柳展基
- 作品数：64 被引量：278H指数：9
- 供职机构：山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 棉花转录因子GhSNAC3启动子的克隆与表达分析被引量：4
- 2016年
- 为研究棉花NAC转录因子基因GhSNAC3启动子的结构和功能,以鲁棉研32号基因组为模板,用PCR扩增的方法得到棉花基因GhSNAC3的启动子序列,利用分析网站PlantCARE、PLACER和BDGP对启动子上存在的顺式作用元件进行了预测与分析,在此基础上利用该启动子及GhSNAC3基因构建植物表达载体,并通过烟草遗传转化进一步研究启动子的转录活性。结果表明GhSNAC3启动子除含有CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有茉莉酸、赤霉素和脱落酸响应元件以及大量光顺式作用元件和逆境胁迫诱导相关的顺式调控元件。采用不同胁迫处理转基因烟草并进行表达分析,结果显示GhSNAC3在盐胁迫下植株根部有高水平的表达,而在茎和叶中表达量极低,表明GhSNAC3在逆境胁迫应答过程中可能具有重要功能,其启动子是一个盐诱导型启动子,具有组织特异性。研究结果为棉花NAC信号通路研究和耐盐基因工程改良提供了理论依据。
- 马骏骏柳展基李菲王立国傅明川朱新霞刘任重
- 关键词：棉花NAC启动子
- 棉花GhSRO04/GhSRO08基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2015年
- SRO转录因子在植物响应盐、旱和病菌等生物和非生物胁迫中具有重要的调节作用。本研究从抗枯萎病耐黄萎病的棉花品种鲁研棉32号中克隆获得2个基因:命名为GhSRO04和GhSRO08(Gen Bank登录号为KR534896和KR534895)。结果显示:GhSRO04包含一个最大开放阅读框1830 bp(ORF),推测编码609个氨基酸;GhSRO08包含一个最大开放阅读框1 842 bp(ORF),推测编码编码613个氨基酸。比对分析表明GhSRO04和GhSRO08基因均含有RCD1-SRO-TAF4结构域(RST)。系统进化树分析表明,GhSRO04和GhSRO08编码产物与拟南芥RCD1和SRO1亲缘关系最近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析基因表达显示,GhSRO04和GhSRO08基因均受黄萎病菌侵染、干旱和高盐诱导表达,表明GhSRO04和GhSRO08在棉花应对盐、旱和病菌胁迫中可能起着重要的调节作用,对棉花种质的抗逆性遗传改良具有潜在利用价值。本研究首次从棉花中分离鉴定出SRO类转录因子,并进行了初步功能分析,为棉花遗传改良储备了基因资源。
- 马骏骏李菲柳展基刘任重王立国赵灿朱新霞
- 关键词：棉花SRO基因表达抗逆
- 花生AhFAD2基因抑制表达的转基因后代分析被引量：3
- 2018年
- FAD2(Δ^(12) fatty acid desaturase,Δ^(12)FAD或FAD2)是催化油酸在脂肪酸碳链Δ^(12)位脱氢生成亚油酸的关键酶。在花生中,FAD2酶活性下降或失活可提高籽粒中油酸的相对含量,改善花生籽粒及制品的品质和氧化稳定性。通过将种子特异性表达Lectin启动子和Ca MV35S启动子驱动的倒位重复Ah FAD2基因RNAi干扰结构转入花生,获得了以丰花1号(FH1)和花育23(HY23)为受体、携带上述2种转化结构、稳定遗传的花生转基因纯合体株系,转基因花生主要农艺性状与非转基因对照基本一致。实时荧光定量分析发现,各转基因株系发育种子中Ah FAD2基因的转录水平普遍下调。气相色谱法进一步测定了部分转基因后代株系种子的脂肪酸含量及组成,籽粒中油酸含量分别平均提高了15.09%(HY23为受体)、36.40%(FH1为受体),相应地,亚油酸含量平均下降了16.19%、29.81%,油亚比平均增加了38.02%、98.10%。各转基因株系的油酸含量显著提高;且在以FH1为受体的转基因株系后代籽粒以及种子特异性启动子驱动的转化结构中,RNAi的抑制效果更明显。通过RNAi技术抑制花生FAD2基因的表达,可以有效提高花生籽粒油酸含量。该技术体系可以为花生品质育种提供借鉴。
- 徐平丽唐桂英唐桂英柳展基毕玉平
- 关键词：花生RNA干扰转基因
- 花生二酰基甘油酰基转移酶基因克隆与功能研究被引量：7
- 2013年
