李琴
- 作品数：38 被引量：73H指数：5
- 供职机构：新乡医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 附着型慢病毒载体、制备方法及应用
- 本发明公开了一种附着型慢病毒载体、制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明中附着型慢病毒载体由pLRZM载体与包装系统共同转染宿主细胞获得，pLRZM载体为pLVX‑IRES‑ZsGreen1载体中土拨鼠肝炎病毒转录后调...
- 王天云贾岩龙张俊河赵春澎李琴王小引
- 文献传递
- HPLC法同时测定复方锌布颗粒剂中3种组分的含量被引量：6
- 2010年
- 目的:建立复方锌布颗粒剂中葡萄糖酸锌、布洛芬和马来酸氯苯那敏含量同时测定的HPLC方法。方法:采用C18色谱柱,以含0.40%三乙胺的0.04mol.L-1KH2PO4溶液(pH=2.60)-乙腈(65:35)为流动相A,以含0.40%三乙胺的0.04mol.L-1KH2PO4溶液(pH=2.60)-乙腈(50:50)为流动相B,梯度洗脱,检测波长为215nm。结果:葡萄糖酸锌线性范围为0.09638～3.084g.L-1,马来酸氯苯那敏和布洛芬的线性范围均为0.006250～0.2000g.L-1。方法回收率为98.0%～101.7%,日内及日间精密度RSD小于1.0%。结论:本方法同时测定复方锌布颗粒剂中3种组分的含量,快速、简便、准确,可用于该制剂的质量控制。
- 董丽孙祥德李琴
- 关键词：HPLC葡萄糖酸锌布洛芬马来酸氯苯那敏
- 内含子方向对MAR表达载体重组CHO细胞转基因表达的调控作用被引量：1
- 2016年
- 目的分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响。方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体上一段内含子序列酶切正向、反向连接到载体上。酶切和测序鉴定正确后,转染中国仓鼠卵巢CHO细胞,G418筛选稳定转化的细胞株,ELISA分析氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因的表达水平。结果具有正向内含子的含MAR和不含MAR的表达载体CAT基因表达水平均高于含反向内含子的表达载体(P<0.05),反向内含子存在情况下,MAR不能提高转基因表达。结论在重组CHO细胞中,内含子的方向影响转基因表达水平,正向内含子和MAR能提高转基因表达,反向内含子不能提高转基因表达水平。
- 李琴赵春澎王小引孙秋丽王天云
- 关键词：核基质结合区内含子转基因表达CHO细胞
- 浅谈实验教学改革与培养学生创新能力被引量：5
- 2010年
- 实验教学对学生创造力有着密切的联系。本文简单介绍我校在改革传统的教学方法、更新实验教学手段、积极引进高素质人才、改进实验成绩评定方法等方面进行的探索。
- 杨婷婷李琴张文超
- 关键词：实验教学改革设计性实验
- 星点设计-响应面法优化超声波提取石榴皮多糖的工艺及抗氧化活性研究被引量：1
- 2014年
- 目的通过星点设计-响应面法优化石榴皮多糖的提取工艺及抗氧化活性。方法以石榴皮多糖的含量为指标,采用超声波辅助技术提取石榴皮多糖,用星点设计-响应面法研究了液料比、提取时间、提取温度和超声功率对提取石榴皮多糖的影响;观察了对二苯基苦基苯肼自由基(·DPPH)、羟基自由基(·OH)、过氧化氢(H2O2)的清除作用。结果超声波提取石榴皮多糖的最佳工艺为:液料比29.98(mL∶g),提取时间43.72 min,提取温度62.79℃,超声功率454.30 W,以此工艺条件得多糖提取率为7.03%;石榴皮多糖对·DPPH、·OH、H2O2有明显的清除作用。结论星点设计-响应面法用于优化提取工艺具有简便合理、稳定的特点,在优化石榴皮多糖提取条件中应用效果良好;石榴皮多糖有明显的抗氧化作用。
- 李琴李纳新
- 关键词：石榴皮多糖超声辅助提取星点设计
- 不同启动子和MAR组合对重组CHO细胞转基因表达的影响被引量：1
- 2018年
