方芳
- 作品数：26 被引量：134H指数：6
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 基因重组人胰岛素过敏2例被引量：2
- 2003年
- 冯晓丽陈卫方芳
- 关键词：糖尿病
- 贝复济在糖尿病下肢血管病变治疗中的应用研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨贝复济(重组牛碱性成纤维细胞生长因子)对糖尿病下肢血管病变的治疗效果。方法选择住院诊治的糖尿病足患者32例,依据治疗方法不同随机分为贝复济组(降血糖+抗感染+贝复济局部换药)16例,对照组(降血糖+抗感染)16例。对比两组患者治愈率、创面愈合时间及过敏、不良反应发生情况。结果贝复济组治愈率(93.75%)明显高于对照组(62.5%,P<0.05);贝复济组创面愈合时间(29.34±1.46)d明显比对照组(38.23±2.87)d缩短(P<0.05)。两组均无过敏及其他不良反应。结论在糖尿病下肢血管病变治疗中应用贝复济,可缩短创面愈合时间,提高治愈率。
- 郑宏庭方芳陈卫徐梓辉
- 关键词：贝复济糖尿病下肢血管病变糖尿病
- 2型糖尿病大鼠肝脏骨形成蛋白9基因表达的变化及意义被引量：2
- 2006年
- 目的:观察2型糖尿病大鼠肝细胞中糖、脂代谢调节因子骨形成蛋白9基因转录及表达的变化。方法:实验于2004年在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。取20只Wistar大鼠单纯随机分为模型组(n=15)与正常对照组(n=5)2组,模型组又按处死时间分为5,10,20d3个时间点,每个时间点5只。①模型组大鼠以高热量饲料喂养4周后,以30mg/kg剂量左下腹腹腔注射链脲佐菌素,继续饲以高热量饲料4周制备2型糖尿病模型,以随机血糖>11.1mmol/L作为糖尿病模型成功的标志;正常对照组则腹腔注射相同剂量的生理盐水,饲以普通饲料。②模型组于相应时间点处死,正常对照组与20d处死组同时处死,取肝组织,以反转录-聚合酶链反应及Western-blot技术对骨形成蛋白基因转录及蛋白表达水平进行了检测与分析。结果:20只大鼠全部进入结果分析。①反转录-聚合酶链反应产物的凝胶扫描分析定量结果显示模型组中5,10,20d处死大鼠肝骨形成蛋白9基因转录水平均低于正常对照组(0.767±0.004,0.445±0.012,0.426±0.007,0.909±0.006,t=22.016,45.417,68.364,P<0.05)。②Western-blot结果显示正常组提取的蛋白在Mr13000处可见一条清晰的骨形成蛋白9特异性杂交带,而在5,10,20d处死大鼠肝中骨形成蛋白9表达明显减弱或几乎未见表达。结论:2型糖尿病大鼠体内骨形成蛋白9基因转录及蛋白表达水平较正常均显著降低,这一变化可能与糖尿病的发生、发展有着紧密的联系。
- 方芳郑宏庭刘理冯晓丽徐梓辉徐静
- 葡萄糖对βHC9细胞内磷脂酶C及钙离子浓度的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察葡萄糖浓度对胰岛B细胞(βHC9)内磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)活性及钙离子浓度的影响,探讨PLC在B细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(glucose-stimulatedinsulinsecretion,GSIS)信息传递中的作用。方法以不同浓度的葡萄糖预处理βHC9细胞,采用[3H]肌醇法测定PLC活性,Fura-2荧光负荷技术测定[Ca2+]i。结果葡萄糖浓度可显著影响βHC9细胞内的PLC活性及[Ca2+]i,并且[Ca2+]i变化与PLC活性改变相关葡萄糖浓度为1、5、10、15、20mmol/L时的PLC活性依次为8.1、11.0、16.7、19.8、26.4Bq/ml,各组间均有显著性差异(P<0.05);[Ca2+]i依次为82、95、128、150、161nmol/L,除1、2组,4、5组之外,其余各组间均有显著性差异(P<0.05);PLC活性与[Ca2+]i之间存在线性相关关系(P<0.01)。结论葡萄糖浓度可改变胰岛B细胞内的PLC活性及[Ca2+]i,提示该途径可能参与B细胞GSIS信息传递。
- 郑宏庭李丙蓉方芳刘理冯晓丽徐梓辉徐静
- 关键词：磷脂酶C钙离子
- “胰岛代理细胞”的构建:在HepG2细胞中获得胰岛素分泌被引量：5
- 2004年
- 目的:利用转基因技术将HepG2细胞改建为具有生理性胰岛素分泌能力的“胰岛代理细胞”. 方法:以携葡萄糖激酶(glucokinase,gk)基因的逆转录病毒及携入胰岛素原基因突变体(mutant proinsulin gene, mpin)的逆转录病毒共同感染肝母细胞瘤细胞系HepG2, G418选择培养基挑选抗性细胞集落,放免法、SDS- PAGE、Western-blot及反转录酶聚合酶链反应(RT-PCR) 鉴定HepG2细胞中两个目的基因的转录及表达;选取联合表达葡萄糖激酶及成熟胰岛素的HepG2细胞进行葡萄糖反应性胰岛素分泌的检测,以单独表达成熟胰岛素的HepG2 细胞作对照. 结果:在G418选择培养基中3wk获阳性细胞克隆,采用放免法、SDS-PAGE、Western-blot从20个细胞克隆中挑选出联合表达葡萄糖激酶及成熟胰岛素的HepG2细胞4 株,其中1株2个目的基因表达均较强,命名为细胞克隆“β”;经RT-PCR检测证实细胞“β”中已有两个目的基因的转录.在细胞“β”中,葡萄糖浓度为0.5 mmol/L和0.75 mmol/L时,胰岛素的分泌无显著性差异(P>0.05); 葡萄糖浓度为2.0 mmol/L,3.0 mmol/L,4.0 mmol/L, 5.0 mmol/L及6.0 mmol/L时,胰岛素的分泌无显著性差异(P>0.05);其余葡萄糖浓度条件下,胰岛素的分泌差异均有显著性意义(P<0.05).在单独表达胰岛素的HepG2细胞中,各葡萄糖浓度条件下,胰岛素的分泌均无显著性差异(P>0.05).说明在细胞“β”中获得了葡萄糖反应性胰岛素分泌,葡萄糖浓度约1.75-2 mmol/L时出现胰岛素分泌高峰. 结论:成功构建了具有生理性胰岛素分泌能力的“胰岛代理细胞”系.
