王新生
- 作品数：75 被引量：207H指数：8
- 供职机构：河北北方学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金河北省科技支撑计划项目河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 多聚赖氨酸和明胶对神经干细胞增殖和分化的影响被引量：1
- 2010年
- 背景:目前大鼠神经干细胞体外诱导分化的研究报道诸多,但其分化过程很难控制,很多实验的操作方法复杂,分化比率也很低。目的:探索大鼠胚胎前脑神经干细胞体外原代及传代培养方法,并观察其分化规律。方法:胎鼠在无菌条件下分离出前脑,制备单细胞悬液,以1×1011L-1接种于含N2的DMEM/F12培养基中培养,传代培养过程中加入BrdU,标记神经干细胞球。诱导分化实验分为多聚赖氨酸铺板组、明胶铺板组和无铺板组。采用体积分数20%胎牛血清刺激其分化。免疫细胞化学检测nestin、BrdU及在血清诱导条件下神经干细胞向神经细胞分化的能力。结果与结论:细胞呈神经干细胞样生长,具有连续增殖能力,可以传代培养。传代神经球中的细胞均呈nestin阳性和BrdU阳性。多聚赖氨酸铺板组和明胶铺板组贴壁后分化为神经细胞能力强于无铺板组(P<0.01)。多聚赖氨酸铺板组略强于明胶铺板组(P>0.05)。神经谱系标记物神经胶质纤维酸性蛋白和微管相关蛋白2的免疫细胞化学结果均阳性。结果表明,大鼠胚胎前脑富含神经干细胞,其分化观察,多聚赖氨酸和明胶在诱导神经干细胞分化中作为细胞贴壁支持物提高分化细胞数量的作用,且多分化为星形胶质细胞。
- 孙黎张力胡晓峰张辉罗强王新生朱登祥薄爱华
- 关键词：多聚赖氨酸神经干细胞明胶增殖分化体外培养
- 脐血间充质干细胞移植与免疫调节
- 2012年
- 背景:近年研究显示,脐血间充质干细胞的自我更新和多向分化潜能为细胞移植治疗提供了基础条件,而其免疫调节功能也极大地拓展了细胞治疗的方向和范围。目的:就近期脐血间充质干细胞的免疫调节和细胞移植研究进行回顾分析。方法:应用计算机以"umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells"为关键词检索Pubmed数据库,以"脐血间充质干细胞"为关键词检索知网数据库,时间限定为2008-01/2011-06,语言种类为"English"和汉语。通过阅读标题和摘要进行初筛,排除研究内容与此文无关的文献、重复性研究及Meta分析,选择近期发表或发表在权威杂志的30篇文献进行综述。结果与结论:脐血间充质干细胞具有与骨髓间充质干细胞相似的自我更新和多向分化潜能。通过细胞移植技术,脐血间充质干细胞在糖尿病、神经退化性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病等以及神经损伤后的修复治疗方面显示出很强的潜力。同时,脐血间充质干细胞又具有免疫调节作用,其可通过下调T细胞的增殖,降低免疫反应。利用该特点,脐血间充质干细胞在一些免疫性疾病,如移植物抗宿主病和狼疮性肾炎等疾病的细胞治疗方面也取得了积极的进展。
- 焦保良王景川高炳华王新生
- 关键词：免疫调节细胞移植脐血间充质干细胞
- 术后认知障碍危险因素分析及应对
- 2016年
- 术后认知障碍(postoperative cognitive dysfunction,POCD)是临床术后常见中枢神经系统并发症,表现为记忆力受损、注意力不集中及学习能力、语言和思维能力下降等,患者日常生活质量下降,增加围术期并发症甚至死亡率,越来越受到社会及学术界重视。现有资料表明POCD发生与年龄有关,最近研究发现,术前基础疾病和用药、术中麻醉药物和手术方式的选择、术后疼痛和炎症等都能诱发POCD。深入研究POCD发生的危险因素及应对方案对预防其发生发展有重要意义。
- 吴倍滕金亮王新生杨跃平
- 关键词：术后认知障碍七氟烷异氟烷中枢神经系统炎症
- CD62L、MadCAM-1表达与非小细胞肺癌淋巴结转移关系被引量：1
- 2013年
