王书伟
- 作品数：27 被引量：59H指数：7
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- 相关领域：医药卫生政治法律生物学农业科学更多>>
- 血清不耐热物质对噬菌体PL39杀灭铜绿假单胞菌的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察人血清和鼠血清中不耐热物质对噬菌体PL39杀灭不同克隆铜绿假单胞菌的影响。方法采用双层平板法筛选PL39敏感宿主菌;根据ERIC-PCR图谱分析敏感宿主菌的遗传差异性。分别添加新鲜及热灭活人血清和鼠血清,观察其对PL39杀灭不同敏感宿的影响。结果筛选到9株PL39敏感宿主菌,其中2株菌ERIC指纹图谱无明显不同,其他菌株的指纹图谱明显不同。9株菌均能完全抵抗人血清和鼠血清的溶菌作用;噬菌体PL39在两种血清中均能保持恒定的成斑活性,但在人血清中对9株宿主菌的杀灭作用均被抑制;在小鼠血清中,PL39对L39菌有一定杀灭作用,对其他宿主菌无杀灭作用;两种血清热灭活(56℃,30min)后对PL39杀灭不同宿主菌作用无显著影响,与营养肉汤中的PL39杀菌作用相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论人血清和鼠血清中的不耐热物质均可影响噬菌体PL39对其宿主菌的杀灭作用。
- 李亚辉李振江靳静王山梅张改王书伟陈松建王小亭
- 关键词：铜绿假单胞菌噬菌体人血清小鼠血清
- 噬菌体PF23生物学特性及其对小鼠肺炎克雷伯菌全身感染疗效观察被引量：2
- 2016年
- 目的了解肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体PF23的生物学特性,观察其对小鼠全身感染的疗效。方法电镜观察噬菌体PF23的形态,一步生长曲线以及对温度和pH的敏感性;提取噬菌体基因组,酶切法鉴定其核酸类型,并初步估算其基因组大小;建立小鼠全身感染模型,观察PF23的治疗效果。结果 PF23的噬菌斑为有晕清晰透明圆斑,直径约2mm;电镜观察PF23具有尾噬菌体目,长尾病毒科病毒的形态特征;其在〈50℃的温度下及pH 4～9范围内稳定性好。一步生长曲线显示其潜伏期约为11min,裂解量约为41PFU/细胞。其基因组核酸不能被双链DNA限制性内切酶KpnI、EcoRI和HindIII切开,但能被BamHI切开,且酶片段大小合计〉27kb。用PF23治疗由其宿主菌所致全身感染小鼠,小鼠的生存期均〉2d,7d存活率为37.5%;未治疗对照组小鼠1d内均死亡。结论肺炎克雷伯菌的噬菌体PF23潜伏期短,有较好的热稳定性和酸碱稳定性,治疗小鼠肺炎克雷伯菌全身感染效果显著,值得进一步研究。
- 王书伟黄德海靳静王山梅陈松建李振江张改李亚辉王小亭王中全
- 关键词：肺炎克雷伯菌噬菌体生物学特性全身感染
- 粘质沙雷菌毒性噬菌体PS4的生物学特性及其在小鼠血清中的杀菌作用研究被引量：9
- 2015年
- 目的研究粘质沙雷菌毒性噬菌体PS4的生物学特性及其在小鼠血清中的抗菌活性。方法观察PS4的噬菌斑及电镜下形态;测定PS4的噬菌谱、生长曲线及其理化稳定性,PS4在营养肉汤培养基、新鲜小鼠血清和灭活小鼠血清中的杀菌作用,以及小鼠血清中影响PS4杀菌能力影响因素。结果 PS4为长尾型噬菌体,在以粘质沙雷菌临床株S4为指示菌时,PS4可形成直径为1-1.5mm完全透明噬菌斑,其感染S4的潜伏期为10min,暴发量约为100PFU/cell,且S4对PS4的抗性突变率仅为10-7。PS4在pH 5-10的环境中具有较好的稳定性,在50℃的环境中仍能长时间保持活力。PS4在新鲜未灭活血清中对S4不具杀菌能力,但在56℃热灭活30min的鼠血清中以及在营养肉汤中的杀菌率均达99.99%,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PS4具有一定的酸碱稳定性和热稳定性,有望用于医院环境＂消毒＂,以减少多重耐药粘质沙雷菌所致的院内感染的发生。但因其杀菌作用受血清中不耐热成分的严重干扰,故不能用于治疗由S4引起的小鼠全身感染。
- 靳静张改李振江王书伟陈松建黄德海李亚辉王小亭王中全
- 关键词：粘质沙雷氏菌噬菌体生物学特性抗菌活性
