苏少锋
- 作品数：34 被引量：43H指数：4
- 供职机构：内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因密码子的优化及表达被引量：3
- 2017年
- [目的]合成经过密码子优化的葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因,并将2个基因在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)中进行分泌表达。[方法]对瘤胃真菌(Piromyces rhizinflatus,P.rhizinflatus)的外切葡聚糖酶cbhYW23-1基因(Gen Bank登录号:EU314937.1)和产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes,F.succinogenes)的内切葡聚糖酶end-1基因(Gen Bank登录号:X88561.1)进行L.lactis MG1363密码子偏爱性优化,并在2个基因的上游和下游分别引入ClaⅠ/XbaⅠ和Hind Ⅲ酶切位点,得到含有优化的cbhYW23-1基因和end-1基因的克隆载体p UC57-cbhYW23-1和p UC57-end-1;通过酶切后分别连接到构建的组成型分泌载体p MG36e+P32+SPusp45上,得到2个基因的表达载体,然后电转至L.lactis MG1363中,利用红霉素抗性筛选得到高拷贝转化重组子;以CMC-Na(羧甲基纤维素钠)为底物验证其活性及表达情况。[结果]成功地构建了cbhYW23-1基因和end-1基因的分泌型表达载体,2个基因均能够在L.lactis MG1363中高效稳定表达,2株重组菌株表达的外切葡聚糖酶酶活和内切葡聚糖酶酶活分别为118.80 U/mL和294.32 U/mL。[结论]密码子优化后的2个纤维素酶基因在L.lactis中获得理想稳定的表达,其高效基因工程菌的构建为将来实现这2种纤维素酶的工业化生产奠定了技术基础。
- 苏少锋萨初拉刘红葵赵小庆吴青海其布日王蕴华呼和
- 关键词：内切葡聚糖酶克隆密码子优化
- 蒙古马盲肠中纤维素分解菌的筛选、鉴定及酶学特性分析被引量：1
- 2022年
- 为研究蒙古马耐粗饲料的优良特点,试验以蒙古马盲肠内容物为研究对象,旨在筛选、分离出高效的蒙古马源纤维素分解菌株,并对分离菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法和摇瓶发酵法分离菌株并鉴定菌株类型。最后,通过测定纤维素酶活力分析菌株在不同pH、温度、碳源和氮源条件下的酶学特性。研究从蒙古马盲肠内容物中分离筛选到具有较高降解纤维素能力的解淀粉芽孢杆菌H3(Bacillus amyloliquefaciens H3)。菌株H3分泌纤维素酶的最适p H为4.8,在p H 3.0~8.0范围内,其酶活力相对稳定;在温度为65℃,酶活力最高,当温度为40~50℃时,该酶活力维持在80%左右,稳定性强。此外,H3发酵所需的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为2%的蛋白胨+酵母粉复合物(1:1),它具有相对较高的纤维素酶活力,有深入开发的潜力。
- 李雅静李雅静宋海燕苏少锋陶金山张建强芒来赵一萍
- 关键词：纤维素分解菌盲肠纤维素酶酶学特性
- 绒山羊FGF5基因打靶载体的构建
- 2015年
- [目的]构建绒山羊FGF5基因打靶载体,以期获得基因敲除的绒山羊个体,为研究绒山羊FGF5基因的功能以及培养长绒毛型绒山羊新品种提供新思路。[方法]通过PCR法扩增并克隆了绒山羊FGF5基因启动子区和部分第一外显子的1.6 kb片段和部分第一内含子的4.5 kb片段,并将1.6 kb片段插入到打靶载体p Lox的XbaⅠ/ClaⅠ位点,获得了9.6 kb的中间打靶载体p Lox5;再将4.5 kb片段插入到p Lox5的NotⅠ位点,通过酶切和PCR法验证获得了插入方向正确的打靶载体p Lox5-33。[结果]经过酶切和PCR法鉴定,最终获得了大小为14.1 kb的p Lox5-33。[结论]成功构建了绒山羊FGF5基因包含启动子区第一外显子部分序列和第一内含子部分序列的大小为14.1 kb的基因打靶载体p Lox5-33,为进一步获得基因敲除绒山羊个体以及研究绒山羊FGF5基因的功能奠定了基础。
