王赟
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
- 供职机构：武汉大学中南医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠肺缺血再灌注时Nrf2与铁死亡的关系被引量：3
- 2022年
- 目的评价大鼠肺缺血再灌注时核因子E2相关因子2(Nrf2)与铁死亡的关系。方法健康雄性SD大鼠54只,体重220~250 g,采用随机数字表法分为3组(n=18):假手术组(Sham组)、肺缺血再灌注组(IR组)和肺缺血再灌注+Nrf2激动剂萝卜硫素组(IR+SFP组)。采用夹闭左肺门60 min再灌注120 min的方法建立肺缺血再灌注损伤模型。IR+SFP组于肺缺血前3 d腹腔注射萝卜硫素500μg/kg,1次/d,给药结束后2 h制备模型。再灌注结束时处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),BCA法检测蛋白浓度,酶联免疫吸附法测定IL-6、TNF-α浓度;处死后,取肺组织,透射电镜下观察肺组织超微结构,计算肺组织湿重/干重(W/D)比值,比色法检测Fe^(2+)、MDA、谷胱甘肽(GSH)含量,Western blot法检测核蛋白Nrf2、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)表达。结果与Sham组比较,IR组BALF蛋白、IL-6和TNF-α浓度、肺组织W/D比值、Fe^(2+)和MDA含量升高,GSH含量降低,GPX4表达下调,核蛋白Nrf2、ACSL4表达上调(P<0.05),Ⅱ型肺泡上皮细胞表现出铁死亡特征性改变包括线粒体皱缩,线粒体嵴减少;与IR组比较,IR+SFP组BALF蛋白、IL-6和TNF-α浓度、肺组织W/D比值、Fe^(2+)和MDA含量降低,GSH含量升高,核蛋白Nrf2和GPX4表达上调,ACSL4表达下调(P<0.05),肺组织病理改变明显减轻。结论大鼠肺缺血再灌注时Nrf2可抑制铁死亡,参与其内源性保护机制。
- 王赟李心怡王焱林张宗泽
- 关键词：NF-E2相关因子2再灌注损伤
- 鸢尾素通过Nrf2/GPX4信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的作用机制被引量：2
- 2023年
- 目的探讨Nrf2/GPX4信号通路在鸢尾素减轻脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤中的作用。方法将72只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)、鸢尾素组(Ir组)、鸢尾素+Nrf2抑制剂组(Ir+ML385组)。各组于模型制备后24 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定BALF中蛋白浓度,采用ELISA法检测BALF中IL-6、TNF-α含量;HE染色观察肺组织病理学结果并评分,计算肺组织湿/干重比;比色法检测肺组织中Fe^(2+)、MDA、GSH含量;Western blot测定肺组织中GPX4、ACSL4及胞核Nrf2的表达。结果与C组比较,ALI组中BALF蛋白浓度、IL-6、TNF-α含量、肺组织病理损伤评分、湿/干重比、Fe^(2+)、MDA含量均增加,GSH含量降低,GPX4表达降低,ACSL4、胞核Nrf2表达增加(P<0.05);与ALI组比较,Ir组中BALF蛋白浓度、IL-6、TNF-α含量、肺组织病理损伤评分、湿/干重比、Fe^(2+)、MDA含量均降低,GSH含量增加,GPX4、胞核Nrf2表达增加,ACSL4表达降低(P<0.05);与Ir组比较,Ir+ML385组中BALF蛋白、IL-6、TNF-α含量、肺组织病理损伤评分、湿/干重比、Fe^(2+)、MDA含量均增加,GSH含量降低,GPX4、胞核Nrf2表达降低,ACSL4表达增加(P<0.05)。结论Nrf2/GPX4信号通路参与了鸢尾素减轻LPS诱导的大鼠急性肺损伤的过程,其与抑制铁死亡有关。
- 罗晶彭君张静王赟李心怡
- 关键词：急性肺损伤核因子E2相关因子2
- 异丙酚对大鼠心肌缺血再灌注时Pim-1表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨异丙酚对大鼠心肌缺血再灌注时Pim-1表达的影响。方法健康雄性sD大鼠40只，体重220～250g，采用随机数字表法，将其随机分为5组（n=8）：假手术组（s组）、缺血再灌注组（I／R组）、脂肪乳剂组（I组）、低剂量异丙酚组（P1组）和高剂量异丙酚组（P2组）。I／R组、I组、P1组和P2组和采用结扎左冠状动脉前降支30min再灌注的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。P1组和P2组于缺血前10min经股静脉输注异丙酚6、12mg·kg^-1·h^-1至再灌注120min，I组给予脂肪乳剂1．2ml·kg^-1·h^-1。再灌注120min时，取心肌组织，测定心肌梗死面积、细胞凋亡、Pim-1表达和caspase-3活性。结果与s组比较，I／R组和I组心肌梗死面积、凋亡指数和caspase-3活性升高，心肌组织Pim-1表达下调（P〈0．01）；与I／R组比较，P1组和P2组心肌梗死面积、凋亡指数和caspase-3活性降低，心肌组织Pim-1表达上调（P〈0．01），I组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论异丙酚可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤，其机制与上调Pim-1表达有关。
- 王赟付泉源武海崟张婧婧王焱林
- 关键词：二异丙酚心肌再灌注损伤PIM-1
- 丙泊酚后处理对大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤保护作用的实验研究
- 目的 采用冠状动脉左前降支结扎30min再灌注120min的方法复制在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,观察丙泊酚(propofol,PPF)后处理对其血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lac...
