武改霞
- 作品数：11 被引量：6H指数：2
- 供职机构：西南大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金重庆市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- ToMV-K 98K复制酶与运动蛋白转基因珊茜烟对TMV抗性分析
- 番茄花叶病毒弱毒疫苗(ToMV-K)是将番茄花叶病毒强株(L-TMV)用亚硝酸处理后,分离筛选而得到的对TMV及ToMV感染有明显保护作用,且免疫特性和遗传性的弱毒株.对其基因组cDNA的核苷酸序列进行了测定分析表明,T...
- 武改霞孙现超青玲杨水英
- ToMV-K 98K复制酶与运动蛋白转基因珊茜烟对TMV抗性分析
- 番茄花叶病毒弱毒疫苗(ToMV-K)是将番茄花叶病毒强株(L-TMV)用亚硝酸处理后,分离筛选而得到的对TMV及ToMV感染有明显保护作用,且免疫特性和遗传性的弱毒株。对其基因组cDNA的核苷酸序列进行了测定分析表明,T...
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- 文献传递
- ToMV外壳蛋白互作IP-L蛋白的亚细胞定位及表达分析被引量：3
- 2017年
- 【目的】前期研究显示To MV外壳蛋白(coat protein,CP)可以与烟草蛋白L(CP-interacting protein-L,IP-L)相互作用,本研究旨在明确To MV CP与IP-L的共定位情况、IP-L的组织表达和在To MV侵染条件下烟草IP-L及其编码蛋白的表达变化情况,为进一步明确IP-L的功能提供依据。【方法】通过双酶切法从笔者实验室构建保存的p GBKT7-CP和p GADT7-IP-L重组载体上切下To MV CP和IP-L目的片段,构建融合蛋白植物表达载体p PZP-IP-L-N-EGFP和p PZP-CP-N-Ds Red及原核表达载体p EGX-IP-L。通过热激法将融合表达的植物表达载体转化至农杆菌EHA105,在烟草表皮细胞瞬时表达IP-L-N-EGFP和CP-N-Ds Red,共聚焦荧光显微镜下观察IP-L和To MV CP共定位情况。用实时荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)分析IP-L在本氏烟各组织部位的表达量。原核表达载体p EGX-IP-L,转化原核表达菌BL21,优化GST-IP-L可溶性表达条件后大量表达该蛋白,用GST亲和层析法纯化获得可溶性GST-IP-L蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体。ELISA测定抗体效价,Western印迹法明确抗体的特异性后,利用该抗体分析To MV侵染条件下番茄IP-L蛋白表达情况,用q RT-PCR检测IP-L表达变化与蛋白水平是否一致。【结果】To MV CP在本氏烟叶片表皮细胞的细胞质和细胞质膜以及叶绿体均有分布,而IP-L只在本氏烟叶片表皮细胞质膜表达,二者共定位在细胞质膜。IP-L在本氏烟叶片中特异高表达,显著高于茎、根和花中的相对表达量。在温度为30℃,IPTG诱导浓度为0.3 mmol·L-1条件下表达出大小为42.8 k D的可溶性GST-IP-L融合蛋白。纯化获得约4.2 mg可溶性蛋白,免疫家兔制备了效价为1/6400的多克隆抗体。Western印迹结果表明,该抗体可以与IP-L的原核产物特异性结合。在To MV侵染本氏烟1、3、7 d后,Western印迹分析表明IP-L在叶片内表达量随接种时间呈明显上调趋势。q RT-PCR检测结果与Western印迹结果一致,显示IP-L在To MV侵�
- 彭浩然蒲运丹张永至薛杨武改霞青玲孙现超
- 关键词：亚细胞定位番茄花叶病毒
- 我国枣树上发现植原体复合侵染
- 枣疯病(Jujube witches’ broom)是由植原体(Phytoplasma)引起的一类病害,因其防治难度大,具有毁灭性,俗称为枣树的'癌症'。国内外研究者利用16S rDNA基因片段对引起枣疯病的植原体进行分...
- 李婷婷武改霞孙现超青玲杨水英
- 关键词：枣疯病复合侵染
- 文献传递
- 我国枣树上发现植原体复合侵染
- 枣疯病(Jujube witches′broom)是由植原体(Phytoplasma)引起的一类病害，因其防治难度大，具有毁灭性，俗称为枣树的"癌症"。国内外研究者利用16S rDNA基因片段对引起枣...
- 李婷婷武改霞孙现超青玲杨水英
- 关键词：枣疯病复合侵染
- 温州蜜柑萎缩病毒奉节分离物的RNA2分子特征
- 温州蜜柑萎缩病毒(Satsuma dwarf virus,SDV)是主要为害温州蜜柑的柑橘病毒之一.据报道,我国发生的SDV是20世纪80年代从日本引种过程中,引进了携带SDV的柑橘品种造成的.随后,随着引进品种的推广而...
- 武改霞尹小君孙现超青玲周常勇
- 与ToMV CP互作基因IP-L的启动子克隆分析
- 基因表达的最终产物是RNA和蛋白质,这两大类物质及其次级产物维持着整个生命的有序活动。任何基因表达调控程序上的缺陷或紊乱,均会对生物体造成严重后果。因此,基因表达调控的机理是分子生物学研究的热点和前沿。烟草IP-L基因是...
- 武改霞李婷婷孙现超
- 关键词：TOMVCP启动子克隆分析
- 与ToMV CP互作基因IP-L的启动子克隆分析
- 基因表达的最终产物是RNA和蛋白质,这两大类物质及其次级产物维持着整个生命的有序活动。任何基因表达调控程序上的缺陷或紊乱,均会对生物体造成严重后果。因此,基因表达调控的机理是分子生物学研究的热点和前沿。烟草IP-L基因是...
- 武改霞李婷婷孙现超
- 关键词：启动子克隆分析
- 文献传递
- 温州蜜柑萎缩病毒奉节分离物的RNA2分子特征
- 温州蜜柑萎缩病毒(Satsuma dwarf virus,SDV)是主要为害温州蜜柑的柑橘病毒之一。据报道,我国发生的SDV是20世纪80年代从日本引种过程中,引进了携带SDV的柑橘品种造成的。随后,随着引进品种的推广而...
- 武改霞尹小君孙现超青玲周常勇
- 文献传递
- 番茄花叶病毒外壳蛋白与烟草铁氧还蛋白Ⅰ及IP-L蛋白的互作分析
- 番茄花叶病毒(Tomatomosaicvirus,ToMV)是烟草花叶病毒属(Tobamovirus)的成员之一,基因组为单链正义RNA,大小约为6.4kb,编码了3个非结构蛋白和17.6kDa的外壳蛋白(coatpro...
- 武改霞
- 关键词：番茄花叶病毒外壳蛋白
- 文献传递
