汤景元
- 作品数:29 被引量:228H指数:9
- 供职机构:南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“优秀青年教师资助计划”江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 副猪嗜血杆菌人工感染猪的病理学观察
- 用副猪嗜血杆菌分离株感染断奶仔猪,发病仔猪临床表现为体温中度升高、精神不振、被毛粗乱、站立不稳、厌食、呼吸困难,尸体剖解可见胸腹腔纤维素渗出严重、有大量的渗出液、肺出血及脑充血等,病理组织学表现为肺脏、心脏、脾脏等脏器含...
- 尹秀凤王艳姜平汤景元张书霞
- 关键词:副猪嗜血杆菌
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌人工感染猪的病理学观察被引量:20
- 2007年
- 用副猪嗜血杆菌分离株感染断奶仔猪,发病仔猪临床表现为体温中度升高、精神不振、被毛粗乱、站立不稳、厌食、呼吸困难。尸体剖检,可见胸腹腔纤维素渗出严重,有大量的渗出液、肺出血及脑充血等;病理组织学表现为,肺脏、心脏、脾脏等脏器含有大量的中性粒细胞的纤维蛋白性多发性浆膜炎、脑膜炎及支气管肺炎。结果表明,此分离株为一高致病潜力的菌株。
- 尹秀凤张书霞王艳姜平汤景元
- 关键词:副猪嗜血杆菌病理学仔猪
- 表达PRRSV M蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究被引量:15
- 2005年
- 本研究通过RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株的M蛋白基因,将其克隆重组到人 血清5型腺病毒载体中,转染293细胞,制备重组腺病毒rAd-M。RT-PCR和IFA方法鉴定,结果表明rAd-M可表 达M基因的mRNA和M蛋白。纯化的rAd-M重组腺病毒经293细胞连续传25代,滴度稳定为107.8 TCID50/ mL。动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒rAd-M能够刺激机体产生PRRSV的特异性抗体免疫和细胞免疫应 答反应,从而为PRRSV结构蛋白功能及其基因工程疫苗研究奠定了基础。
- 汤景元姜平蒋文明马苏李玉峰
- 关键词:重组腺病毒免疫反应PRRSVM蛋白
- 猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定被引量:16
- 2006年
- 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因。本研究利用PCR技术将Cap蛋白基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-Cap,测定其TCID50为1013.7/mL。用RT-PCR、间接ELISA、Westernblot和IPMA等方法证明了Cap蛋白在腺病毒中获得表达。该研究为发展PCV2的重组腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。
- 王先炜姜平李玉峰蒋文明汤景元
- 关键词:CAP蛋白腺病毒
- 不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究
- 本研究用3对分别针对PRRSV的ORF7、ORF5和ORF5的PCR引物N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2进行RT-PCR,检测PRRSV,从其敏感性、特异性和临床样品检出率等方面...
- 邓雨修李玉峰姜平蒋文明汤景元
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR一步法RT-PCR
- 副猪嗜血杆菌病的病理学研究被引量:3
- 2006年
- 用三个副猪嗜血杆菌分离株分别感染断奶仔猪,发病仔猪临床表现为体温中度升高、精神不振、被毛粗乱、站立不稳、厌食、呼吸困难,剖解可见胸腹腔纤维素渗出严重、有大量的渗出液、肺出血及脑充血等,病理组织学表现为含有大量的嗜中性细胞的纤维蛋白性多发性浆膜炎、脑膜炎及支气管肺炎,表明该分离株为一高致病潜力的菌株。
- 李阳友谢秀兰汤景元靳艳玲
- 关键词:副猪嗜血杆菌病理学断奶仔猪
- 不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究被引量:22
- 2006年
- 用3对分别针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7、ORF5和ORF5的PCR引物N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2进行RT-PCR,检测PRRSV,从其敏感性、特异性和临床样品检出率等方面进行比较,在此基础上进一步建立一步法RT-PCR检测方法。结果显示:3对引物对PRRSV均有很高的特异性;应用N1/N2引物病毒最低检测量为7.9 TC ID50,而AdGP5.1/AdGP5.2引物和RFLP5.1/RFLP5.2引物PCR最低检测量为79 TC ID50;运用N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物分别进行RT-PCR扩增检测临床样品,PRRSV检出率分别为28/48、27/48和25/48,且用AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物检测的阳性样品,用N1/N2引物检测也都呈阳性。运用N1/N2引物,通过一步法RT-PCR成功地从PRRSV S1株中扩增出374 bp的目的基因片段。结果表明,用N1/N2引物扩增PRRSV目的基因,其敏感性和临床样品检出率更高,更适合临床样品PRRSV的检测。
- 邓雨修李玉峰姜平蒋文明汤景元
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR一步法RT-PCR
- 串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究被引量:14
- 2006年
- 利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确。PmeⅠ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA。重组腺病毒DNA经PacⅠ线性化后用脂质体转染HEK-293A细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过IFA可以检测到M与GP5串联的重组腺病毒构建成功,可以正确地表达目的蛋白。将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明可以诱导产生较强的体液免疫应答(ELISA抗体和中和抗体)和细胞免疫应答(淋巴细胞增殖和CTL反应)。证明该重组腺病毒具有较好的免疫原性,为下一步猪体免疫试验奠定了基础。
- 蒋文明姜平李玉峰汤景元王先炜杜以军
- 关键词:PRRSVMGP5重组腺病毒体液免疫
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白重组腺病毒的构建与免疫特性研究
- 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪繁殖障碍重大传染性疾病之一,已造成世界养猪业巨大经济损失。PRRSVM蛋白是欧洲型和美洲型毒株间最保守的蛋白,并且M蛋白不但能够诱导产生部分中和抗体,而且...
- 汤景元
- 关键词:呼吸综合征病毒猪繁殖重组腺病毒免疫同源重组
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌人工感染猪的病理学观察
- 用副猪嗜血杆菌分离株感染断奶仔猪,发病仔猪临床表现为体温中度升高、精神不振、被毛粗乱、站立不稳、厌食、呼吸困难,尸体剖解可见胸腹腔纤维素渗出严重、有大量的渗出液、肺出血及脑充血等,病理组织学表现为肺脏、心脏、脾脏等脏器含...
- 尹秀凤王艳姜平汤景元张书霞
- 关键词:副猪嗜血杆菌病理学