王华
- 作品数：13 被引量：87H指数：4
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目“十二五”国家科技计划农村领域甘肃省农业科技创新项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 甘肃高山细毛羊DRB1基因内含子2微卫星多态性与生长速度的关联分析被引量：5
- 2016年
- 通过220只甘肃高山细毛羊生长性能测定、DNA测序验证、微卫星DNA多态性检测和相关性分析,研究了甘肃高山细毛羊DRB1基因内含子2微卫星多态性与生长性能的相关性。结果表明,甘肃高山细毛羊DRB1基因内含子2微卫星重复单位是由GT/GA组成的复合型微卫星座位。研究共检测到13个等位基因和40种基因型,等位基因201、195和193 bp是优势等位基因,201/201 bp是优势基因型。该微卫星座位多态信息含量为0.830,杂合度为0.847,属高度多态座位。相关性分析表明,183、191、207和197 bp等位基因对应的甘肃高山细毛羊群体出生体质量极显著高于165、219、195、213和203 bp等位基因群体(P<0.01),同时显著高于179、189、193和201 bp等位基因群体(P<0.05),含有179、189、193和201 bp等位基因的群体的出生重显著高于165、219、195、213和203 bp等位基因的群体(P<0.05)。就甘肃高山细毛羊1月龄、2月龄、3月龄和6月龄体质量综合考虑,含有197和207 bp等位基因群体的体质量较高,从甘肃高山细毛羊DRB1基因内含子2微卫星座位选择考虑,在选种时尽量保留含有197和207 bp等位基因的个体作为种用,将可能提高甘肃高山细毛羊的出生体质量和出栏体质量(6月龄体质量)。
- 成述儒王华樊庆山王欣荣张利平吴建平
- 关键词：甘肃高山细毛羊微卫星DNADRB1基因
- 牛源性无乳链球菌分离鉴定及cfb基因的克隆和真核表达载体的构建被引量：2
- 2014年
- 为研制奶牛乳房炎无乳链球菌的基因工程疫苗,采集隐性奶牛乳房炎奶样,利用THB(Todd-Hewitt Broth)固体选择培养基和色素试验,并结合无乳链球菌种属特异性基因cfb,采用PCR技术从隐性乳房炎奶样中分离和鉴定无乳链球菌。根据GenBank已报道的链球菌cfb基因序列,经ORF分析和B细胞表位预测,利用Primer 5.0软件设计cfb因子富含B细胞表位区域引物,添加酶切位点和真核表达元件,以分离株无乳链球菌的基因组为模板,PCR扩增cfb基因并连接T载体克隆测序,经测序确定无误后,连接pcDNATM3.1 V5-His A(pcDNA-cfb)真核载体,转化DH5α感受态细胞,提取重组质粒进行酶切和测序鉴定。结果显示,从89份隐性奶牛乳房炎奶样中分离得到8株无乳链球菌,成功构建了真核表达载体(pcDNA-cfb)。THB和色素试验初步筛选,可以作为快速分离无乳链球菌的一种方法,利用Bcepred和Lasergene-Protean软件对分离得到的无乳链球菌cfb基因序列分析,在所克隆的cfb基因序列内有多个优势抗原表位,因此,有望作为无乳链球菌基因工程疫苗研制的抗原靶标基因序列,为进一步研究其基因工程疫苗提供基础条件。
- 阚威王华马友记赵兴绪张勇
- 关键词：奶牛隐性乳房炎无乳链球菌
- 5个绵羊品种CAST基因多态性及其与肉品质的相关性被引量：4
- 2016年
- 为从分子水平研究甘肃境内典型养殖模式下甘肃高山细毛羊、小尾寒羊、藏羊、蒙古羊和滩羊5个绵羊品种的CAST基因多态性与肉品质的相关性,探讨以CAST为候选基因,提高绵羊肉品质的可能性。采用PCR-SSCP技术对5个绵羊品种的CAST基因内含子3多态性进行检测,并就CAST基因多态性与9月龄肉品质进行相关性分析。根据比对结果发现,与等位基因A相比,等位基因B发现G62T以及C110T突变,等位基因C发现C92T突变,形成AA、AB、BB和AC 4种基因型;经检验表明,5个绵羊品种均处于非Hardy-Weinberg平衡状态;群体遗传多态性分析表明,5个绵羊品种的多态信息含量均为中度多态;关联分析表明,5个绵羊品种CAST基因变异位点的4个基因型间失水率AC基因型显著高于其他基因型(P<0.05),对于剪切力AC基因型显著低于其他3种基因型(P<0.05);不同绵羊品种间基因型分析表明,对于5个绵羊品种AC基因型的失水率显著高于其他3种基因型,除蒙古羊外,AC基因型的剪切力显著低于其他基因型;变异对眼肌面积没有显著性影响。这些关联说明CAST基因可作为候选基因用于绵羊产肉性能和肉品质的分子标记辅助选择。
- 王华王建福王欣荣成述儒李晓梅王志明樊庆山富丽霞李双周晓霞
- 关键词：绵羊PCR-SSCPCAST基因肉质性状关联性分析
- 降钙素基因相关肽在牦牛附睾中的定位与表达被引量：1
- 2023年
