相比,其血清HBeAg和HBV DNA水平则显著升高(P<0.01);胎盘组织中TLR4 mRNA表达与HBeAg水平呈负相关,而与血清HBV DNA水平无显著相关性。结论HBeAg对胎盘组织TLR4表达起负调节作用,胎盘组织中TLR4的表达与其持续感染HBV有一定关系。; 资捷王前郑磊熊石龙包杰蔡贞; 关键词：TOLL样受体4 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒E抗原胎盘

HBeAg阳性慢性乙型肝炎孕妇胎盘组织Toll样受体3的表达及意义被引量：5: 2010年; 目的探讨孕妇胎盘组织Toll样受体3(TLR3)的表达与乙型肝炎病毒(HBV)持续感染的关系。方法2008年11月至2009年5月在南方医科大学南方医院产科选取22例HBeAg阳性(HbeAg阳性组)和24例HBeAg阴性(HBeAg阴性组)慢性乙型肝炎(乙肝)孕妇,及正常孕妇25例。建立实时荧光定量RT-PCR检测胎盘组织中TLR3mRNA水平,同时以免疫组化法检测其在胎盘组织中的表达,并采用实时荧光定量PCR和微粒子酶免疫分析法(MEIA)分别定量检测其血清HBV-DNA和HBeAg水平。结果HBeAg阳性孕妇胎盘组织中TLR3mRNA水平(×10-1)(3.204±0.395)明显低于正常对照组(7.834±0.970)和HBeAg阴性组(5.746±0.580),两组相比P<0.01;HBeAg阳性孕妇血清HBeAg及HBV-DNA水平[562.2±337.4和(7.15±3.69)×107copy/mL]明显高于正常对照组(0.29±0.06,<1.00×103copy/mL)和HBeAg阴性组[0.35±0.07,(2.40±1.71)×103copy/mL](P<0.01);胎盘组织中TLR3mRNA表达与HBeAg水平呈负相关(r=-0.495,P<0.05),而与血清HBV-DNA水平无显著相关性。结论胎盘组织中TLR3的表达与其持续感染HBV有一定关系,HBeAg对胎盘组织TLR3表达起负调节作用。; 资捷王前郑磊熊石龙蔡贞; 关键词：TOLL样受体3 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒E抗原胎盘荧光定量RT-PCR

HBeAg影响人胎盘滋养层细胞TLR3//4表达效应及其在母婴传播中作用机制的研究: 研究背景和目的乙型肝炎病毒/(Hepatitis B virus, HBV/)是一种肝向性DNA病毒,严重威胁人类的健康。孕妇感染HBV后,可能经胎盘垂直传播给胎儿,引起宫内感染,是我国人群HBV传播的重要途...; 资捷; 关键词：TOLL样受体 HBEAG 胎盘滋养层细胞母婴传播; 文献传递

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资捷