曾怀才
- 作品数：51 被引量：152H指数：6
- 供职机构：南华大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省卫生厅资助项目湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学环境科学与工程更多>>
- PFOS致SH-SY5Y细胞凋亡及可能机制被引量：1
- 2016年
- 目的探讨全氟辛烷磺酸盐(PFOS)对成人神经母瘤细胞(SH-SY5Y)的凋亡效应及可能的机制。方法实验中PFOS剂量设置为200、150、100、50、10、1μmol/L和DMSO(对照组)。体外培养SH-SY5Y细胞,以不同浓度PFOS(1、10、50、100、150、200μmol/L)处理细胞。染毒24 h和48 h后用CCK8法检测SH-SY5Y细胞活性,应用Annexin-V FITC/PI双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡,紫外和荧光分光光度法检测SH-SY5Y细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)、总活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的影响。结果 PFOS暴露降低了SH-SY5Y细胞活性,并呈明显的剂量效应关系;PFOS导致SH-SY5Y细胞凋亡;紫外和荧光分光光度法结果显示PFOS引起SH-SY5Y细胞中SOD和GSH水平下降,与对照组相比,最高剂量组PFOS引起GSH含量从8.00±0.12 nmol/mg蛋白降至5.89±0.90 nmol/mg蛋白;同时引起总活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平上升,与对照组相比,最高剂量组PFOS引起MDA含量从1.92±0.17 nmol/mg蛋白显著上升至6.95±0.26 nmol/mg蛋白。结论PFOS可能通过对SH-SY5Y细胞产生氧化应激损伤从而对SH-SY5Y细胞产生毒性效应。
- 全小青李武曾怀才
- 关键词：氧化应激
- 鹦鹉热嗜衣原体CPSIT_0018融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其在Hela细胞中的定位被引量：1
- 2014年
- 目的构建鹦鹉热嗜衣原体(Cps)CPSIT_0018原核表达载体,表达并纯化该融合蛋白,观察其在感染的Hela细胞中的定位。方法采用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT_0018基因,并构建pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT_0018融合蛋白表达,进一步用该融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,间接免疫荧光法分析His-CPSIT_0018蛋白在Hela细胞中的分布特征。结果成功构建了pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;在Cps感染的Hela细胞中CPSIT_0018的分布与主要外膜蛋白MOMP相似,而与包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同。结论成功克隆表达了His-CPSIT_0018,该蛋白定位在Cps包涵体内。
- 贺庆芝曾怀才陆春雪胡艳群陈芝喜王川吴移谋
- 关键词：克隆表达细胞定位
- 鹦鹉热嗜衣原体CPSIT-0531融合蛋白原核表达载体的构建、表达及免疫原性检测被引量：1
- 2014年
- 目的构建鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,Cps)CPSIT-0531原核表达载体,表达并纯化该融合蛋白,检测其免疫原性。方法采用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT-0531基因,并构建pET30a-CPSIT-0531原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT-0531融合蛋白表达,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA分析His-CPSIT-0531蛋白的免疫原性。结果成功构建了pET30a-CPSIT-0531原核表达载体,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;GST-CPSIT-0531免疫小鼠后,ELISA检测免疫小鼠的血清特异性抗体效价为1:640 000。结论成功克隆表达了His-CPSIT-0531,该蛋白具有较好的免疫原性。
- 贺庆芝曾怀才陆春雪王川吴移谋
- 关键词：克隆表达免疫原性
