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揣侠

作品数：29 被引量：83H指数：5
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合作作者

文献类型

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  • 2篇学位论文
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  • 2篇科技成果

领域

  • 24篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学
  • 1篇文化科学

主题

  • 23篇病毒
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  • 17篇柯萨奇病毒
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机构

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作者

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传媒

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年份

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  • 2篇2005
  • 3篇2004
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排序方式：
B细胞趋化因子对CVB3融合基因疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1免疫效果的影响
2010年
目的:探讨B细胞趋化因子(B-lymphocyte chemoattractant,BLC)对柯萨奇病毒B3融合基因疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1免疫效果的影响。方法:将BALB/c小鼠随机分为4组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/BLC、pcDNA3/C3d3-sVP1和含pcDNA3/BLC与pcDNA3/C3d3-sVP1的混合质粒,于免疫后不同时间检测小鼠血清的中和抗体滴度、特异性CTL杀伤活性;以LD50的CVB3病毒液感染已免疫小鼠,检测小鼠血中病毒滴度,观察存活情况以评价各种疫苗的免疫保护作用。结果:小鼠的中和抗体滴度随免疫次数增加而提高,混合组中和抗体滴度(42.17±1.43)和特异性CTL杀伤率(41.3%±3.51%)均明显高于pcDNA3/C3d3-sVP1组(P<0.05),而血中病毒滴度低于pcDNA3/C3d3-sVP1组;经致死量CVB3感染后,pcDNA3/BLC和pcDNA3/C3d3-sVP1混合免疫的小鼠生存率达44%,生存率高于其他各组。结论:BLC可显著提高C3d3-sVP1基因诱导的特异性免疫应答,增强基因疫苗对机体的免疫保护作用。
高志云揣侠蓝佳明刘贵霞李剑张永红王永祥
关键词：柯萨奇病毒B3基因疫苗
免疫途径和佐剂对CVB3VP1蛋白免疫效果的影响被引量：4
2011年
目的:观察不同免疫途径和佐剂类型对柯萨奇病毒B组3型(Coxsackievirus group B type 3,CVB3)衣壳蛋白VP1免疫效果的影响。方法:将原核表达质粒pET-his/VP1转入E.coli BL21(DE3)pLysS中,用异丙基-1-硫代-β呋喃半乳糖苷(IPTG)诱导CVB3VP1蛋白的表达并进行纯化。首先采用不同的免疫途径(皮下,腹腔,肌肉)用VP1蛋白免疫小鼠,每组12只。然后另取小鼠分为PBS组和不同佐剂组(氢氧化铝、弗氏佐剂、Montanide ISA720),每组18只,采用肌肉注射途径免疫。每次每只小鼠注射50μg,共免疫3次,间隔3周。