- 王赟王焱林张宗泽何祥虎
- 关键词：心肌缺血再灌注损伤
- PI3K/Akt通路在槲皮素后处理减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用被引量：11
- 2019年
- 目的探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系。方法将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H/R+槲皮素+抑制剂组(H/R+Que+W组)共4组。Con组细胞正常培养6 h;H/R组仅构建H/R模型;H/R+Que组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入终浓度为40μmol/L的槲皮素,随即复氧4 h;H/R+Que+W组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入PI3K抑制剂Wortamannin 100 nmol/L和槲皮素40μmol/L,复氧4 h。采用MTT法测定细胞活力;比色法测定培养液LDH活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2基因家族中的促凋亡基因(Bax)蛋白表达。结果与Con组比较,H/R组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05)。与H/R组比较,H/R+Que组细胞存活率升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,p-Akt表达上调,Bcl-2/Bax增高(P均<0.05)。与H/R+Que组比较,H/R+Que+W组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05)。结论槲皮素后处理通过激活PI3K/Akt信号途径减轻H/R引起的心肌细胞凋亡。
- 王赟张宗泽张婧婧陈莹莹吴云王焱林
- 关键词：槲皮素缺氧复氧心肌细胞PI3K/AKT信号通路
- PI3K／Akt信号通路在异丙酚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的评价磷脂酰肌醇3-激酶／丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K／Akt）信号通路在异丙酚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法体外培养SD乳鼠心肌细胞，接种于96孔板（细胞密度1×10^5／ml，200μl/孔）或6孔板（细胞密度5×10^5／ml，2ml／孔）中，采用随机数字表法，将细胞随机分为4组（n=24）：常规培养组（C组）细胞常规培养6h；缺氧复氧组（H／R组）细胞行缺氧2h，复氧4h；缺氧复氧＋异丙酚组（H／R＋P组）于缺氧结束时行异丙酚（终浓度50μmol／L）后处理；H／R＋异丙酚＋PI3K抑制剂组（H／R＋P＋W组）于缺氧结束时加入PI3K抑制剂渥曼青霉素（终浓度100nmol／L）和异丙酚（终浓度为50μmol／L）。复氧结束时，采用MTT法测定细胞活力，应用生化自动分析仪测定培养液LDH活性；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western blot法检测心肌细胞磷酸化Akt（p-Akt）、Bcl-2及Bax表达水平。结果与C组相比，H／R组细胞活力降低，LDH活性和细胞凋亡牢升高，p-Akt和Bax表达上调，Bcl-2表达下调，Bcl-2／Bax降低（P〈0．05）。与H／R组比较，H／R＋P组细胞活力升高，LDH活性和细胞凋亡率降低，p-Akt和Bcl-2表达上调，Bax表达下调，Bcl-2／Bax升高（P〈0．05）。与H／R＋P组比较，H／R＋P＋W组细胞活力降低，LDH活性和细胞凋亡率升高，p-Akt和Bcl-2表达下调，Bcl-2／Bax降低（P〈0．05）。结论异丙酚后处理减轻心肌细胞缺氧复氧损伤的机制与激活PI3K／Akt信号通路有关。
- 王赟张宗泽吴云王焱林
- 关键词：1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶二异丙酚细胞低氧
- 氢吗啡酮后处理对大鼠心肌保护效应的机制:PI3K/Akt信号通路介导的自噬被引量：1
- 2021年
- 目的评价氢吗啡酮后处理对大鼠心肌保护效应的机制与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路介导的自噬的关系。方法健康雄性SD大鼠40只,体重220~250 g,采用随机数字表法分为5组(n=8):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、氢吗啡酮后处理组(HP组)、PI3K抑制剂组(W组)、氢吗啡酮后处理+PI3K抑制剂组(HP+W组)。采用左冠状动脉前降支结扎30 min再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型。HP组于再灌注前5 min经股静脉注射氢吗啡酮0.1 mg/kg。HP+W组于再灌注前5 min经股静脉注射氢吗啡酮0.1 mg/kg及PI3K抑制剂渥曼青霉素15μg/kg。W组于再灌注前5 min经股静脉注射渥曼青霉素15μg/kg。再灌注结束时,采用TTC染色法确定心肌梗死面积(IS),采用比色法检测血清乳酸脱氢酶(LDH)活性,电镜观察心肌超微结构变化,采用Western blot法检测磷酸化Akt(p-Akt)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平,计算LC3-Ⅱ/Ⅰ比值。