- 家俱展销厅空气中甲醛和挥发性有机物污染的调查被引量：4
- 2008年
- 目的了解家俱展销厅室内空气中甲醛和挥发性有机物(VOCs)的污染状况、影响因素和对从业人员健康的影响。方法随机选择某市25家家俱展销厅和10家食品超市,分别对其室内空气中甲醛、VOCs和相关影响因素进行监测,并对其从业人员的不良建筑物综合症进行问卷调查。结果家俱销售厅室内空气中甲醛和VOCs的平均浓度分别为0.170mg/m3和1.01mg/m3,为《室内空气质量标准》的1.7倍和1.68倍,达标率分别为20%和24%。甲醛和VOCs的浓度与展销厅中的温度和湿度呈正相关,与风速呈负相关。甲醛和VOCs含量均较食品超市空气中的含量高(P<0.05),家俱销售人员的不良建筑物综合症发生率高于食品超市营业员(P<0.05)。结论家俱销售厅室内空气中甲醛、VOCs等污染严重,并对家俱销售人员的健康造成一定的危害,其污染程度受室内温度、湿度、通风状况和家俱使用材料类型的影响。
- 李解生龚德光李君波邓暑芳李梓民曾怀才吴成秋
- 关键词：甲醛挥发性有机化合物
- 维生素C对甲醛胚胎发育毒性抑制作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨维生素C(VC)对甲醛诱导胎鼠发育毒性的影响。方法应用体外全胚胎培养模型,观察100μg/mL VC对终浓度为9,27,81μmol/L甲醛诱导昆明种小鼠胚胎发育毒性的影响。结果与对照组比较,9μmol/L甲醛可使胚胎头长、颅臀长、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量分别升高到(1.66±0.21),(3.48±0.40)mm,(47.70±2.12)mg/(g.prot),(4.27±0.62)nmol/(mg.prot),差异有统计学意义(P<0.05);27μmol/L甲醛使胚胎脏层卵黄囊(VYS)直径、头长、颅臀长、体节数、GSH含量分别下降到(4.35±0.65),(1.48±0.30),(3.19±0.43)mm,(25.2±1.2)对,(40.25±4.38)mg/(g.prot),MDA含量升高到(6.29±0.47)nmol/(mg.prot),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);VC能明显改善上述指标,但与对照组比较差异无统计学意义(P<0.01);VC不能明显改善81μmol/L甲醛诱导的毒性损伤。结论VC对一定剂量范围内的甲醛胚胎毒性具有明显抑制作用。
- 郑翔曹智丽曹霞飞郑宇王超曾怀才龙鼎新让蔚清
- 关键词：甲醛维生素C发育毒性
- 姜黄素致HepG-2细胞的凋亡作用及对bcl-2／bax表达的影响被引量：14
- 2010年
- 目的:研究姜黄素致人肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及bax与bcl-2mRNA表达的变化,为姜黄素的临床应用提供实验依据。方法:当HepG-2细胞处于对数生长期时,分别加入不同浓度(0、2.5、5、10、20、30mg/L)的姜黄素处理48h,MTT试验检测细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测bax和bcl-2mRNA的含量。结果:随着姜黄素浓度的增高,其对HepG-2细胞的抑制作用逐渐增强。当姜黄素浓度为30mg/L时,其抑制率达到(58.23±2.56)%,IC50=25.44mg/L,而细胞的凋亡率由对照组的(1.1±0.3)%上升到(38.4±1.5)%;bax和bcl-2分别是对照组的(5.00±0.55)倍和(0.28±0.05)倍。结论:姜黄素能抑制HepG-2细胞的生长,诱导细胞凋亡,它的分子机制可能是上调bax基因和下调bcl-2基因的表达。
- 贺庆芝曾怀才于伟霞李国庆易岚
- 关键词：姜黄素凋亡BAXBCL-2
- 长期低剂量双酚A干扰雄性小鼠胰岛素敏感性和糖异生的作用研究
- 2022年
- 目的研究长期低剂量双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对不同营养条件下成年雄性小鼠(雄鼠)糖代谢稳态的作用与分子机制。方法将42只7~8周龄的雄鼠分为4组,两组为100μg/(kg·bw)BPA暴露组(BPA组,n=11),分别喂以普通饲料(normal diet,ND)和高脂饲料(high fat diet,HFD),另两组为对照组(纯橄榄油,CON组,n=10),同样分别喂以ND和HFD,每隔1日灌胃染毒,持续5个月;分别于染毒后第1和第3个月时检测糖代谢相关指标,在5个月时处死小鼠并检测胰岛素信号通路关键蛋白磷酸化水平、肝糖原含量以及糖代谢相关基因的表达情况。结果ND-BPA组小鼠染毒1个月时,胰岛素敏感性略有增强(P<0.05),糖异生能力增强(P<0.05),饱腹状态下血清胰岛素水平[(0.39±0.06)mg/dL]降低(P<0.05),暴露3个月后小鼠饱腹血糖[(190.47±16.71)mg/dL]升高(P<0.05),葡萄糖耐量受损(P<0.05),糖异生能力明显增强(P<0.05),暴露5个月时小鼠胰岛素信号通路被显著激活,肝糖原含量差异无统计学意义(P>0.05);而HFD饲养条件下,BPA暴露组小鼠饱腹和空腹状态下血糖和血清胰岛素水平及胰岛素敏感性差异均无统计学意义(均P>0.05),但葡萄糖耐量增强(P<0.05),糖异生水平降低(P<0.05),暴露5个月时小鼠的胰岛素信号通路无明显改变(P>0.05),肝糖原含量明显降低(P<0.05)。结论长期低剂量的BPA暴露可以轻度改善普通饮食小鼠的胰岛素敏感性,增强小鼠糖异生能力;而高脂饮食条件下,相同剂量的BPA暴露可以使小鼠葡萄糖耐量水平增加,糖异生水平受到抑制,可部分缓解高脂饮食引起的糖代谢紊乱。