- 郭慧琴苏少锋任卫波尹俊
- 关键词：绒山羊打靶载体
- 蒙古马母体与胎儿胃肠道NF-κB信号通路相关基因mRNA相对表达水平研究
- 2022年
- [目的]研究蒙古马母体与胎儿胃肠道不同区段NF-κB信号通路相关基因的mRNA相对表达水平。[方法]选取3匹体况良好的妊娠蒙古马进行屠宰,屠宰过程中取出胎儿,分别采集母体及胎儿的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、大结肠、小结肠和直肠组织;采用实时荧光定量PCR方法(qPCR),对NF-κB信号通路上6个相关基因(NF-κB p50、NF-κB p65、NFKBIA、IL-1β、TNF-α和IL-8)的mRNA相对表达量进行分析,比较母体和胎儿胃肠道不同区段组织中各基因的表达差异。[结果]NF-κB信号通路上6个基因在蒙古马母体和胎儿胃肠道不同区段8个组织中均有表达;总体来看,NF-κB p50、NF-κB p65和NFKBIA基因的mRNA相对表达量在母体和胎儿上均较高,IL-1β、TNF-α和IL-8基因的mRNA相对表达量均较低。在胃肠道区段8个组织中,6个基因的mRNA相对表达量基本呈现母体高于胎儿的特征;在回肠和盲肠组织中,母体NF-κB p50基因的mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于胎儿;在大结肠组织中,母体NF-κB p65基因和NFKBIA基因的mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于胎儿。[结论]NF-κB信号通路上6个基因在蒙古马母体和胎儿胃肠道8个组织中均有表达,且存在一定差异;母体部分肠道区段组织中的NF-κB p50、NF-κB p65、NFKBIA基因mRNA相对表达量显著高于胎儿。
- 蔺雅楠赵媛苏少锋赵俊利李雅静陶金山张建强翁雅娟武慧王秀美赵一萍
- 关键词：胃肠道NF-ΚB信号通路实时荧光定量PCR
- 一种牲畜固定笼装置
- 本实用新型公开了一种牲畜固定笼装置，涉及农牧业养殖技术领域。包括主体笼身，主体笼身底部设置固定板，主体笼身长度方向的两侧面分别设置第一卡位机构和第二卡位机构，第一卡位机构包括第一卡位扶手和第一卡位棍，两个第一卡位扶手相对...
- 陶金山苏少锋赵一萍赵小庆刘文强张建强芒来蔺雅楠李雅静刘桂芹伊六喜杜明白东义李蓓任秀娟格日乐其木格张心壮韩海格王希生神英超
- 饲喂方式对德州驴生长性能、营养物质消化率和盲肠微生物多样性的影响被引量：6
- 2020年
- 本试验旨在研究饲喂方式对德州驴生长性能、营养物质消化率和盲肠微生物多样性的影响。选择体重[(215±10)kg]相近、2周岁左右的健康德州公驴15头,随机分为C1组(饲喂方式为先粗后精)、C2组(饲喂方式为先精后粗)、C3组[饲喂方式为全混合日粮(TMR)],每组5头,预试期7 d,正试期75 d。结果显示:1)C2组平均日增重极显著高于C1和C3组(P≤0.01),C1组干物质和酸性洗涤纤维消化率以C1组最高,C3组次之,C2组最低,C1组与C2组间存在显著差异(P≤0.05)。2)饲喂方式对德州驴盲肠微生物组成有一定影响。在门水平上,各组盲肠微生物均以厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为主(二者占比>75%),其次为螺旋体菌门(Spirochaetes)、变形菌门(Proteobacteria)和纤维杆菌门(Fibrobacteres),且C2组厚壁菌门相对丰度高于C1组和C3组;在属水平上,将401个属中相对丰度低于1%的属聚为其他(占比>75%)后,各组均以其他为优势菌属;随后,C1组以螺旋体科未定义属(unidenti⁃fied⁃Spirochaetaceae)和厌氧孤菌属(Anaerovirbrio)为主,C2组以厌氧孤菌属、链球菌属(Strepto⁃coccus)和螺旋体科未定义属为主,C3组则以乳酸杆菌属(Lactobacillus)和螺旋体科未定义属为主。3)通过UPGMAA聚类树、主成分分析和物种差异性分析发现,3组德州驴盲肠微生物组成不同,且C2组与其他2组差别较大,C1组和C3组可聚为一类。综上可知,饲喂方式可极显著影响德州驴的平均日增重,显著影响干物质和酸性洗涤纤维消化率,并可改变盲肠微生物组成。
