程千千 作品数:12 被引量:41 H指数:5 供职机构: 上海海洋大学 更多>> 发文基金: 上海市教育委员会重点学科基金 上海市基础研究重大(重点)项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 文化科学 农业科学 哲学宗教 更多>>
西伯利亚鲟β-actin基因cDNA全长克隆、序列分析及其作为内参基因的应用研究 被引量:5 2010年 采用同源克隆和RACE技术获得西伯利亚鲟(Acipenser baerii)β-actin基因cDNA全长,序列分析表明西伯利亚鲟β-actin基因cDNA全长1322bp,其包括的137bp的5′端非翻译区,57bp的3′端非翻译区和编码375个氨基酸残基的1128bp开放阅读框。与其他物种比对,该基因具极高的保守性。同时也利用同源克隆技术获得了西伯利亚鲟Sox2基因的同源保守区,该序列长768bp,编码256个氨基酸,也具较高的保守性,与其他物种的相似性在70%以上。以β-actin作为内参基因,对Sox2基因在西伯利亚鲟成鱼各组织及胚胎发育各时期进行实时荧光定量PCR检测,发现Sox2基因在不同组织中均有表达。其中,在肝、胰、肾、脑4个组织中表达量差距不大,均处于相对较低的水平,在肌肉组织中表达量最高,达到了肝脏的10.4倍。同时Sox2基因虽在西伯利亚鲟胚胎发育各时期均有表达,但表达也具明显的时间差异性。在受精卵期、囊胚期Sox2基因的相对表达量较低,在原肠期、神经胚期、视泡形成期和心脏形成期Sox2基因相对表达量较高,且在心脏形成期达到最高点。本研究为量化西伯利亚鲟发育分化过程中相关基因提供了坚实的参照工具,增加了后续试验的可信度,同时可为今后深入研究西伯利亚鲟Sox2在侧线神经节分化发育、细胞迁移过程中的作用提供基础参考依据。 施志仪 程千千 宋佳坤关键词:Β-ACTIN SOX2 内参基因 西伯利亚鲟的侧线神经丘发育形态学观察及其相关基因Sox9,Sox2表达检测 西伯利业鲟(Acipenser baerii)隶属鲟形目(Acipenser iformes),鲟科(Acipenser idae),鲟属(Acipense),为软骨硬鳞鱼,分布于西伯利亚河流和湖泊,是地球上最为古老的物... 程千千文献传递 褐牙鲆变态期间骨骼发育及其相关基因Sox9,Bmp4和Bmp2的表达分析 被引量:7 2009年 褐牙鲆作为一种重要的经济鱼种,有一个特殊的变态发育时期,其间骨骼形态和位置都发生很大改变。本研究利用三重染色技术,对褐牙鲆变态发育时期不同阶段的仔鱼整体骨骼进行染色,并对各阶段仔鱼及部分成鱼组织,采用特异性引物对骨骼发育的相关基因Bmp2,Bmp4和Sox9基因片段进行了克隆和半定量分析。研究表明,随着仔鱼变态发育,部分软骨逐渐转化为硬骨,头部筛骨呈不对称分化,额骨和顶骨位置发生改变,口形态改变,鳃丝软骨成骨,脊椎逐渐发育成熟,随之侧线位置发生改变。Sox9以及Bmp2、Bmp4基因在这时期中存在着差异表达,对骨骼发育有一定的调控作用。成鱼中,Bmp2和Sox9只在鳃、肠道和肝脏中有表达,且鳃中表达量较高。Sox9出膜后表达量突然增加,头部表达量较高,变态发育中开始递减,在变态高峰期明显减少;而Bmp4表达量则是出膜后明显减少,随后在变态高峰期表达量有增加,总体趋势表达量减少。 曾宣 施志仪 陈晓武 程千千关键词:褐牙鲆 变态发育 内脏团插核术刺激对三角帆蚌血细胞的影响 被引量:8 2010年 为了探讨三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)血细胞的类型及内脏团插核手术刺激对血细胞形态结构和数量的影响,研究利用相差显微镜、光学显微镜、透射电子显微镜和流式细胞仪对三角帆蚌血细胞进行了形态学研究。流式细胞术光散射图谱显示血细胞被分两类,一类为颗粒度高的大细胞,另外一类为颗粒度低的小细胞;相差显微镜观察显示,血细胞可分为胞体暗、折光性差和胞体明亮、折光性强的两类;Giemsa和H.E染色显示细胞分为胞质染色不均一、胞内颗粒明显和胞质染色均一、胞内颗粒不明显的两类;透射电镜超薄切片观察显示,颗粒明显的细胞胞质内线粒体、高尔基体等细胞器较丰富,颗粒不明显的细胞胞质内细胞器较少;负染结果表明血细胞主要分为表面不光滑、突起明显和细胞表面光滑、突起较不明显的两类。综合上述实验结果可见,三角帆蚌血细胞分为颗粒明显的细胞和颗粒不明显的透明细胞两大类。内脏团插核术刺激后,血细胞的形态和比例均发生显著变化。血细胞形态更多样,伪足状突起更明显,细胞内囊泡状物质增多,血细胞密度显著增高(P<0.01),颗粒细胞数量相对增加,透明细胞数量相对减少,并且手术刺激后两类细胞所占比例的变化在相差显微镜观测中差异极显著(P<0.01)。