胡开顺
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BRD7逆转录病毒稳定系的构建及其功能评价
- 2013年
- 目的探索BRD7(bromodomain-containing protein7)是否具有抑癌基因的功能。方法根据NCBI提供的BRD7基因序列设计特异性引物扩增其编码区序列,经酶切、连接转化后进一步挑取单克隆菌落进行菌液PCR筛选及测序鉴定得到阳性重组质粒。共转293T细胞后收集浓缩病毒上清并感染U2OS细胞,24h后用嘌呤霉素(puromycin)筛选稳定表达BRD7的细胞株。结果菌落PCR扩增及DNA测序分析证明重组pMSCV-BRD7-GFP质粒克隆成功。GFP绿色荧光结果显示,绝大部分细胞成功整合了pMSCV-GFP或pMSCV-BRD7-GFP外源质粒;Western blotting检测发现感染重组质粒pMSCV-BRD7-GFP的细胞株中BRD7蛋白的表达水平显著高于对照组。功能结果显示,过表达BRD7显著抑制U2OS细胞的增殖,促进下游靶基因p21与MDM2的表达。结论本研究成功构建了针对BRD7基因的逆转录病毒稳定系,且初步证明了BRD7发挥抑癌基因的功能,为下一步深入研究其被调控的机制与功能奠定了基础。
- 张如华胡开顺武远众康铁邦
- 关键词：BRD7病毒载体抑癌基因
- 细胞周期调控与肿瘤靶向治疗
- 1)发现：Cdc25A可被GSK-3B磷酸化而降解的新机制,率先阐明GSK-3B失活是Cdc25A在肿瘤中高表达的原因之一(第一作者,Cancer Cell 2008),对目前正在进行以Cdc25A和GSK-3B为肿瘤治...
- 洪健唐清连徐双兵胡开顺谢显彪沈靖南元云飞曾益新康铁邦
- 关键词：细胞周期CHK1肿瘤靶向治疗
- 细胞周期调控与肿瘤靶向治疗
- 1)发现:Cdc25A可被GSK-3B磷酸化而降解的新机制,率先阐明GSK-3B失活是Cdc25A在肿瘤中高表达的原因之一(第一作者,Cancer Cell 2008),对目前正在进行以Cdc25A和GSK-3B为肿瘤治...
- 洪健唐清连徐双兵胡开顺谢显彪沈靖南元云飞曾益新康铁邦
- 关键词：细胞周期CHK1肿瘤靶向治疗
- 文献传递
- 幽门螺杆菌尿素酶基因的克隆及表达被引量：3
- 2010年
- 目的构建幽门螺杆菌尿素酶基因B亚单位(ureB)的原核表达质粒,诱导重组蛋白表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增尿素酶基因B亚单位,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离后连接克隆载体并测序,构建重组原核表达载体。结果成功扩增出1710bp的目的基因,测序结果证实与预期一致,该基因在大肠杆菌表达系统中得到表达。结论在大肠杆菌中成功表达幽门螺杆菌尿素酶基因B亚单位蛋白,为幽门螺杆菌疫苗的研发奠定了基础。
- 张如华徐双兵胡开顺康铁邦
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶基因克隆