- 鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp12的克隆表达及ZZ1 RBP受体性质鉴定
- 2023年
- 目的 为进一步了解噬菌体与宿主菌之间的相互作用机制,对鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1短尾丝蛋白gp12进行克隆表达并对ZZ1 RBP吸附受体进行鉴定。方法 原核表达噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp12,根据分子质量、抗原性以及对ZZ1吸附竞争干扰的功能等对表达的重组受体结合蛋白gp12进行鉴定。分别用细菌膜蛋白提取试剂盒和细菌脂多糖提取试剂盒提取鲍曼不动杆菌表面OMP和LPS,采用ELISA的方法对噬菌体ZZ1作用受体性质进行鉴定。分别用蛋白酶K和高碘酸盐对AB09V菌进行处理以破坏细菌表面的蛋白质和LPS,观察噬菌体ZZ1对两种方法处理AB09V菌的吸附效率。结果 PCR扩增ZZ1gp12基因后,成功诱导表达了含6×His标签的ZZ1重组受体结合蛋白gp12,SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量约为55 ku;使用0.5 mmol/L IPTG诱导4h,蛋白表达基本趋于稳定;Western blot显示纯化蛋白可分别被his标签抗体和小鼠抗ZZ1多克隆抗体识别;竞争吸附试验显示,在ZZ1重组gp12蛋白存在的情况下,ZZ1对鲍曼不动杆菌AB09V的吸附效率与对照组的63.5%相比下降42.4%;当ZZ1重组gp37蛋白和ZZ1重组gp12蛋白均存在的情况下,ZZ1对鲍曼不动杆菌AB09V的吸附率下降55.8%。ELISA和进一步验证试验显示ZZ1重组受体结合蛋白均吸附宿主菌AB09V菌表面的LPS。结论 成功表达了噬菌体ZZ1重组受体结合蛋白gp12,ZZ1重组gp37蛋白和ZZ1重组gp12蛋白均吸附宿主菌AB09V表面的LPS。
- 王小亭王小亭张改张改王书伟李振江陈松建李亚辉李亚辉王山梅
- 关键词：鲍曼不动杆菌噬菌体
- PCR检测感染早期小鼠血液中旋毛虫幼虫的研究
- 2009年
- 为了研究PCR检测感染小鼠血液中旋毛虫DNA的敏感性,应用旋毛虫1.6kb重复序列为扩增靶序列对旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)和南方旋毛虫(T7)肌幼虫DNA进行PCR扩增,并检测小鼠感染20、100、300条T1肌幼虫后不同时间的外周血。结果表明,T1、T4和T7肌幼虫可扩增出特异性目的条带(510bp),而T2和T3无扩增产物;1、0.04和0.02条T1、T4和T7肌幼虫均能扩增到清晰的目的条带(510bp)。20条幼虫感染小鼠后5d～6d,PCR阳性率均为7.69%;100条幼虫感染小鼠后5d～12d可检出旋毛虫DNA,其中感染后5d～7d的阳性率分别为30.77%、38.46%及30.77%;300条幼虫感染小鼠后5d～15d可检出旋毛虫DNA,感染后7d的阳性率为61.54%,感染后6d与8d～10d的阳性率均为53.85%。3组旋毛虫感染小鼠PCR阳性率间的差异有统计学意义(p<0.01),PCR阳性率随感染剂量的增加而升高(p<0.01),100条与300条感染小鼠感染后不同时间的PCR阳性率与检测时间有相关性(p<0.01)。以上实验结果表明PCR检测感染小鼠血液中旋毛虫DNA的敏感性与感染程度和检测时间有关,对感染早期旋毛虫抗体阴性宿主有一定诊断价值。
- 李峰王中全崔晶王书伟李楠
- 关键词：旋毛虫PCR
- 肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体PhF168的生物学特性及其对重症败血症小鼠疗效的初步研究被引量：4
- 2016年