- 【目的】分析降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在牦牛附睾中的转录水平及蛋白分布特点,探究其对精子运输及成熟的功能。【方法】采集6头3~4岁健康成年牦牛的附睾,将其解剖为头、体、尾三部分,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting分别检测CGRP mRNA和蛋白在附睾的头、体、尾中的表达水平;采用H.E染色法分析附睾组织结构特点;采用免疫组化和免疫荧光技术分析附睾各部分CGRP的分布及表达情况。【结果】RT-qPCR结果表明,CGRP在牦牛附睾头的相对表达量显著高于附睾体和附睾尾(P<0.05),附睾尾表达量最低(P<0.05);Western blotting检测结果表明,CGRP蛋白水平在附睾尾中的表达水平显著高于附睾头和附睾体(P<0.05)。显微镜下观察表明,牦牛附睾组织纤毛长度从头部至尾部逐渐降低,差异显著;附睾头间质组织的间质平滑肌层厚度显著低于附睾体和附睾尾(P<0.05);基细胞和晕细胞在附睾尾分布显著,上皮厚度亦在附睾尾显著降低。免疫组化及免疫荧光分析发现,CGRP主要分布于附睾上皮、基底膜及附睾间质小血管,附睾上皮晕细胞的表达强度最高。【结论】CGRP主要分布于牦牛附睾上皮和间质小血管,提示CGRP对牦牛附睾间质小血管的收缩发挥调节作用。牦牛附睾尾晕细胞数量最多,晕细胞中CGRP的高强度表达提示其可能参与附睾尾的免疫调节。
- 陈少宇袁莉刚杨大鹏王华张勇
- 关键词：牦牛附睾
- 甘肃高山细毛羊体重与体尺指标的相关性研究被引量：41
- 2016年
- 采用SPSS 19.0软件对甘肃高山细毛羊体重与体尺指标进行相关性分析、通径分析、逐步回归分析,并对其相关系数进行分解。通过对体重与体尺指标的逐步回归分析,得出了体重与体尺指标之间的最优回归模型。结果表明:体高(X_1)、体长(X_2)、胸围(X_3)、胸深(X_4)均对甘肃高山细毛羊体重产生极显著影响(P<0.01),对体重(Y)的相关系数分别为:0.766,0.837,0.834,0.801。体长(X_2)、胸围(X_3)指标均通过直接作用和间接作用对体重(Y)产生影响,而体高(X_1)、胸深(X_4)则主要通过辅助其他性状对体重(Y)产生间接作用。甘肃高山细毛羊体尺指标(X_i)对体重(Y)的最优回归方程:Y=-43.851+0.425X_2+0.587X_3。估测值与实测值之间的相关程度为0.914,决定系数R^2为0.836,拟合程度较高。
- 王志明王婕姝王毅韩向敏王华
- 关键词：甘肃高山细毛羊体重体尺通径分析
- 牛源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及ClfA基因的克隆和真核表达载体的构建被引量：1
- 2015年
- 以研制安全有效的奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗为目的,采集380份隐性和临床型乳房炎奶样,经高盐肉汤、过氧化氢酶、甘露醇发酵、三糖铁发酵试验以及Baird-Parker平板对金黄色葡萄球菌进行分离和生化鉴定,PCR扩增分离株凝集因子基因(Clf A)并连接TA克隆载体。经测序确定无误后,连接pc DNA3.1His B以构建真核表达载体pc DNA 3.1His B-Clf A,转化Trans T1TM感受态细胞,HindⅢ和XhoⅠ双酶切分析,同时进行测序和序列分析。结果显示,通过高盐肉汤、过氧化氢酶、甘露醇、三糖铁试验和Baird-Parker平板从380份隐性及临床型奶牛乳房炎奶样中共分离到35株金黄色葡萄球菌,成功构建了真核表达载体(pc DNA3.1His B-Clf A),为研制金黄色葡萄球菌基因工程疫苗奠定基础。
- 王华阚威侯书宝武小虎董翔宸马友记胡俊杰张勇赵兴绪
- 关键词：奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌
- 秸秆颗粒饲料冬春补饲对甘肃‘高山细毛羊’生长性能和血液生化指标的影响被引量：8
- 2016年
- 【目的】为了研究甘肃‘高山细毛羊’在冬春季节放牧条件下,补饲不同种类、不同添加比例的玉米秸秆制成的颗粒料对羔羊生长性能及血液指标的影响.【方法】选取3月龄母羊30只,随机分为5个组,每组6个重复,分别在归牧后补饲0.5kg不同组成及比例的5种饲料.【结果】1、试验Ⅱ组ADG显著高于试验I组(P<0.05),试验Ⅳ组ADG最高,显著高于试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组(P<0.05);2、试验Ⅱ组体高、胸围增长值显著高于试验I组(P<0.05),试验Ⅳ组体高增长值最高,显著高于试验Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),与试验Ⅴ组相比差异不显著(P>0.05);试验Ⅳ组胸围增长值最大,显著高于试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组(P<0.05);3、试验Ⅱ组血清TP含量显著高于试验I组(P<0.05),试验Ⅳ组血清TP含量最高,显著高于试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组(P<0.05).【结论】由此可知,冬春季节对‘甘肃高山细毛羊’补饲颗粒饲料能够取得较好的生长效果,粗料中不同大豆秸秆玉米秸秆比例对羊只血清指标具有显著影响,大豆秸秆玉米秸秆最适比例为1∶1.
