涂平华
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局中医药科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 焦脱镁叶绿酸-a甲酯介导的光动力疗法诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡的研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人骨肉瘤MG63细胞凋亡的影响及其作用机制。方法取对数生长期人骨肉瘤MG63细胞分为4组,分别为空白对照组(对照组)、单纯MPPa药物组(MPPa组)、单纯光照组(LED组)以及MPPa-PDT实验组(MPPa-PDT组)。MPPa-PDT组和MPPa组于避光条件下加入MPPa(0.75μmol/L),对照组及LED组加入等量完全培养基;避光孵育20 h后,LED组及MPPa-PDT组细胞接受集成LED特种光源照射120 s(剂量为4.8 J/cm2)。光照结束后,于避光条件下继续培养,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察内质网形态变化,Hoechst33258染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内钙离子水平,Western blot检测p-PERK、内质网源性转录因子(C/EBP homologous protein,CHOP)、活化半胱氨酸蛋白酶12(cleavedCaspase-12)表达水平。结果 MPPa-PDT组倒置相差显微镜下见细胞明显回缩变圆;Hoechst33258染色示细胞核固缩、碎裂等典型凋亡形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率为48.76%±3.54%,明显高于对照组5.04%±0.41%、MPPa组5.33%±0.38%及LED组6.48%±0.46%(P<0.05);细胞内钙离子水平为485.29±58.77,显著高于对照组(97.24±4.77)、MPPa组(97.95±6.30)、LED组(101.17±5.26)(P<0.05);透射电镜下见细胞内质网明显肿胀;Western blot检测示p-PERK、CHOP、cleaved-Caspase-12相对表达量分别于培养1、3、6 h后明显高于其他3组(P<0.05)。对照组、MPPa组及LED组细胞无显著凋亡形态改变和内质网形态改变,上述检测指标组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MPPa-PDT可诱导人骨肉瘤MG63细胞发生凋亡,且内质网应激通路参与了MPPa-PDT诱导细胞凋亡的过程。
- 陶勇黄秋欧云生尹航陈艳阳涂平华
- 关键词：光动力疗法骨肉瘤细胞凋亡
- PI3K/Akt信号转导通路与椎间盘退行性变的关系研究进展
- 2013年
- 磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路参与调控细胞代谢、增殖、分化和凋亡。研究表明,椎间盘细胞数量减少、基质降解在椎间盘退行性变过程中起着关键作用。PI3K/Akt信号途径通过介导上调基质蛋白多糖的表达、促进椎间盘细胞的增殖和抑制椎间盘细胞的凋亡等,对延缓椎间盘退行性变进程起着重要作用。因此,对PI3K/Akt信号通路作用的分子机制深入研究,有助于对椎间盘退行性变发病机制的理解和寻找有效的干预措施。
- 涂平华欧云生
- 关键词：磷脂酰肌醇3-激酶椎间盘退行性变信号通路
- 芦荟大黄素介导的光动力诱导骨肉瘤MG63细胞自噬被引量：5
- 2014年
- 目的探讨芦荟大黄素(aloe emodin,AE)介导的光动力(aloe emodin-photodynamic therapy,AE-PDT)诱导骨肉瘤MG63细胞产生自噬,并探讨自噬和凋亡的关系。方法将细胞分为AE-PDT对照组(Control组、AE组、LED组)和AE-PDT实验组。AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后,采用CCK-8法检测细胞活性,2’,7’-二氯荧光二乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)荧光检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞的自噬小体,透射电镜观察细胞的自噬体,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1的表达。