- 郑宏庭邓华聪兰丽珍方芳
- 关键词：HEPG2细胞胰岛素分泌葡萄糖激酶放免法细胞克隆WESTERN-BLOT
- 稳定表达人胰岛素原突变基因的HepG2细胞构建及其胰岛素分泌被引量：1
- 2007年
- 目的构建稳定表达人胰岛素原突变(mutated human proinsulin,mhPINS)基因的HepG2细胞,将HepG2细胞改建为具有胰岛素分泌能力的"胰岛代理细胞"(artificial beta cell)。方法重组逆转录病毒载体pL-mhPINS-SN转包装细胞PA317,经G418筛选,NIH3T3细胞测定病毒滴度,获取高滴度的稳定产毒细胞克隆,以PCR进行鉴定。以mhPINS病毒感染HepG2细胞,经G418筛选,对HepG2/mhPINS细胞进行RT-PCR、Western blot、放免法鉴定,并行葡萄糖刺激的胰岛素分泌检测。结果所获HepG2/mhPINS细胞生长良好,RT-PCR获得286bp目的条带,Western blot检测可见34×103的特异性条带,放免法在其培养上清中检测到胰岛素与C肽,而HepG2/pLXSN细胞上述各项检测均为阴性。葡萄糖刺激的胰岛素分泌检测显示,HepG2/mhPINS细胞在不同葡萄糖浓度(0.1、10、20mmol/L)条件下引起的胰岛素分泌无显著性差异(P>0.05)。结论成功构建稳定表达mhPINS基因的HepG2细胞,其内获得成熟胰岛素的表达与分泌,但其胰岛素分泌对葡萄糖刺激缺乏反应。
- 郑宏庭邓华聪兰丽珍方芳刘金波李丙蓉蹇锐
- 关键词：逆转录病毒HEPG2细胞胰岛素
- 骨形成蛋白-9于2型糖尿病时在肝组织中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的研究2型糖尿病鼠肝组织骨形成蛋白-9(bone morphogenetic proteins-9,BMP-9)基因转录及蛋白表达的变化。方法将大鼠随机分为2型糖尿病模型组与正常对照组,分别于造模后5、10、20 d处死,以RT-PCR及Western-blot对肝组织BMP-9基因转录及蛋白表达水平进行检测与分析。结果2型糖尿病模型组BMP-9基因转录及蛋白表达水平与正常组相比均显著性降低(P<0.05);并且2型糖尿病大鼠5、10、20 d处死组BMP-9基因转录及蛋白表达水平呈逐步下降趋势。结论2型糖尿病大鼠肝组织BMP-9基因转录及蛋白表达水平较正常显著降低,这一变化可能与2型糖尿病的发生发展相关。
- 郑宏庭方芳邓华聪陈卫
- 关键词：2型糖尿病肝组织
- 内分泌临床教学中素质教育的探讨被引量：9
- 2007年
- 郑宏庭方芳
- 关键词：素质教育临床教学
- 局部放疗与球后注射治疗Graves眼病的临床疗效观察被引量：3
- 2004年
- 【目的】寻找治疗Graves眼病较为有效的方法 ,研究联合应用眶内局部放疗与长效糖皮质激素球后注射治疗Graves眼病的疗效。【方法】随机选取在本科住院治疗的Graves眼病患者 5 2例 90眼 ,根据治疗方法不同随机分为联合治疗组 (糖皮质激素球后注射治疗 +眶内放疗 ) 2 6例 4 6眼 ,对照组 (糖皮质激素球后注射治疗 ) 2 6例 4 4眼。治疗前后分别测量两组患者患眼的眼球突出度与睑裂宽度并观察症状及眼征情况。【结果】对照组治疗前后眼球突出度差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;睑裂宽度差异无显著性 (P >0 .0 5 )。联合治疗组治疗前后眼球突出度及睑裂宽度差异均有显著性 (均P <0 .0 5 )。同时 ,联合治疗组眼球突出度及睑裂宽度下降均较对照组明显 ,两组比较差异均有显著性 (均P <0 .0 5 )。联合治疗组症状改善率为 96 .2 % ,对照组症状改善率为 84 .6 %。【结论】联合应用眶内局部放疗与长效糖皮质激素球后注射治疗Graves眼病是一种较为有效的治疗方案 ,其治疗效果优于单独使用糖皮质激素。
- 郑宏庭方芳陈卫刘理冯晓莉徐静
- 多媒体技术在内分泌临床教学中的应用被引量：4
- 2007年
- 郑宏庭方芳陈卫徐梓辉徐静冯晓莉
- 关键词：多媒体内分泌学医学教育