- 刘桂芹刘桂芹张心壮邢敬亚曲洪磊王涛苏少锋苏少锋赵一萍赵一萍
- 关键词：饲喂方式德州驴营养物质消化率盲肠微生物多样性
- 产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因密码子偏好性分析被引量：2
- 2017年
- 产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)end-1基因表达的内切葡聚糖酶是能够降解纤维素的纤维素复合酶中的一种。利用Codon W、CUSP和CHIPS等相关软件分析产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因的密码子使用情况,比较end-1基因与大肠杆菌、酿酒酵母菌、枯草芽胞杆菌以及乳酸乳球菌的密码子偏好性。结果表明,内切葡聚糖酶end-1基因偏好使用G/C结尾的密码子,其中有25种偏好密码子(RSCU值大于1),偏好性较强的有GCT、TGC、GAA、GGT、CAC、ATC、CTC、CCG、CGT、TCC和TAC(RSCU值均大于或等于2);end-1基因的密码子偏好性与4个宿主的基因组密码子偏好性差异较大,其中与乳酸乳球菌的密码子偏好性差异最大。若使该基因在上述几种表达系统中得到较高水平的表达,则需要对其密码子进行优化。
- 苏少锋萨初拉刘红葵赵小庆吴青海其布日王蕴华呼和
- 关键词：内切葡聚糖酶密码子偏好性密码子优化异源表达
- 绒山羊FGF5基因启动子至第二外显子片段的序列拼接及启动子的预测和序列分析
- 2014年
- 为构建绒山羊FGF5基因敲除载体及探明FGF5基因更多的序列信息,通过PCR方法分别扩增获得FGF5基因上游启动子至第一外显子1.6 kb片段、第一内含子至部分第二外显子8.0 kb片段及1.8 kb、2.4 kb和4.5 kb三段缺口片段。分别对以上PCR扩增片段进行测序,通过序列比对分析拼接获得了全长为9483 bp FGF5基因的部分序列,其结构包括编码区上游1 255 bp、第一外显子364 bp,第一内含子7 809 bp、部分第二外显子55 bp。并对绒山羊、绵羊、牛的FGF5基因启动子序列进行了分析,结果显示绒山羊和绵羊只有5个核苷酸的差异,而与牛的序列比较发现差异较大,牛的启动子中缺失了一个24 bp的DNA序列。本研究获得了绒山羊FGF5基因启动子至第二外显子部分序列的共9 483 bp的序列,为构建绒山羊FGF5基因敲除载体及探究FGF5基因的功能奠定了基础。
- 郭慧琴苏少锋郭俊王潇尹俊
- 关键词：绒山羊启动子
- 马奶营养价值和产品开发进展被引量：6
- 2018年
- 本文对马奶的组成成分、营养价值、医疗保健、马奶产品进行了描述。研究表明,马奶的营养成分与人乳最为接近,是人类母乳的最佳替代品,马奶蛋白质含量较低,平均为2%,乳糖含量平均为7.04%,是牛奶乳糖含量的1.5倍;马奶脂肪含量平均为1.87%,比牛奶脂肪含量少了1倍。马奶有较好的抗氧化、延缓衰老作用,并能提高人体免疫力。马奶是马乳产业化链条中最基本的组成部分,马奶的开发有助于为人类提供更多健康的乳制品和保健品。
- 敖敏赵一萍康德措苏少锋苏少锋李蓓白东义张心壮李蓓魏继尧芒来
- 关键词：马奶营养成分
- 绒山羊FGF5基因的序列分析及其敲除载体构建
- 成纤维细胞生长因子5/(Fibroblast Growth Factor-5,FGF5/)在中枢神经系统和皮肤中表达,在皮肤中抑制毛囊由兴盛期向休止期转化,FGF5敲除小鼠的被毛明显长于对照。其他动物如狗、猫和兔子的研究...
- 苏少锋
- 关键词：FGF5PCR山羊绵羊基因敲除
- 文献传递