- 利用RT-PCR方法,从花生品种‘鲁花14’未成熟种子中克隆了二酰基甘油酰基转移酶(Diacylglycerolacyltransferase,DGAT)基因AhDGAT3A和AhDGAT3B的cDNA,序列分析显示,两者在编码区核苷酸序列有96%相似性,氨基酸序列有94%相似,并对其中的AhDGAT3A进一步研究。(1)半定量RT-PCR分析显示,AhDGAT3A在花生根、茎、叶、花和种子中均有表达,且花中表达量最高,茎中表达量非常低;在花生果针入土60d时种子中的表达量较其它发育时期有所提高。(2)利用染色体步移技术克隆了AhDGAT3A5′上游1 588bp调控区,在线软件分析发现该调控区除包括启动子核心元件外,还包含多个调控花粉中表达的顺式元件、光信号调控元件和胁迫相关元件等。(3)在烟草中过量表达AhDGAT3A基因,转基因烟草种子粗脂肪和主要脂肪酸含量较对照均有所下降,推测这一结果可能由转基因共抑制作用导致。
- 唐桂英柳展基徐平丽赵学彬单雷
- 关键词：花生
- 蛋白质组学在农业中的应用被引量：7
- 2006年
- 随着拟南芥、水稻等模式植物基因组测序的完成,植物基因组学的研究重点已经转变为功能基因组学研究。蛋白质组学是后基因组时代——功能基因组学研究的新兴学科和热点领域。本文简要介绍了蛋白质组学产生的背景、蛋白质组学的含义和研究方法。研究方法主要包括以双向聚丙烯酰胺凝胶电泳为主的蛋白分离技术(2-DE)和以质谱(Mass-spectrometry)分析为主的蛋白鉴定技术。本文详细评述了蛋白质组学技术在农业科学研究中的应用,如核不育和细胞质雄性研究,病虫害等生物胁迫蛋白质组学研究,缺氧胁迫、热胁迫、损伤胁迫等非生物胁迫研究、各种突变体研究、组织和细胞器(叶绿体、线粒体等)蛋白质组研究等。最后展望了蛋白质组学在农业科学研究中的应用前景。
- 柳展基杨小红毕玉平
- 关键词：蛋白质组学双向电泳质谱农业
- 海岛棉基因组WRKY转录因子的鉴定及表达分析
- 棉花是世界范围内重要的经济作物之一。在棉花生长过程中,黄萎病的爆发会严重降低棉花的产量及品质,成为影响棉花高产优质的重要因素之一。海岛棉(Gossypium barbadense)抵御黄萎病菌侵染的能力要明显优于陆地棉,...
- 傅明川李浩柳展基王立国刘任重
- 关键词：海岛棉WRKY转录因子黄萎病
- 利用生物技术创造花生抗逆新种质的研究
- 毕玉平徐平丽单雷王兴军唐荣华李广存王秀丽张斌柳展基
- 该项目首次通过大EST测序克隆88个与花生抗逆相关的基因，在国内首先克隆花生条纹病毒(中国株系) 外壳蛋白基因；筛选获得272个新的花生SSR分子标记，通过远缘杂交结合分子标记辅助选择等手段，培育出46个抗青枯病和叶斑病...
- 关键词：
- 关键词：生物技术分子标记辅助育种
- 棉花抗逆转录因子基因GhMYB12的克隆与分析
- MYB基因家族是一类重要的转录因子,在植物应对外界生物和非生物胁迫的过程中起着极为重要的调控作用。利用测序完成的二倍体雷蒙德氏棉基因组数据库,从陆地棉品种鲁棉研32号中克隆到1个新的MYB转录因子GhMYB12。通过与模...
- 李菲柳展基王立国刘勤红刘任重
- 关键词：棉花抗逆MYB转录因子基因克隆
- 文献传递
- 高通量分子标记技术辅助回交选育高油酸花生新种质被引量：5
- 2018年
- 以山东大花生鲁花14号(LH14)为母本、高油酸花生开农176(KN176)为父本配置杂交组合,再以LH14为轮回亲本历经4次回交获得BC4F1,期间用Taq Man探针标记技术辅助杂种AhFAD2B基因型选择;BC4F1经连续自交、田间筛选并辅助KASP分子标记鉴别后代籽粒AhFAD2B基因的基因型,获得基因型aabb的BC4F5株系10个,它们分别来源于BC4F1代7个单株。分析这10个株系产量及品质性状,结果显示各株系结果集中,单株平均荚果数、果型与母本LH14相似,油酸含量为68.67%~77.93%;其中7个株系的百果重、饱果率和6个株系的百仁重分别比对照LH14提高0.02%~16.05%、4.55%~12.31%和0.05%~9.41%。综合各株系田间表现及籽粒品质指标,最终选择油酸含量高于70%的7个BC4F5代株系进行DUS测试、品种区试和生产试验。Taq Man探针标记与KASP标记结合应用于高油酸品种选育过程中,大大减少了田间选择的工作量,提高了回交选育高油酸花生的效率。
- 徐平丽唐桂英付春柳展基鲁成凯姜言生单雷
- 关键词：高油酸回交分子标记辅助选育
- 棉花基因组的同质段结构特征及进化研究
- 许多研究表明,动植物基因组是由一系列GC含量不同的DNA片段所组成,通常将这样的DNA片段称为同质段(Isochore)。同质段长度一般大于200 kb,根据GC含量不同,可将其分为L1(GC含量＜37％)、L2(37％...
- 傅明川柳展基王立国刘任重
- 关键词：棉花双子叶植物单子叶植物