用ELISA和微量中和试验检测血清特异性IgG抗体和中和抗体。用CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性。用致死量的CVB3攻击后,检测血中病毒的滴度并观察小鼠的存活状况。结果:在大肠杆菌中成功表达CVB3VP1蛋白。三种免疫途径比较,肌肉注射组血清中和抗体和特异性IgG抗体的水平明显高于其他组(P<0.01)。采用肌肉注射免疫时,弗氏佐剂组Montanide ISA 720佐剂组的体液免疫和细胞免疫应答的水平明显高于氢氧化铝组(P<0.05);但血中病毒的滴度低于氢氧化铝组(P<0.05)。弗氏佐剂组小鼠的生存率好于氢氧化铝组(P<0.05)。结论:采用肌肉注射途径,并联合弗氏佐剂或Montanide ISA 720佐剂可以使CVB3VP1免疫获得较好的免疫效果。
温婵高志云蓝佳明闫立景揣侠李嘉李伟王永祥
关键词：柯萨奇病毒B组3型佐剂免疫途径小鼠
携带乙型肝炎病毒感染性克隆的四种转基因载体在体内外抗原表达分析
2012年
目的构建四种不同结构的1．3倍全基因乙型肝炎病毒（HBV）转基因载体，观察HBV抗原在体内外表达水平的差异。方法克隆1．3倍的HBV基因至慢病毒转基因质粒pCS—CG并取代其中的EGFP表达盒，构建四种结构的pCS—HBVl．3质粒，体外转染Huh7细胞和尾静脉高压水动力法注射C57 BL／6小鼠后，ELISA方法分别检测细胞上清和小鼠血清中HBsAg和HBeAg的表达。结果成功构建了四种不同结构的pCS—HBV1．3质粒，四种质粒HBVS抗原与e抗原在体内外的表达趋势一致，即乙肝抗原表达水平在正向插入的转基因质粒中高于反向插入；HBV抗原表达水平还与载体序列中RRE调控元件和cPPT调控元件前的基因序列长度有关。结论筛选获得了可在体内外高效表达HBV抗原的转基因载体可应用于乙肝病毒体内外感染模型的建立与应用。
揣侠陈红杨扬王文文波王刚黄保英邓瑶谭文杰
关键词：基因组
小鼠IFN-γ基因佐剂对分泌型柯萨奇病毒B3 VP1核酸疫苗免疫作用的影响被引量：4
2006年
目的构建小鼠IFN-γ真核表达质粒,观察其对分泌型柯萨奇病毒B3(CVB3)核酸疫苗的影响.方法以RT-PCR扩增小鼠IFN-γ基因,构建真核表达重组质粒pcDNA3/mIFN-γ,检测其在cos-7细胞内的表达;将分泌型pcDNA3/sVP1,pcDNA3/sVP1+pcDNA3/mIFN-γ肌注免疫小鼠,每2wk注射1次,共3次,每次免疫后13d取血测血清抗体水平.末次免疫后2wk,以500TCID50的CVB3腹腔内感染,观察小鼠的存活情况.结果成功构建了pcDNA3/mIFN-γ并能有效表达;pcDNA3/sVP1组和pcDNA3/sVP1+pcDNA3/mIFN-γ组均能诱导小鼠产生中和抗体,抗体滴度随免疫次数的增加而提高,但两组小鼠抗体滴度和生存率无显著性差异;混合质粒注射组血清的病毒滴度明显低于pcDNA3/sVP1组,且心肌病理损伤明显减轻.结论IFN-γ作为基因佐剂,在一定程度上增强了分泌型CVB3VP1基因疫苗的免疫保护作用.
揣侠高志云房文亮金玉怀张永红谢立新王永祥
关键词：小鼠
柯萨奇病毒B组3型VP1蛋白的原核表达及免疫效果研究被引量：3
2009年
目的:用原核细胞表达柯萨奇病毒B组3型VP1蛋白并观察其免疫效果。方法:构建原核表达质粒pET-his/VP1,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导VP1蛋白的表达并纯化。BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组。实验组腹腔注射VP1蛋白,对照组注射PBS,每3周免疫1次,共免疫3次。每次免疫后2周取血清,用微量中和试验法检测血清CVB3特异性中和抗体滴度;末次免疫后3周,每组随机取3只小鼠,用细胞计数试剂盒检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;每组另随机抽取3只腹腔注射3LD50CVB3,第7天检测血中病毒滴度;用致死量的CVB3攻击每组剩余12只小鼠,观察免疫保护作用。