结果与Sham组比较,IR组IS、血清LDH活性增加,心肌组织p-Akt表达上调,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05),心肌细胞自噬空泡增多,细胞超微结构损伤明显;与IR组比较,HP组IS、血清LDH活性降低,心肌组织p-Akt表达上调,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低(P<0.05),心肌细胞自噬空泡减少,超微结构损伤减轻;与HP组比较,HP+W组IS、血清LDH活性增加,心肌组织p-Akt表达下调,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增加(P<0.05),心肌细胞自噬空泡增多,细胞超微结构损伤加重。结论氢吗啡酮后处理对大鼠心肌保护效应的机制与激活PI3K/Akt信号通路,抑制自噬有关。
- 王赟张婧婧吴云张宗泽
- 关键词：氢吗啡酮心肌再灌注损伤自噬1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- Toll样受体4在新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2018年
- 目的 评价Toll样受体4（TLR4）在新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡中的作用.方法 取出生1～3d的SD新生大鼠心肌细胞,在含20％胎牛血清的DMEM培养液中原代培养,将细胞接种于6孔细胞培养板,采用随机数字表法分为4组（n=10）：对照组（C组）正常培养24h;缺氧复氧组（H/R组）行缺氧2h后复氧4h;阴性对照转染组（con-siRNA组）和TLR4-siRNA组用siRNA、TLR4-siRNA转染,终浓度为80 nmol/L.于缺氧复氧损伤模型制备成功后,采用MTT法观察心肌细胞存活情况,采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测TLR4 mRNA的表达,采用Western blot法检测心肌细胞TLR4、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达.结果 与C组比较,其余3组心肌细胞存活率降低,TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达上调,心肌细胞凋亡率升高,Bcl-2表达下调（P＜0.01）;与H/R组和con-siRNA组比较,TLR4-siRNA组心肌细胞存活率升高,TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达下调,心肌细胞凋亡率降低,Bcl-2表达上调（P＜0.01）.结论 Toll样受体4可通过下调Bcl-2表达,上调caspase-3及Bax表达,参与新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡的过程.
- 郑勇萍王赟王成夭张宗泽王焱林
- 关键词：TOLL样受体4小分子干扰肌细胞缺氧细胞凋亡
- 氢吗啡酮后处理经PI3K/Akt通路减轻大鼠心肌缺血-再灌注细胞凋亡被引量：4
- 2021年
- 目的探讨PI3K/Akt信号通路在氢吗啡酮后处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注细胞凋亡中的作用。方法健康雄性SD大鼠40只,按照随机数表法随机分为5组,每组8只,假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)、缺血-再灌注+氢吗啡酮组(I/R+H组)、缺血-再灌注+PI3K抑制剂组(I/R+W组)、缺血-再灌注+氢吗啡酮+PI3K抑制剂组(I/R+H+W组)。采用左冠状动脉前降支结扎30 min、再灌注120 min的方法建立心肌缺血-再灌注损伤模型。实验结束后,用TTC染色法测心肌梗死面积;用比色法检测血清乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;末端标记法(TUNEL)测心肌细胞凋亡;Western blot法检测p-Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达。采用SPSS 13.0软件行统计分析。采用单因素方差分析进行组间比较。结果与Sham组比较,I/R组心肌梗死面积、血清LDH漏出量及心肌细胞凋亡增多,p-Akt表达和Bax表达上调,Bcl-2表达下调(P<0.05);与I/R组比较,I/R+H组心肌梗死面积、血清LDH漏出量及心肌细胞凋亡减少,心肌p-Akt及Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.05);与I/R+H组比较,I/R+H+W组心肌梗死面积、血清LDH漏出量及心肌细胞凋亡增多,p-Akt表达和Bcl-2表达下调,Bax表达上调(P<0.05)。结论氢吗啡酮后处理可减轻心肌缺血-再灌注引起的心肌细胞凋亡,其心肌保护机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。
- 王赟张宗泽张婧婧吴云王焱林
- 关键词：缺血-再灌注氢吗啡酮磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
