王亚娟
- 作品数：6 被引量：43H指数：2
- 供职机构：贵州大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技厅重大专项贵阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 枯草芽孢杆菌BJ3-2 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因speD的克隆与序列分析
- 2015年
- S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)是多胺合成过程中的限速酶。根据Gen Bank中枯草芽孢杆菌168菌株的S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因(spe D)序列设计同源引物,PCR扩增Bacillus subtilis BJ3-2g DNA,并克隆至p GEM-T载体后测序。序列分析结果表明:B.subtilis BJ3-2 spe D基因ORF为381 bp,可编码126个氨基酸,分子质量为13.87 ku,基因登录号为KJ561347,Blast比对,SAMDC基因和蛋白序列的同源性都达到90%以上。B.subtilis BJ3-2的SAMDC具有丙酮酸依赖型脱羧酶的酶原剪切结构域[GVSGVVIISESHLTIH]和保守结构域[TCG],属于典型的I类B型SAMDC家族。SAMDC在多胺生物合成过程中扮演重要的角色,是多胺合成途径中的关键酶。研究为控制发酵豆豉中生物胺含量奠定了基础。
- 王亚娟韩忠安罗信旭吴拥军
- 关键词：枯草芽孢杆菌S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因克隆
- 高活性谷氨酰胺酶基因glsA_2在枯草芽孢杆菌BJ3-2染色体上的定点整合被引量：2
- 2014年
- 以枯草芽孢杆菌BJ3-2的glsA1基因为同源序列,通过构建单交换整合载体,将高活性谷氨酰胺酶基因glsA2定点整合入BJ3-2菌株染色体中,获得能够稳定遗传的重组菌株BJ3-2A2。经检测重组菌株谷氨酰胺酶活力为BJ3-2菌株的3.36倍。利用重组菌株BJ3-2A2发酵豆豉,全氨基酸检测显示,重组菌株发酵的豆豉谷氨酸含量比出发菌株高12.8%。说明枯草芽孢杆菌BJ3-2可以转化且为RecE+菌株,glsA2基因在BJ3-2菌株染色体上可实现较高活性表达,并提高发酵豆豉的鲜味。
- 卢彪吴拥军刘艳敏王亚娟唐雪
- 关键词：枯草芽孢杆菌同源重组
- 贵州油辣椒挥发性风味物质分析被引量：39
- 2013年
- 采用固相微萃取法,结合气相色谱-质谱分析技术,对8种不同油辣椒进行挥发性风味化合物检测分析。结果表明:8种油辣椒共检测出10类40种挥发性化合物。主成分分析(PCA)显示,油辣椒的主效风味物质是萜烯类和酯类,萜烯类中相对含量较高的有柠檬烯、β-月桂烯、桧烯、罗勒烯;酯类物质以乙酸芳樟酯为代表;油辣椒的特征风味物质为3-甲基丁醛、2-甲基丁醛和甲硫基丙醛。此外,2-乙酰呋喃、2-乙基呋喃、2,5-二甲基吡嗪、甲基吡嗪也对油辣椒香气贡献较大,这些物质成分在油辣椒呈味中起着互补或协调的作用。油辣椒的风味与油辣椒风味物质的种类和含量相关,同时风味物质的形成受加工工艺的影响。
- 刘艳敏吴拥军王亚娟唐雪
- 关键词：油辣椒固相微萃取气相色谱-质谱风味化合物
- 枯草芽孢杆菌精氨酸脱羧酶基因speA的表达与蛋白纯化被引量：1
- 2017年
- 根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2的精氨酸脱羧酶(ADC)的编码基因spe A序列设计特异性酶切引物,克隆基因speA序列。测序结果显示,基因speA全长为1473 bp,编码490个氨基酸,分子质量为58 ku。基因spe A克隆至原核表达载体,获得重组菌pET28a-spe A/BL21,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,1.0 mmol/L的异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)28℃诱导4 h,上清液和菌体均能表达出ADC蛋白,上清液经纯化、透析、冷冻干燥可获得纯度97%的ADC酶,酶联免疫吸附检测(ELISA)ADC酶活为16780 U/mg。为speA基因的表达、纯化及酶学性质研究奠定了理论基础。
- 曹宁王亚娟钟杰佟硕秋吴拥军
- 关键词：枯草芽孢杆菌纯化
- 枯草芽孢杆菌基因的安全改良研究被引量：1
- 2014年
- 为了构建能稳定表达外源基因且无抗性标记基因的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)工程菌。采用聚合酶链式反应(PCR)技术,分两段扩增定位于B.subtilis BJ3-2染色体上的谷氨酰胺酶基因(glsA)上下游基因片段作为同源臂。将同源臂及卡那霉素基因(Kan)克隆入温敏型载体pKSV7,构建了双交换载体pKUKD。并利用pKUKD质粒将kan基因定点整合入BJ3-2染色体上,通过Kan抗性筛选获得glsA敲除菌株BJ-kan。经检测BJ3-2菌株谷氨酰胺酶活力比重组菌株高3.2倍。结果显示:BJ3-2染色体上的基因可通过同源重组方式进行敲除与置换,为今后BJ3-2菌株以及野生型B.subtilis基因敲除与置换提供了更加便捷的方法。
- 沈玺龙蔡传斌王亚娟卢彪吴拥军
- 关键词：枯草芽孢杆菌谷氨酰胺酶卡那霉素
- 贵州油辣椒加工品质稳定性研究被引量：2
- 2013年
- 为提高企业生产加工的油辣椒在常规储藏条件下的品质稳定性,对储藏过程中油辣椒样品感官性质、顶空氧含量、酸价、过氧化值和色价等变化规律进行了研究。结果表明:在室温、避光、干燥的条件下,随着储藏时间的延长,油辣椒的感官特性无异常变化;顶空氧含量与色价有所降低,酸价增加,最大变化值为1.07mg(KOH)/g;而过氧化值总体上呈先上升后减小的趋势。同时,在储藏过程中油辣椒品质稳定性受季节性温度和顶空氧含量影响较大。因此,低氧、低温条件和储藏时间为10个月内更有利于保持油辣椒品质的稳定性和营养价值。
- 刘艳敏吴拥军王亚娟唐雪
- 关键词：油辣椒储藏