结果 AE-PDT能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的活性,且其抑制作用呈芦荟大黄素浓度-光动力能量剂量依赖性。AE-PDT实验组细胞内ROS水平和自噬小体均较3个对照组增高;透射电镜下可见典型自噬体;AE-PDT能诱导细胞产生自噬和凋亡,3-甲基腺嘌呤抑制自噬后能增加细胞的凋亡率(P<0.05);Western印迹检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1/β-actin的表达高于阴性对照组。结论 AE-PDT能诱导骨肉瘤MG63细胞产生自噬。AE-PDT作用早期,自噬能延缓凋亡的发生可能起保护性作用。
- 涂平华李开庭陈青欧云生白定群
- 关键词：芦荟大黄素光动力疗法骨肉瘤自噬
- MPPa-PDT诱导人骨巨细胞瘤细胞自噬被引量：4
- 2015年
- 目的探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯介导的光动力疗法(MPPa-PDT)对人骨巨细胞瘤SGC-0404细胞自噬的影响,研究自噬与凋亡的关系。方法 SGC-0404细胞经MPPa-PDT处理后采用Hochest33258染色观察细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色和透射电镜观察细胞内自噬体的形成,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白的表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 MPPa-PDT处理SGC-0404细胞以后,Hochest33258染色可观察到细胞核固缩、核碎裂等典型凋亡形态学改变;DCFH-DA染色结果显示MPPa-PDT组细胞内ROS水平分别是对照组、MPPa药物组、LED光照组的21.07、18.68倍和19.66倍(P<0.05);MDC染色及透射电镜下可见细胞内有典型自噬体形成;Western blot检测结果则显示LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白的表达明显高于各对照组(P<0.05);流式细胞仪检测发现经3-MA抑制自噬后MPPa-PDT所致的细胞凋亡率明显升高[(27.69±2.23)%vs(43.17±2.87)%,P<0.05]。结论MPPa-PDT能诱导SGC-0404细胞发生凋亡与自噬;自噬在MPPa-PDT作用的早期可以延缓凋亡的发生,具有抗凋亡的保护作用。
- 黄秋涂平华欧云生刘渤陶勇尹航
- 关键词：光动力疗法骨巨细胞瘤自噬
- 芦荟大黄素介导的光动力疗法通过ROS-JNK通路诱导人骨肉瘤MG63细胞
- 目的：探讨芦荟大黄素(AE)介导的光动力疗法(AE-PDT)对人骨肉瘤MG63细胞活性的影响及其机制。方法：AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后,采用CCK-8法检测细胞活性的变化,DCFH-DA染色流式细胞术检测细...
- 涂平华黄秋欧云生李开庭陶勇尹航赵增辉
- 关键词：芦荟大黄素光动力骨肉瘤
- 单侧椎弓根入路减压椎间融合治疗Denis B型胸腰椎爆裂性骨折被引量：8
- 2015年
- 目的探讨经单侧椎弓根入路减压、椎体间植骨融合内固定术治疗Denis B型胸腰椎爆裂性骨折的临床疗效。方法回顾性分析2008年4月-2011年1月采用经单侧椎弓根入路减压、椎体间植骨融合内固定术治疗12例Denis B型胸腰椎爆裂性骨折的患者,男8例,女4例;年龄20-55岁,平均35.5岁。通过比较术前、术后即刻及末次随访时的X线、CT片及神经学检查,观察骨折复位、植骨融合、神经功能恢复、矫正丢失、腰椎活动度及相邻节段椎间盘退变等情况来评估临床疗效。结果本组患者手术时间150-200min,平均160 min。出血量200-700 ml,平均450ml。术后随访时间12-36个月,平均21.5个月。所有患者伤椎均获得满意复位,术后随访3-6月时椎间植骨均达到骨性融合,随访中重建的椎体高度无丢失,神经功能获得1-2级恢复,平均提高1.5级。无内固定松动、断裂或者钛笼下沉等并发症,患者未出现顽固性腰痛,腰椎活动度好,邻近节段椎间盘未见明显退变征象。结论选择合适的患者,经单侧椎弓根入路减压、钛笼椎体间支撑植骨内固定术能有效的恢复脊柱生理曲度,能达到椎管充分减压和前中柱的支撑重建,同时保留伤椎相对正常的中下份椎体及下位未受损伤的椎间盘,降低融合术后相邻节段退变的风险。
- 杨东军欧云生涂平华刘渤朱勇赵增辉蒋电明
- 关键词：椎弓根内固定