结果:实验组小鼠血清中和抗体滴度随免疫次数增加而提高(P<0.05),第3次免疫后中和抗体滴度达70.79±1.31,明显高于PBS对照组(P<0.05);非特异性淋巴细胞增殖活性亦明显高于PBS组(P<0.05),但特异性淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性两组间无统计学差别(P>0.05);CVB3攻击后,实验组小鼠血中病毒滴度显著降低,生存率达33.33%,而PBS组小鼠无存活,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VP1蛋白可显著增强小鼠的体液免疫应答水平,提高致死量CVB3感染后小鼠的生存率。
李伟蓝佳明李剑金玉怀高志云揣侠刘贵霞张永红王永祥
关键词：柯萨奇病毒B组亚单位疫苗免疫应答原核表达
以BAC为基础的水痘-带状疱疹病毒的感染性克隆技术及其应用被引量：2
2010年
水痘-带状疱疹病毒(VZV)属于疱疹病毒科α亚科,其原发感染为水痘,潜伏再度激活则引起带状疱疹。目前对其基因功能和疫苗的减毒机制尚不十分清楚。细菌人工染色(BAC)是一种新的用于大分子DNA克隆的载体系统,它具有容量大、遗传稳定、操作简单等优点。将VZV全基因组克隆至BAC系统构建成VZV的感染性克隆,并利用现代基因修饰技术可极大促进对该病毒的研究。就近年来以BAC为基础VZV感染性克隆技术的建立和应用做一综述。
揣侠谭文杰
关键词：感染性克隆
IL-2、15、22基因对CVB3 VP1 DNA疫苗免疫效果的影响被引量：1
2005年
目的观察白细胞介素2(Interleukin2,IL2)、白细胞介素15(Interleukin15,IL15)和白细胞介素22(Interleukin22,IL22)基因对柯萨奇病毒(CoxasckievirusB3,CVB3)VP1DNA疫苗诱导小鼠免疫应答及保护作用的影响。方法取雄性BALBc小鼠,随机分为6组,每组20只,分别肌内注射盐水、pcDNA3、pcDNA3VP1、pcDNA3IL2+pcDNA3VP1、pcDNA3IL15+pcDNA3VP1和pcDNA3IL22+pcDNA3VP1,每周1次,共3次,每次免疫后6d取血清用微量中和试验检测CVB3中和抗体,3次免疫后用800TCID50CVB3感染小鼠,观察小鼠的生存时间和生存率。结果pcDNA3VP1、pcDNA3IL2+pcDNA3VP1和pcDNA3IL15+pcDNA3VP1组均能诱导小鼠产生中和抗体,抗体滴度随免疫次数增加而提高。病毒攻击后,各组的生存率差异无显著意义,pcDNA3IL2+pcDNA3VP1和pcDNA3IL15+pcDNA3VP1组较其他4组生存时间明显延长。pcDNA3IL22+pcDNA3VP1组虽也能诱导小鼠产生中和抗体,但抗体滴度和生存情况无明显变化。结论IL2、IL15基因对CVB3VP1DNA疫苗诱导小鼠产生免疫应答和免疫保护有一定的增强作用,而IL22基因无明显作用。
房文亮牛庆茂金玉怀揣侠王永祥
关键词：DNA疫苗IL-2VP1基因免疫效果免疫次数
增强柯萨奇病毒B3 VP1核酸疫苗免疫效果的研究
王永祥金玉怀揣侠房文亮王晓凌方艳辉赵娜韩小艳高志云蓝佳明吴淑慧刘贵霞于丹军张永红谢立新
该课题应用分子生物学、病毒学、免疫学、医学信息学等各学科的最新发展，深入研究了增强CVB3 VP1 核酸疫苗免疫效果的方法，构建了真核表达质粒pcDNA3/VP1，肌肉注射免疫小鼠后可诱导产生中和抗体，为了提高免疫效果进...
关键词：
关键词：核酸疫苗免疫效果
柯萨奇病毒性心肌炎的研究进展被引量：19
2004年
揣侠陆春雨王永祥
关键词：柯萨奇病毒心肌炎
一种含poly I:C佐剂的新型乙肝疫苗制剂
本发明涉及一种含poly I:C佐剂的新型乙肝疫苗制剂。所属技术领域：1.生物技术2.基因工程疫苗。本发明涉及一种乙型肝炎疫苗的新配方，该疫苗的主要成分为基因工程乙型肝炎病毒表面抗原、铝佐剂、聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸(pol...
谭文杰揣侠陈红文波阮力
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