- 目的初步探讨细胞粘附分子CD62L及黏膜地址素细胞粘附分子(mucosal addressin cell adhesion molicule,MadCAM-1)在非小细胞肺癌及其转移淋巴结中的表达状况及其与淋巴结转移之间的关系和意义。方法选取肺癌60例和淋巴结转移标本30例,同时选取正常肺组织30例以及无转移淋巴结30例,利用免疫组化检测CD62L、MadCAM-1在不同组别的表达情况。结果 CD62L在肿瘤组织中表达在肿瘤细胞、脉管内癌栓、间质浸润的淋巴细胞;在转移淋巴结主要表达在转移灶肿瘤细胞、脉管内癌栓以及淋巴细胞;在正常肺组织以及无转移淋巴结主要表达在成熟淋巴细胞;CD62L在癌组织中表达高于正常肺组织(P<0.05);转移淋巴结中的表达高于无转移淋巴结表达(P<0.05);CD62L在转移淋巴结中表达与癌组织中的表达相比无差异(P>0.05);CD62L在正常肺组织表达与无转移淋巴结表达差异无统计学意义(P>0.05)。MadCAM-1主要表达淋巴结滤泡间区的高内皮后微静脉内皮细胞;在癌组织中的高内皮微静脉无表达;转移淋巴结中的表达高于无转移淋巴结表达(P<0.05)。CD62L及其受体MadCAM-1表达在肺癌组织以及转移淋巴结中表达之间存在密切相关(r=0.7081,P=0.002);CD62L及其受体MadCAM-1表达在肺癌组织以及无转移淋巴结中表达之间不存在切相关(P>0.05)。CD62L的阳性表达水平(即灰度单位)与淋巴结转移、脉管内癌栓、临床分期之间存在密切相关(P<0.05),与肿瘤体积、细胞分化程度、侵犯肺膜无关(P>0.05);MadCAM-1的阳性表达水平与淋巴结转移、脉管内癌栓、肿瘤体积存在明显相关(P<0.05),与细胞分化、侵犯肺膜、肿瘤分期无明显相关(P>0.05)。结论 CD62L及其受体MadCAM-1参与正常肺组织的淋巴细胞归巢和肺癌组织的淋巴结转移,并与肺癌的发展密切相关。
- 曹宝森李霞康剑云常茂叶张凡刘宝生王新生
- 关键词：CD62LMADCAM-1非小细胞肺癌淋巴结转移
- 七氟醚对老年大鼠认知功能及大脑额叶GABAR1和NMDAR2B表达的影响被引量：3
- 2018年
- 目的观察七氟醚对老年大鼠学习记忆能力的影响以及与脑右侧前额叶γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)表达变化的关系。方法雄性SD老年大鼠模型50只,随机分为对照组(C组,n=10)和实验组(T组,n=40)。C组吸入室温空气,实验组按3%浓度吸入七氟醚持续时间不同分为T1组(吸入2h)和T2组(吸入4h),C组全部,T1和T2组各取10只大鼠分别在麻醉后1天和7天进行Morris水迷宫实验,检测老年大鼠的空间学习记忆能力,采用定量RT-PCR技术和免疫荧光技术分别检测右侧前额叶GABAR1和NMDAR2B的mRNA转录水平和蛋白含量。结果与C组比较,吸入七氟醚第1天T1和T2组逃避潜伏期明显延长,空间探索穿越次数明显减少,GABAR1的mRNA表达量和蛋白含量明显上调,NMDAR2B的mRNA表达量和蛋白含量明显下调(P<0.05)。与C组比较,吸入七氟醚后第7天T2组逃避潜伏期明显延长,空间探索穿越次数明显减少,T2组GABAR1 mRNA表达量和蛋白含量明显上调,NMDAR2B的mRNA表达量和蛋白含量明显下调,且T2组GABAR1蛋白含量明显高于,NMDAR2B蛋白含量明显低于T1组(P<0.05)结论长时持续吸入七氟醚相较于短时持续吸入对空间学习记忆能力下降的影响较大,且持续影响时间较长。这种影响与脑额叶中GABAR1和NMDAR2B的表达变化相关。
- 杨晓楠李鹏涛赵梦张辉张晓丽王新生
- 关键词：七氟醚MORRIS水迷宫额叶
- 黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞的分化特点(英文)被引量：7
- 2009年
