王雅静
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭肠炎病毒糖蛋白gB-gD主要抗原域的串联表达被引量：1
- 2013年
- 为了研究鸭肠炎病毒gB和gD基因串联表达后的免疫学活性,根据已发表的鸭肠炎病毒糖蛋白gB和gD基因序列设计两对引物,分别扩增了gB和gD基因主要抗原域,将其克隆到表达载体pPRO-EX—HTb中,构建重组表达质粒pHTb—gB-gD。将重组表达质粒pHTb-gB-gD转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,SDS—PAGE表明:获得串联表达的gB和gD重组蛋白约60.5 Ku,与预期蛋白的分子质量一致,主要以包涵体的形式存在。Western-blot表明:串联表达的gB和gD重组蛋白可与鸭肠炎病毒阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。串联表达的gB和gD重组蛋白为下一步建立针对鸭肠炎病毒的诊断方法奠定基础。
- 王雅静郭东春刘家森王淑亚原冬伟姜骞林欢司昌德曲连东
- 关键词：鸭肠炎病毒糖蛋白D
- 多杀性巴氏杆菌Lon蛋白酶的原核表达及ATPase活性的检测被引量：1
- 2014年
- 为表达多杀性巴氏杆菌(P.multocida)Lon蛋白及检测其生物活性,本研究通过PCR扩增P.multocida C51-17株Lon基因,将其克隆到质粒pET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET30a-Lon,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白Lon,采用Ni-NTA His-Bind Resin纯化目的蛋白。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白Lon分子量大小约为97 ku,主要以可溶性蛋白形式表达;western blot检测结果表明,重组表达蛋白能够被P.multocida阳性血清识别;ATPase活性检测试验表明,纯化的重组蛋白Lon具有ATPase活性,其将ATP降解为ADP的酶活性可以达到27 708.47μmol/(mg·min)。本研究表达了P.multocida Lon重组蛋白,并且测定其ATPase活性,为进一步研究Lon蛋白在P.multocida致病中的作用奠定了基础。
- 王淑亚郭东春李影王雅静刘家森姜骞曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌原核表达ATPASE活性
- 多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达被引量：1
- 2014年
- 为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理，采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因，并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中，将重组表达载体pET30a—prfA转化到大肠杆菌BL21（DE3）pLysS感受态细胞中，经IPTG诱导表达，进行SDS—PAGE分析和Western—blot分析。结果显示，这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95．6％～100％，在氨基酸水平上的同源性为98．9％～100％。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45．6ku，与预期的大小一致，以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应，具有良好的反应原性。
- 李影郭东春王淑亚张爱芹胡晓亮王雅静刘家森姜骞曲娟娟曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌原核表达
- 鸭肠炎病毒糖蛋白gB乳胶凝集试验的建立及应用
- 鸭病毒性肠炎(Duck viral enteritis，DVE)又称鸭瘟(Duck plague，DP)，是由鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus，DEV)引起鸭、鹅等雁形目禽类的一种急性、败血性、高度致...
- 王雅静
- 关键词：鸭肠炎病毒原核表达乳胶凝集试验抗体诊断
- 文献传递