- 陈颖刘广南郭雅婕唐志曾怀才吕子全
- 关键词：双酚A胰岛素敏感性糖异生
- 3β-HSD基因沉默细胞株的建立及其对DEHP致凋亡的影响被引量：4
- 2019年
- 目的构建3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)基因shRNA慢病毒干扰载体,建立3β-HSD基因沉默细胞株,研究3β-HSD基因沉默对塑化剂邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(DEHP)致凋亡的影响。方法根据GenBank提供的3β-HSD基因mRNA序列,设计合成3条干扰序列,退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中,将重组慢病毒载体转染293FT细胞,收集病毒上清,感染MCF-7细胞。利用嘌呤霉素筛选得到3β-HSD沉默细胞株,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Westernblot)对干扰效果进行鉴定。用不同剂量DEHP对MCF-7细胞和3β-HSD沉默细胞染毒24h,检测凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-8的基因和蛋白表达水平的变化。结果该实验插入慢病毒载体PLVX-shRNA2-puro中的3β-HSD基因干扰序列与设计的序列一致;3β-HSD沉默细胞中3β-HSD基因表达水平较对照组MCF-7细胞降低77%,3β-HSD蛋白表达水平较对照组MCF-7细胞降低74%。不同剂量DEHP染毒3β-HSD沉默细胞和MCF-7细胞后,qRT-PCR结果显示,MCF-7细胞中Bax基因表达水平较对照组(0mmol/LDEHP)升高28%~54%,Caspase-3基因表达水平升高13%~49%,Caspase-8基因表达升高21%~70%。与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞中Bax基因表达水平降低11%~28%,Caspase-3基因表达降低12%~23%,Caspase-8基因表达降低11%~34%。Westernblot结果显示,MCF-7细胞中BAX蛋白表达水平较对照组升高28%~61%,Caspase-3蛋白表达升高40%~48%,Caspase-8蛋白表达升高31%~84%。与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞Bax蛋白表达水平降低11%~27%,Caspase-3蛋白表达降低21%~40%,Caspase-8蛋白表达降低12%~25%。结论该研究成功构建了3β-HSD基因沉默细胞株。DEHP可引起细胞凋亡基因及蛋白表达升高,3β-HSD基因沉默能在一定程度上抑制DEHP对凋亡基因的活化。
- 王利秦逍云徐新云曾怀才郑凯王冰玉龙鼎新
- 关键词：基因沉默
- 氯化三丁基锡对体外培养小鼠胚胎毒性研究被引量：4
- 2005年
- 目的观察氯化三丁基锡的体外培养小鼠胚胎毒性。方法采用全胚胎培养技术,将8.5 d龄昆明种小鼠胚胎置入含有不同浓度氯化三丁基锡的大鼠离心血清中旋转培养48 h,观察体外培养小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的变化。结果氯化三丁基锡在0.05 mg/L以上时能诱发卵黄囊生长和血管分化不良,胚胎发育异常率增高;高浓度组能诱发脑小、心脏畸形(心小和心包积液)、前肢芽小或无、无后肢芽。结论体外实验条件下,氯化三丁基锡对小鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性。
- 曾怀才陈锋龙鼎新李东阳贺性鹏吴成秋李小玲
- 关键词：氯化三丁基锡胚胎毒性全胚胎培养
- 依托省级实验教学示范中心平台提升预防医学生的公共卫生核心能力被引量：5
- 2016年
- 本文以提升预防医学生的公共卫生核心能力为导向,充分发挥"湖南省实验教学示范中心"的实验教学资源优势,改进实验教学方法,激发学生的潜能,探索如何提高公共卫生应急能力、应答能力和解决问题的能力,培养具有良好素质和竞争能力的公共卫生工作者。
- 王婧张朝晖谭琰何爱桃李程曾怀才
- 关键词：实验教学