- 背景:黄芪提取物有较好的抗氧化、清除氧自由基的作用,加之骨髓间充质干细胞的多向分化潜能及其自体移植的优越性,可能为神经退行性疾病的治疗提供新的方式。目的:探讨黄芪诱导后大鼠骨髓间充质干细胞的分化特点。设计:细胞学体外观察。材料:清洁级6周龄雄性大鼠1只,购自中国医科院实验动物中心。黄芪注射液批号060105,为大理药业有限公司产品。方法:全骨髓法体外分离培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,传至第4代时,按4×108L-1密度接种于置有盖玻片的12孔板内,制备细胞爬片。盖玻片上细胞达80%～90%融合后全量换液,加入含200g/L黄芪注射液、体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养基连续诱导6d;对照组DMEM培养基中不加入黄芪注射液。主要观察指标:倒置显微镜观察诱导前后骨髓间充质干细胞的形态变化,诱导后免疫细胞化学染色鉴定特异性标志物的表达。结果:原代培养的骨髓间充质干细胞多呈圆形,扩增至第4代后细胞形态多呈梭形或成纤维细胞状,诱导后细胞形态发生改变,自胞体长出突起,随诱导时间延长,长出突起的细胞数量逐渐增多,部分突起末端呈分叉状,可见网络状连接。免疫细胞化学染色结果显示,诱导第3天巢蛋白阳性细胞、神经元特异性烯醇化酶阳性细胞和神经胶质纤维酸性蛋白阳性细胞较多,诱导第6天微管相关蛋白2阳性细胞较多。结论:黄芪首先诱导骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化,然后促进其向神经元或神经胶质细胞的非特异性分化,并能够使已分化细胞的进一步成熟、老化。
- 王新生赵荧李海峰张晓丽薄爱华
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经干细胞诱导分化
- CML的基因沉默与过继免疫治疗的研究进展被引量：1
- 2013年
- 慢性粒细胞白血病是一种造血干细胞的恶性克隆增殖性疾病,以分子生物学、免疫学、细胞生物学为基础的治疗手段成为新的研究方向。siRNA介导的基因沉默通过降解靶标mRNA,miRNA介导的基因沉默通过使靶mRNA失去稳定性以减少蛋白质的生成,从而提高靶向治疗药物的治疗效果。过继免疫治疗是通过将CIK、NK等免疫活性细胞注入肿瘤宿主体内,提高机体免疫力,与靶向治疗药物协同提升治疗效果。其理论基础、分子机制、临床疗效等还需进一步深入研究。
- 高炳华王新生
- 关键词：慢性粒细胞白血病基因沉默微RNAS
- 黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化早期胞内钙调蛋白mRNA的转录水平被引量：18
- 2009年
- 背景:黄芪可促进骨髓间充质干细胞向神经元方向分化,但对于诱导机制的报道较少,目前普遍认为诱导作用可能与其具有抗氧化功能有关。目的:观察黄芪注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化早期进程中细胞内钙调蛋白mRNA转录水平的变化。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-10/12在河北北方学院实验中心完成。材料:清洁级6周龄雄性大鼠1只,购自中国医科院实验动物中心。黄芪注射液为大理药业有限公司产品,批号060105。方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,传至第4代按4×105L-1密度接种于12孔板,加入含200g/L黄芪注射液、体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养基进行诱导分化,制备的细胞爬片行免疫细胞化学染色。传至第5代细胞平均分配到4个离心管内,1管为对照组,另外3管加入上述诱导培养基分别作用30,60,120min,消化获取的细胞采用RT-PCR技术检测钙调蛋白mRNA的转录水平。主要观察指标:黄芪对骨髓间充质干细胞的诱导作用,诱导后钙调蛋白mRNA的转录水平。