栾晓玲
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 唾液链球菌尿素酶结构亚基的克隆和表达被引量：1
- 2011年
- 目的:克隆和表达唾液链球菌尿素酶结构亚基UreA、UreB、UreC。方法:用已构建的含唾液链球菌57.I尿素酶基因簇的重组质粒为模板,分别克隆、双酶切、连接、转化,构建含结构基因的表达质粒,IPTG诱导表达,亲和层析纯化蛋白。结果:成功构建表达质粒,经诱导、亲和层析,获得高纯度、高浓度的UreA、UreB、UreC 3种目的蛋白。结论:成功诱导纯化唾液链球菌尿素酶的结构亚基,为今后各亚基的酶活分析和抗体制备等研究奠定基础。
- 栾晓玲王艳冯希平
- 关键词：克隆尿素酶
- 口腔细菌尿素酶的检测被引量：2
- 2011年
- 尿素可以持续地从健康人的唾液和龈沟液中分泌出来,被口腔细菌尿素酶快速水解,产生的氨能够升高口腔环境的pH值,引起菌斑生物膜的改变,从而减少龋齿的发生。由于尿素水解作用对口腔环境中微生物致病机制的重要影响,所以对尿素酶及其活性的检测对预防和治疗龋齿可能具有很大的帮助。现分别从定性检测、半定量检测、定量检测3个不同层面,将近年来报道的口腔细菌尿素酶的检测方法作一综述。
- 栾晓玲王艳冯希平
- 关键词：口腔细菌尿素酶龋齿
- 唾液链球菌尿素酶基因的克隆和表达被引量：2
- 2010年
- 目的 克隆唾液链球菌57.Ⅰ的尿素酶基因,并在不添加外源性镍离子的情况下表达出有活性的尿素酶,以期为进一步研究口腔细菌的尿素分解机制和牙菌斑生物膜的产碱活性提供依据.方法 将尿素酶基因分成前、中、后三段,分别设计引物,应用聚合酶链反应（PCR）法进行克隆并测序鉴定;进而采用双酶切的方法 将分段克隆的产物逐步连接为完整的尿素酶基因;将含有完整尿素酶基因的质粒转化感受态大肠杆菌TG-1,经酚红脲酶试验检测其尿素分解活性.结果 所克隆的唾液链球菌57.Ⅰ尿素酶基因序列正确;无需添加氯化镍,该克隆能够在大肠杆菌中表达出有活性的尿素酶,分解培养基中的尿素产生氨,升高环境中的pH值.结论 本研究克隆的唾液链球菌尿素酶基因无需添加外源性镍离子就能够表达出尿素分解活性,可用于今后替代疗法防龋研究中构建更适合临床应用的产碱效应菌.
- 王艳冯希平谢幼华陶丹英栾晓玲
- 关键词：尿素酶镍龋齿