- 目的分析不同启动子与核基质结合区(MAR)组合对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中转基因表达的影响。方法将β-珠蛋白MAR(gMAR)与人巨细胞病毒早期启动子(CMV-IE)、猿猴空泡病毒40(SV40)启动子组合,构建两种不同启动子与gMAR组合的表达载体。转染CHO细胞,48h后观察增强型绿色荧光蛋白(eGFP)的瞬时表达情况;G418筛选稳定转化的细胞株,流式细胞术分析稳定CHO细胞eGFP基因的表达水平,实时荧光定量PCR(qPCR)分析eGFP基因的相对拷贝数。结果不含gMAR的表达载体,CMV-IE启动子eGFP表达明显强于SV40启动子;gMAR能提高CMV-IE启动子eGFP表达水平,但在SV40启动子中并未表现出提高作用。两侧含gMAR的表达载体比一侧含有gMAR的表达载体CMV-IE启动子eGFP表达荧光强;G418加压筛选后,含SV40启动子的gMAR表达载体eGFP基因表达不稳定,荧光逐渐减弱,因此,后期只对稳定表达eGFP基因的CMV-IE启动子表达载体进行流式细胞术和qPCR分析。流式细胞术检测结果显示,一侧含有与两侧含有gMAR的CMV-IE启动子表达载体eGFP基因表达量比不含gMAR的表达载体分别提高9.85倍和12.94倍;qPCR结果显示,以不含gMAR的载体的eGFP基因拷贝数为1,一侧含有与两侧含有gMAR的CMV-IE启动子表达载体eGFP基因相对拷贝数为3.68和9.25。结论 CMV-IE启动子活性强于SV40启动子;gMAR能提高CMV-IE启动子外源基因的表达水平,其机制可能与增加基因拷贝数相关。
- 李琴王小引赵春澎田政伟徐丹华王天云张俊河
- 关键词：核基质结合区CHO细胞
- 附着型慢病毒载体、制备方法及应用
- 本发明公开了一种附着型慢病毒载体、制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明中附着型慢病毒载体由pLRZM载体与包装系统共同转染宿主细胞获得，pLRZM载体为pLVX-IRES-ZsGreen1载体中土拨鼠肝炎病毒转录后调...
- 王天云贾岩龙张俊河赵春澎李琴王小引
- 2种提取大鼠肝RNA方法的比较被引量：8
- 2008年
- 目的建立大鼠肝RNA的提取方法,为逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及cDNA文库构建等分子生物学实验奠定基础。方法用Trizol法和异硫氰酸胍提取法提取大鼠肝RNA,紫外分光光度计测定RNA产量及纯度,琼脂糖凝胶电泳验证RNA的完整性。结果采用Trizol方法提取的RNA的OD260/OD280比值为2.28,异硫氰酸胍方法提取的RNA OD260/OD280比值为1.74。采用Trizol法提取RNA的产量高于异硫氰酸胍提取法,电泳分析18 s、28 s条带完整。结论Trizol提取的大鼠肝RNA纯度、收率都优于硫氰酸胍方法提取的RNA。
- 李琴
- 关键词：RNA电泳
- 时间分辨后化学发光同时测定林可霉素和卡那霉素被引量：1
- 2017年
- 根据林可霉素、卡那霉素在过氧化单硫酸盐(PMS)-鲁米诺(Luminol)体系中的化学发光反应动力学性质的明显差异,建立了时间分辨后化学发光同时测定林可霉素和卡那霉素的新方法。在PMS-鲁米诺体系中林可霉素化学发光反应较快,0.8s达到最大值,峰尖锐;卡那霉素化学发光反应较慢,54.8s后达到最大值,峰平缓,且其动力学曲线呈现出随时间分开的两个独立的发光峰,互不干扰。该方法测定林可霉素、卡那霉素的线性范围分别为4.0×10^(-9)~8.0×10^(-7) g/mL、4.0×10^(-7)~8.0×10^(-5) g/mL,对8.0×10^(-8) g/mL的林可霉素溶液和8.0×10^(-6) g/mL的卡那霉素溶液进行测定,其相对标准偏差(RSD,n=11)分别为4.6%和3.3%,测定林可霉素和卡那霉素的检出限分别为1.0×10^(-9) g/mL和1.0×10^(-7) g/mL。
- 闫瑞芳李琴苗江欢章竹君
- 关键词：后化学发光鲁米诺林可霉素卡那霉素
- 一种人类及哺乳动物细胞表达载体及其应用
- 本发明提供了一种人类及哺乳动物细胞表达载体及其应用，所述表达载体的核苷酸序列如Seq ID No.1或Seq ID No.2所示，其是以pCAT3-control作为出发载体构建的一种表达载体，本发明的表达载体能够显著提...
- 张俊河王天云董卫华王芳赵春澎柴树洁王小引王俐杨瑞李琴
- 文献传递