结果:黄芪诱导5h后,可见少量细胞形态发生改变,胞体变圆,自胞体伸出细长突起,免疫细胞化学染色后可见巢蛋白阳性细胞和神经元特异性烯醇化酶阳性细胞,少量细胞呈微管相关蛋白2阳性,而神经胶质纤维酸性蛋白呈弱阳性。RT-PCR实验显示,在黄芪诱导骨髓间充质干细胞分化的早期,钙调蛋白基因进行了转录,随着诱导时间的延长,钙调蛋白mRNA的相对含量逐渐增加,诱导30,60,120min组与对照组钙调蛋白mRNA的相对含量比较差异有显著性意义(F=153.315,P=0.000)。结论:黄芪诱导骨髓间充质干细胞向神经元方向分化初期细胞内钙调蛋白转录水平上调,提示其诱导作用可能与钙调蛋白介导的信号转导途径有关。
- 王新生李海峰赵荧赵铁军张晓丽薄爱华
- 关键词：钙调蛋白
- hsa-miRNA-424-5p靶向GPR30对宫颈癌恶性生物学行为的影响被引量：2
- 2021年
- 目的探讨hsa-miRNA-424-5p(miR-424-5p)对宫颈癌恶性生物学行为的影响及机制。方法选取12例正常宫颈组织和33例宫颈癌组织;将宫颈癌HeLa细胞随机分为NCmimics组、mimics组、NCinhibitor组、inhibitor组,分别转染miR-424-5p模拟物阴性对照、模拟物、抑制物阴性对照、抑制物序列。采用实时荧光定量PCR检测宫颈癌组织中miR-424-5p及新型雌激素受体G蛋白偶联受体30(GPR30)mRNA表达及宫颈癌细胞转染效率;平板克隆形成实验检测克隆形成能力;Transwell小室测定细胞侵袭能力;AnnexinV-PE/7-AAD双染色法测算细胞凋亡率;双荧光素酶实验初步验证miR-424-5p与GPR30的靶向关系;Westernblotting法进一步证实miR-424-5p和GPR30的靶向关系并检测PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白。结果实时荧光定量PCR实验结果显示,宫颈癌组织较正常宫颈组织中miR-424-5p相对表达量减少,而GPR30 mRNA表达增加(P均<0.05)。转染24 h后,NCmimics组、mimics组、NCinhibitor组、inhibitor组miR-424-5p相对表达量分别为1.00±0.06、10.91±0.42、1.00±0.03、0.01±0.00,细胞克隆率分别为(36.87±0.35)%、(17.43±1.40)%、(14.67±0.65)%、(21.23±0.68)%,细胞侵袭数分别为(179±9)、(71±5)、(133±5)、(221±11)个,细胞凋亡率分别为(12.73±0.31)%、(18.00±1.65)%、(22.37±2.17)%、(15.77±1.88)%,GPR30蛋白表达分别为1.00±0.03、0.72±0.03、1.00±0.11、2.55±0.13,p-AKT/AKT分别为1.00±0.07、0.84±0.02、1.00±0.05、1.17±0.08,p-mTOR/mTOR分别为1.00±0.08、0.65±0.14、1.00±0.05、1.43±0.25,mimics组与NCmimics组相比,inhibitor组与NCinhibitor组相比,P均<0.01。双荧光素酶证实GPR30为miR-424-5p的直接靶基因。结论miR-424-5p在宫颈癌中发挥抑癌基因的作用,过表达miR-424-5p能够抑制宫颈癌细胞的克隆、侵袭,并促进细胞凋亡;miR-424-5p可能通过GPR30作用于PI3K/AKT/mTOR通路从而抑制宫颈癌的恶性生物学行为。
- 王佳佳丁佳常永霞王新生张斌刘训涛徐丹丹张凡
- 关键词：宫颈癌细胞克隆细胞侵袭
- 热刺激对慢粒细胞基因表达和超微结构的影响
- 高炳华王新生范凌袁晓飞张斌刘洁张晓丽孙黎刘华张艳超
- 课题通过CML细胞株-K562细胞株作为实验对象，经分别置于40℃、43℃、46℃恒温水浴箱中处理，30分钟后，离心收集各组细胞，采用RT-PCR技术和免疫印迹技术检测热休克蛋白gp96和Bcr/aBl融合基因、Casp...
- 关键词：
- 关键词：白血病热疗治疗