- 目的明确肺炎克雷伯菌噬菌体PhF168的生物学特性及其对小鼠重症败血症的疗效。方法电镜观察PhF168的形态,调查其噬菌谱并研究其一步生长曲线、温度和酸碱稳定性等生物学特性;提取PhF168的基因组,酶切鉴定其核酸类型,并初步估算其基因组的大小;建立小鼠重症败血症感染模型,观察PhF168治疗效果。结果 PhF168可在宿主菌F168上形成直径3～5mm、完全透明并带有较宽晕环的噬菌斑,为裂解性噬菌体。电镜下其颗粒呈有尾噬菌体目长尾噬菌体科的形态特征。PhF168的基因组为dsDNA,〉40kb,含有EcoRⅠ和BamHⅠ限制性内切酶切位点。PhF168在宿主菌F168中的潜伏期为15min,裂解量为（64±5）PFU/细胞,在pH 4～9和〈50℃下具良好稳定性。用PhF168治疗由其宿主菌F168感染所致的重症败血症小鼠,所有小鼠的生存期均在3d以上,7d存活率达40%。未治疗对照组小鼠1d内全部死亡。结论 PhF168杀菌作用高效,具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,治疗宿主菌引起的小鼠重症败血症疗效显著,可作为治疗细菌感染的噬菌体候选株。
- 李振江黄德海靳静王山梅王书伟张改陈松建王进
- 关键词：噬菌体肺炎克雷伯菌生物学特性败血症
- 噬菌体LH-01治疗不同宿主菌所致小鼠致死性败血症影响因素研究被引量：9
- 2015年
- 目的观察肺炎克雷伯菌噬菌体LH-01治疗不同宿主菌所致小鼠败血症的效果,分析影响疗效因素,探索评价噬菌体疗效的方法。方法通过比较噬菌斑和成斑率,从9株LH-01宿主菌中选择对其敏感性较强的菌株。尾静脉注射绝对致死量的不同敏感菌致小鼠败血症,2h后通过尾静脉注射LH-01治疗并观察其疗效。比较LH-01在小鼠新鲜血清、补体热灭活血清,以及在标准补体溶血活性由低至高的溶液中对敏感菌的杀灭能力,明确引起LH-01对不同敏感菌感染组小鼠疗效差异的因素。结果 9株宿主菌中KP6、KP13、KP16和KP22在营养肉汤中对LH-01最为敏感。当小鼠全身感染致死量的这4种细菌后,LH-01的治疗可使KP6感染组小鼠生存率达90%(9/10),KP13组为30%(3/10),而KP16组和KP22组小鼠全部死亡。体外试验显示,除LH-01对KP6的作用不受补体影响外,LH-01对其余3株菌的杀灭作用均受补体影响,其中25U/ml的补体活性即可完全抑制LH-01对KP16和KP22的杀灭作用,而完全抑制对KP13的杀灭作用所需的补体活性≥50U/ml。结论补体是影响LH-01治疗小鼠肺炎克雷伯菌感染疗效的最主要原因。血清中噬菌体对致病菌的杀菌力和补体干扰杀菌的程度有助于预测噬菌体疗效,指导细菌感染的噬菌体治疗。
- 靳静李振江黄德海张改陈松建王书伟李亚辉王小亭王中全
- 关键词：肺炎克雷伯菌全身感染补体系统
- 肉类中旋毛虫成囊前期幼虫的检疫方法
- 本发明公开了一种肉类中旋毛虫成囊前期幼虫的检疫方法，1、从待检动物胴体的不同部位采集肉样，置4℃预冷；2、将漏斗下端连接软管，用夹子将其末端夹紧；取医用纱布块平铺漏斗中，用生理盐水浸没纱布块；3、将漏斗下部插入37℃水浴...
- 王中全崔晶姜鹏王烨张玺王莉李峰王书伟
- 文献传递
- 曼氏裂头蚴感染小鼠血清IgG抗体动态变化被引量：3
- 2010年
- 目的观察小鼠实验感染曼氏裂头蚴后不同时间血清IgG抗体水平的变化。方法 40只小鼠随机分为5组,每组8只,1-5组小鼠采集尾静脉血后分别经口感染裂头蚴1、2、4、6及8条。感染后1周开始每周尾静脉采血,分离血清,至感染后18周。应用裂头蚴排泄分泌（excretory-secretory,ES）抗原ELISA检测血清中抗裂头蚴IgG抗体水平。结果 2条裂头蚴感染小鼠感染后2周的血清抗体阳性率为87.5%（7/8）,感染后3周升至100%（8/8）;1、4、6及8条裂头蚴感染小鼠感染后2周抗体阳性率即达100%（8/8）。5组小鼠均是在感染2~4周后血清抗体水平快速升高,感染后5~7周达峰值,之后抗体水平稍有下降,至感染后第18周抗体阳性率仍均为100%。5组小鼠感染裂头蚴后1~18周血清抗体水平间的差异有统计学意义（F=245.296,P〈0.05）,且抗体水平随感染剂量的增加而升高。结论小鼠感染不同剂量裂头蚴后2周即可检出血清抗裂头蚴抗体,ES抗原ELISA对不同感染度小鼠均有早期诊断价值。
- 李楠崔晶王书伟李旭旭王莉姜鹏蔺西萌王中全
- 关键词：裂头蚴裂头蚴病ELISA排泄分泌抗原小鼠
- 全面建成小康社会面临的问题与对策
- 全面建成小康社会是实现中华民族伟大复兴历史进程中的重要里程碑，是实现“两个一百年”奋斗目标第一阶段的基本目标。回顾过去，全面建设小康社会已是卓有成效，在未来的三年内，我们进入全面建成小康社会的关键时期，能否成功的全面建成...
- 王书伟
- 关键词：社会主义建设小康社会经济结构文化建设