- 王志明王婕姝王毅韩向敏王华王卫林
- 关键词：补饲血清指标
- 几种药用植物浸提物抑制真菌活性的研究被引量：2
- 2013年
- 以仁果丛梗孢(Monilia fructigena)、串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)、瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、致病疫霉(Phytophthora infestans)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)为供试菌,采用生长速率法和液体培养法对丹参、黄岑、半夏、仙人掌、蒲公英、荆条6种药用植物浸提物的离体活性进行测定.结果表明:3种溶剂中,丙酮粗提物的抑菌活性最高,平均抑菌率达72.9%.在生药浓度为0.1g/mL时,丹参对6种供试菌种均有抑制作用,尤其对仁果丛梗孢(M.fructigena)有明显的抑制作用,其菌落的生长抑制率和菌丝生长的抑制率分别可达87.1%和100%,其余5种药用植物粗提物对6种供试菌种的抑制作用均不明显.
- 王静王静呼丽萍王廷璞王刚锋
- 关键词：药用植物提取物真菌抑菌作用
- 绵羊PRKAG3基因SNPs与肉质性状的相关性分析被引量：3
- 2016年
- 为从分子水平研究甘肃境内典型养殖模式下甘肃高山细毛羊、小尾寒羊、藏羊、蒙古羊和滩羊5个绵羊品种的PRKAG3基因多态性与屠宰性能和肉品质的相关性,探讨以PRKAG3为候选基因,提高绵羊屠宰性能和肉品质的可能性。采用PCR-SSCP技术对5个绵羊品种的PRKAG3基因外显子4,5和内含子4多态性进行检测,并就PRKAG3基因多态性与9月龄屠宰性能和肉品质进行相关性分析。结果表明,在PRKAG3基因2 689 bp处发生了A>G的突变,位于第4内含子第23 bp处,表现出3种基因型,AA、AB和BB。纯合度(Ho)分别为0.67,0.69,0.76,0.69,0.59,杂合度(He)分别为0.333 3,0.306 1,0.244 9,0.307 7,0.408 2,有效等位基因(Ne)分别为1.62,1.66,1.69,1.48,1.79,多态信息含量(PIC)分别为0.31,0.32,0.33,0.27,0.34。除藏羊外其他4个绵羊品种均处于Hardy-Weinberg平衡状态。关联分析表明,5个绵羊品种PRKAG3基因此变异位点的3个基因型间失水率性状差异显著(P<0.05);BB基因型个体的胴体重显著高于AA型(P<0.05),滩羊为极显著(P<0.01),BB基因型个体的眼肌面积显著大于AA型(P<0.05)(藏羊除外)。因此说明PRKAG3基因可作为候选基因用于绵羊产肉性能和肉品质的分子标记辅助选择。
- 王华魏玉兵童建伟张明军王建福王欣荣成述儒
- 关键词：绵羊PCR-SSCPPRKAG3基因肉质性状关联性分析
- 辣椒黑斑病菌的室内防效测定被引量：16
- 2002年
- 采用培养皿滤纸抑菌圈法测定两种杀虫剂对辣椒黑斑病(病原Alternaria alternata)抑菌能力的大小。试验采用75 %百菌清wp和72 % 菌无净wp,它们的毒力回归方程式分别是:()()8899.06482.58347.12,8958.08685.52966.13=+-==+-=rxyrxyjc,x和y呈正相关,其相对毒力分别是:49.14=cy,304.9=jy。由此可见这两种杀虫剂的抑菌能力为百菌清>菌无净。
- 李敏权陈天仁王华薛莉
- 关键词：辣椒黑斑病链格孢百菌清