研究表明,作为三角帆蚌免疫系统重要组成部分的血细胞,在插核手术后,其类型、形态结构和数量均产生明显变化,这是机体对外界刺激产生的免疫防御反应,其中颗粒细胞担负着主要的免疫功能。 何秀娟 施志仪 陈晓武 程千千关键词:三角帆蚌 血细胞 西伯利亚鲟侧线神经丘发育过程的观察 2011年 研究对西伯利亚鲟(Acipenser baerii)的胚后幼鱼进行石蜡切片HE染色,同时利用荧光染料DiA[4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide]对侧线管中侧线神经丘毛细胞特异性标记的特点,示踪了西伯利亚鲟胚后仔鱼各个时期侧线神经丘分化发育的过程。结果显示,西伯利亚鲟侧线管内侧线神经丘毛细胞如纤毛状,呈竖立紧密排列。出膜3d仔鱼眼眶后神经基板发育分化活动剧烈,出膜10d的仔鱼眼眶后方的神经基板分化出眼眶上下侧线神经丘的两个分支,同时眼眶后神经基板进一步向后分化发育在眼眶后部形成躯干侧线神经丘,但整个侧线神经丘还未完全发育完成,待出膜15d时,眼眶上下和躯干侧线神经丘已基本发育完全,出膜22d的仔鱼侧线神经丘发育基本完成。研究为今后深入研究西伯利亚鲟侧线发育过程中的神经分化发育、细胞迁移奠定了初步形态学基础。 程千千 施志仪 陈晓武 宋佳坤 轩兴荣关键词:毛细胞 发育 Full-length cDNA Cloning and Tissues Expression Analysis of Ferritin Gene from Acipenser sinensis 被引量:2 2009年 According to the conserved sequence of the ferritin gene, a homologous sequence was obtained from the EST database through a BLAST search against the GenBank database. This sequence was amplified with the method of RT-PCR, false sequencing was corrected, and full length eDNA of the ferritin subunit from the Chinese sturgeon was obtained. After being submitted to the GenBank database, the sequence accession number EU348782 was assigned. With the length of 896 bp, this eDNA includes entire coding regions of 53 lbp, which encodes 176 amino acids (aa). The molecular weight was predicted to be 20339.9Mr and the theoretical isoelectric point 5.66. It shares 82.9% protein sequence homology with the ferritin of the Atlantic salmon. This gene is expressed in many organs of the Chinese sturgeon, for example, the liver, pancreas, muscle, brain, heart and gastric mucosa. The highest expression level was found in the pancreas and the heart, while the muscular tissue showed the lowest. Homology modeling was used to predict the 3-D structure of the protein, which included 5 alpha helices and 10 turns. The ferritin protein structure could be overlapped and showed high similarity with that of human, flog and bacteria. It was revealed that this kind of ferritin was highly conserved in structure and function. 