蔡颖谦
- 作品数：168 被引量：802H指数：15
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程农业科学更多>>
- 有序胶原支架联合胶原靶向神经营养因子3对背根节细胞突起延伸的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 研究天然有序胶原支架联合具有胶原靶向结合域（CBD）的神经营养因子3（NT3）（CBD-NT3）对背根节细胞（DRGs）突起延伸的影响，探讨这种联合策略对脊髓损伤修复的意义。方法将SD大鼠尾肌腱行去细胞处理制备胶原支架，HE染色评价支架的处理效果；去细胞处理后支架负载CBD-NT3并与SD大鼠原代DRGs体外共培养1、3、5d．同时设NT3、PBS组作对照：FDA染色观察共培养后DRGs并定量分析各组细胞突起的长度及角度；扫描电镜观察共培养3d后支架和DRGs的超微结构。结果HE染色显示经处理后支架内细胞成分基本去除；共培养3d后CBD-NT3组DRGs突起延伸长度最长，与NT3组和PBS组比较差异均有统计学意义（P＜0．05）；细胞突起总体延伸方向与支架纤维长轴夹角的双侧95％可信区间为（18．8-20．7）°；扫描电镜显示DRGs能依靠胶原支架表面地貌锚定和生长。结论有序胶原支架联合CBD—NT3能定向引导并促进细胞突起延伸。为脊髓损伤修复的研究提供了一种有效的途径。
- 唐国强徐如祥樊娟姜晓丹薛杉酉建蔡颖谦
- 关键词：胶原神经营养因子3脊髓损伤
- 兔骨髓基质细胞诱导分化成神经元样细胞的研究被引量：8
- 2004年
- 目的检测由骨髓基质细胞诱导分化而成的神经元样细胞能否分泌氨基酸类神经生物活性物质成分,从而推断是否具有神经元的生化特征。方法无菌条件下抽取新西兰大白兔骨髓,梯度密度离心分离获取兔骨髓基质细胞(BMSCs),在神经干细胞培养基及细胞因子0.5 μg/ml维甲酸(RA)、20 ng/ml胶质源性神经营养因子(GDNF)于体外诱导分化为神经干细胞及神经元样细胞,采用免疫细胞化学方法进行鉴定,并应用高效液相色谱法(HPLC)检测其氨基酸类生物活性物质的含量。结果BMSCs培养10 d可见细胞大而圆,免疫细胞化学检测Nestin抗原阳性;培养20 d可见具有长突起的神经元样细胞形成,神经元特异烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学检查阳性,高效液相检测骨髓源性神经元样细胞含有高浓度的天冬氨基酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)。方差分析显示:随着BMSC培养天数的增加,其所含的Asp、Glu浓度也渐增加,RA+GDNF组所含Asp生物活性物质与其余各组比较有显著性差异(P<0.01)。结论兔BMSCs在体外条件下可以增殖分化,增殖细胞表达Nestin,分化的细胞则可表达NSE特异性抗原,并含有高浓度的兴奋性和抑制性氨基酸类神经递质成分;RA和GDNF作为BMSCs的诱导剂,在BMSCs向神经干细胞分化中起有重要的促进作用。
- 陈剑荣徐如祥姜晓丹徐强蔡颖谦邹雨汐丁涟沭
- 关键词：骨髓基质细胞分化神经元样细胞高效液相色谱法神经干细胞
- VEGF165-PE38重组免疫毒素真核表达载体的构建及表达
- 2009年
- 目的构建血管内皮细胞生长因子（VEGF）基因和铜绿假单胞菌外毒素衍生物（PE38）基因的真核融合表达载体，研究其在HEK293细胞中的表达情况。方法通过PCR获得实验需要的VEGF165基因片段，通过酶切pRB391质粒获得铜绿假单胞菌外毒素衍生物PE38基因，再通过适当的酶切及连接反应，构建VEGF165与PE38融合基因的真核表达载体pIRES2-VEGF165-PE38-EGFP，重组质粒经限制性内切酶及DNA序列测定证实构建成功后，用Lipofectamine2000脂质体转染HEK293细胞，然后用RT—PCR及ELISA法检测VEGF165-PE38融合蛋白在HEK293细胞的表达。结果酶切分析及DNA序列测定证实，VEGF165-PE38融合基因被成功克隆入真核表达质粒载体pIRES2-EGFP，RT—PCR及ELISA法检测证实重组基因可在HEK293细胞表达。结论VEGF165-PE38融合基因可在HEK293细胞中表达，为进-步研究其对肿瘤血管内皮细胞的靶向毒性及临床应用奠定基础。
- 胡昌辰柯以铨王斌全周丽媛吕俊张发兵卢建侃蔡颖谦秦玲莎
- 关键词：PE38免疫毒素HEK293细胞真核表达
- 胶质瘤细胞对血脑屏障水通道表达的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 :探索胶质瘤细胞对血脑屏障水通道表达的影响及其病理生理意义。方法 :通过内皮细胞系与胶质细胞体外共培养的方法建立体外血脑屏障模型。利用重水及高效液相分析的方法观察胶质瘤细胞作用对血脑屏障水转运的影响。运用半定量RT -PCR的方法分析胶质瘤细胞作用后血脑屏障内皮细胞及胶质细胞水通道 1和水通道 4的表达变化。结果 :胶质瘤细胞可以诱导血脑屏障内皮细胞水通道 1的异常表达并降低胶质细胞水通道 4的表达水平。同时 ,胶质瘤细胞明显增强了体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面至基底面的扩散。结论 :胶质瘤性脑水肿不一定是血浆等大分子物质通透性增加的结果。