陈晓武 施志仪 程千千关键词:FERRITIN BIOINFORMATICS 借助易班开展研究生党建工作的新探索 被引量:5 2011年 当前高校研究生党建工作的开展因研究生群体的特殊性而面临着诸多现实问题和困难。本文结合上海高校易班建设的成果,吸取上海海洋大学在易班建设中所获得的经验。探索建立基于易班平台的“党建信息广播站”.促进研究生党支部建设学习型党组织:将研究生易班打造成为思想汇报和学习心得的交流平台.进一步增强党员队伍的先进性:创新党组织生活方式。促进党务公开,密切党群关系;开拓辅导员关注党员、群众诉求的有效渠道和展现党支部风采的靓丽窗口,为高校研究生党建工作提供一些参考。 金淑芳 程千千 张登沥关键词:党建工作 心理健康课程思政实践八段锦融合五行音乐的正念训练 被引量:1 2020年 大学生心理健康课程应注重对大学生正确价值观的培育。倘若缺乏正确价值观的引导,便极可能与预设的教育初衷渐行愈远,进而在发展过程中迷失[1]。当前国内心理健康工作者在心理健康教育本土化过程中做了大量工作,但是焦点主要集中在个体心理咨询理论、人际过程的研究和团体组织行为研究,在认知行为团体咨询领域研究较少,正念训练应用于团体的研究理论,更是近两年才引入。如何更好的促进认知行为团体治疗的本土化,在正念训练运用的过程中引入课程思政,充分发挥思政育人育心两手抓,在心理健康水平提升的同时,将浸润着中华文明几千年来的中医学,这一东方智慧的光芒融入到大学生心理健康教育过程,作为承载正念训练的载体促进其实施,进而促进大学生思想道德素养的提高,优化大学生的思想,渗透优秀传统文化,促进大学生坚持不懈、自强不息的精神培养[2]。 程千千关键词:心理健康课程 思想道德素养 八段锦 团体咨询 基于提升内隐自尊的心理契约建构在研究生易班网络思想政治教育的探索 2020年 我国高等教育的目标是培养社会主义的建设者和接班人,随着移动互联网的兴起与应用,高等院校思想政治教育展现形式与内涵较以往相比更多元和深入。高校研究生的特质和其科研、学习方式特征使易班网络思想政治成为思想政治教育不可或缺的模块和高校研究生工作者的有力抓手。然而在推进过程中明显存在诸多现实问题影响易班这一平台作为研究生思想政治教育领域舞台的建构。本研究探寻通过运用绘画治疗和正念运动治疗的途径提升研究生内隐自尊,从而使其放下固有防御,提升社会自我效能感,促进与高等院校思想政治工作者的关系契约形成,进一步建构两者心理契约,使高等院校思想政治工作者和研究生双方形成一致的价值和目标取向,增强研究生对思想政治教育的认同感和满意度。引发研究生爱学、要学,更好推动基于易班平台的网络思想政治教育开展,牢记习近平总书记嘱托,争做德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人。 程千千关键词:思想政治教育 关系契约 绘画治疗 内隐自尊 西伯利亚鲟Sox9基因cDNA全长克隆、序列分析及其表达检测 被引量:5 2010年 为了研究Sox9基因在西伯利亚鲟侧线神经发育过程当中所起的调控作用,本研究利用RT-PCR和RACE方法获得了西伯利亚鲟Sox9基因cDNA全长序列,经序列分析表明,所克隆Sox9cDNA全长为1409bp,包括开放阅读框(open reading frame,ORF)1083bp,5′端非翻译区(untranslate dregion,UTR)19bp和3′端非翻译区(untranslate dregion,UTR)307bp。1083bp的ORF共编码360个氨基酸,相对分子质量为41221.7U。序列分析表明,其与施氏鲟的亲缘关系较近,其次是斑马鱼。经实时荧光定量PCR技术对西伯利亚鲟Sox9基因在各组织以及在胚胎发育各时期中的相对表达量检测发现,Sox9在西伯利亚鲟中的表达具明显的组织差异性和时间差异性。其中,在肝,肾,肌肉,胰中的相对表达量较低。然而,大脑组织中的表达量与以上4个组织相比,处于极高水平,达到胰脏中相对表达量8.9倍,达到表达量最低点肾脏中的近21倍。在胚胎发育的不同阶段,Sox9均有表达。在原肠期、神经胚期及视泡形成期,Sox9基因的表达量均较高,特别是在原肠期其表达量达到西伯利亚鲟整个胚胎发育期的最高点,相当于表达量最低点心脏形成期的1.9倍。在神经胚期和视泡形成期,Sox9的相对表达量也相对处于较高水平,仅比原肠期略低,其相对表达量是心脏形成期1.2倍和1.4倍。本研究将为今后深入研究Sox9基因在西伯利亚鲟侧线神经节分化发育、细胞迁移过程中所起的调控作用积累资料。 施志仪 程千千 宋佳坤 轩兴荣关键词:SOX9 CDNA全长 CDNA末端快速扩增