- 陈祎招徐如祥杨志林徐宗俊姜晓丹蔡颖谦
- 关键词：神经胶质瘤血脑屏障水孔蛋白类
- 大鼠不同程度脑损伤模型的建立被引量：83
- 2000年
- 目的 建立一个可定量的不同程度脑损伤模型。方法 应用自由落体方法造成大鼠轻、中、重三型脑损伤模型 ,进行含水量、血脑屏障定量测定和超微结构观察。结果 损伤越重 ,脑挫裂伤灶越明显 ,血脑屏障破坏越明显 ,脑水肿程度越重 ,脑水肿程度与损伤程度相关。
- 王清华徐如祥李良平蔡颖谦邹玲
- 关键词：脑损伤动物模型
- 恒河猴骨髓基质细胞向成熟神经细胞分化的实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的研究恒河猴骨髓基质细胞(BMSCs)在体外向神经细胞诱导分化过程中神经递质分泌和神经细胞抗原表型表达情况。方法无菌条件下密度梯度法分离猴BMSCs,在体外应用神经干细胞培养液进行体外培养和诱导分化,分阶段用高效液相色谱法检测培养基中单胺类生物活性物质的含量,免疫细胞化学方法检测神经细胞抗原表型。结果高效液相检测神经干细胞培养基未测到单胺类生物活性物质,而经体外培养增殖10d、14d、30d的细胞培养基可检测到去甲肾上腺素 (NE)和多巴胺(DA)。Asp方差分析显示:随着BMSCs培养天数的增加,培养基中所含的NE和DA尤显著性差异(P>0．05)。同期细胞免疫组化检测出酪氨酸羟化酶(TH)、巢蛋白抗体(nestin)、β-微管蛋白 (β-tublin)、胶质原性纤维酸性蛋白抗体(GFALP)和神经元特异烯醇化酶(NSE)抗原表达。结论恒河猴BMSCs能在体外增殖,在适宜条件下能分化成神经元样细胞,并合成、分泌NE和DA;部分细胞表达神经干细胞、成熟神经元、胶质细胞和DA能神经元的抗原表型,提示在一定条件下,诱导分化的 BMSCs经过神经干细胞阶段可向成熟神经组织细胞分化。
- 徐强徐如祥姜晓丹潘力陈剑荣蔡颖谦张世忠
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞去甲肾上腺素多巴胺恒河猴
- 原子力显微镜在DNA研究中的应用被引量：4
- 2005年
- 目的探索原子力显微镜(AFM)研究DNA的分子结构的方法和优势。方法利用该显微镜对DNA分子进行扫描成像。结果AFM能够得到清晰分散的DNA图像,由于针尖的原因,其直径比理论值大。结论AFM在DNA表面结构研究中的具有很大的优势。
- 郭云昌蔡颖谦中岛秀郎
- 关键词：DNA扫描电镜
- 赛庚啶对大鼠脑损伤后脑微血管5－羟色胺代谢变化的作用
- 1996年
- 赛庚啶对大鼠脑损伤后脑微血管５－羟色胺代谢变化的作用徐如祥，柯以铨，陈长才，蔡颖谦５－羟色胺（５－ＨＴ）等单胺类神经递质在脑损伤脑继发性损害中的作用引起重视。脑微血管（ＢＭＶ）壁上的５－ＨＴ受体被过度激活可使血脑屏障损害，通透性增加，引起和加剧脑继发...
- 徐如祥柯以铨陈长才蔡颖谦
- 关键词：脑损伤5-羟色胺脑微血管
- 神经元细胞膜脂筏结构原子力显微镜研究被引量：3
- 2005年
- 目的测定小鼠神经元细胞膜脂筏纳米尺度三维结构.方法应用原子力显微镜(AFM)测定纯化的小鼠神经元膜脂筏.结果可见神经细胞单个脂筏的凹陷盘状圆形三维结构,周围高,边缘不完整,中间凹陷,直径在117～120 nm左右.结论神经细胞膜脂筏结构为直径100nm左右的扁圆形中间凹陷结构.AFM可以在纳米水平对细胞器进行三维结构测定.
- 郁毅刚徐如祥姜晓丹蔡颖谦丁涟沭姚谦明
- 关键词：神经元脂筏
- 大鼠骨髓源性神经干细胞NCAM受体标记检测及超微结构实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨神经细胞黏附分子(NCAM)受体作为大鼠骨髓源性干细胞检测标志,并利用原子力显微镜(AFM)扫描培养不同时段的细胞,获得细胞表面特异性超微结构。方法分离SD大鼠骨髓基质细胞,用神经干细胞培养基、脑源性神经细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、维甲酸持续诱导培养,在诱导培养后第6、8、10和12天应用SABC法免疫组化技术,检测NCAM受体表达情况;并对诱导培养后的细胞进行AFM扫描,检测细胞表面的形貌结构。结果光学显微镜下可见NCAM受体在诱导培养后第10天已经有表达。细胞超微结构的扫描测定显示细胞表面平均粗糙度在(11.2±1.5)nm,骨髓源性神经干细胞发育不同时段的细胞表面特征主要表现为细胞中央部表面粗糙而周边部光滑,细胞周边部均存在云雾状结构。结论NCAM受体可以作为大鼠骨髓源性神经干细胞的表面标记;AFM超微结构的明确,为进一步鉴定骨髓源性神经干细胞提供可能。
- 王春华金维哲姜晓丹刘月霞徐如祥蔡颖谦
- 关键词：骨髓基质细胞干细胞显微镜检查
