徐引弟
- 作品数：262 被引量：761H指数：13
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划青年科技基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型PCR方法的建立及初步应用被引量：1
- 2016年
- 为了建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,本研究根据胸膜肺炎放线杆菌从编码荚膜多糖的碱基序列设计1对引物,扩增特异性的720 bp核酸片段。结果表明,以APP为模板,均能扩增出与预期一致的1条720 bp核酸片段,所得PCR产物经测序,与Gen Bank已发表的胸膜肺炎放线杆菌血清型6型的同源性达99%以上。本研究建立了PCR检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,该方法的建立为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病的诊断和防治及鉴定提供了基础。
- 李海利徐引弟朱文豪张青娴游一郎利敏王克领张立宪侯自花
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌
- 伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白gK基因的克隆、序列分析以及在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2003年
- 根据伪狂犬病病毒 (PRV) Ka株序列 ,合成 1对包含 g K基因完整编码区的引物 ,以 PRV Ea株 Bam H 5′片段为模板 ,扩增出 0 .9kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到 p Bluescript SK+ 中 ,构建了重组质粒 p SKg K,用双脱氧末端终止法进行序列测定 ,并同国外 Ka株进行比较。结果表明 ,Ea株 g K基因全长 939bp,编码 313个氨基酸 ,与 Ka株比较 ,Ea株 g K基因有 2 2处点突变 ,但无插入突变和缺失 ,同源性达 97.78%。将 g K基因克隆到原核表达载体p GEX- 2 T中 ,构建了 g K全基因原核表达载体 p2 Tg K939。再用 Bam H 、Xho 酶切 p2 Tg K939,回收 5 88bp g K小片段 ,克隆到原核表达载体 p GEX- KG中 ,构建了 g K部分基因原核表达载体 p KGgk5 88。经 IPTG诱导 ,g K全基因不表达 ,而 g K部分基因表达约 4 0 0 0 0融合蛋白。用 PRV高免血清经 Western blotting证明 ,g K有免疫原性。提取 g K包涵体并制备高免血清 ,EL ISA检测抗体效价为 1∶ 6 4
- 徐引弟陈焕春肖少波何启盖钱平
- 关键词：糖蛋白大肠杆菌伪狂犬病病毒基因表达基因克隆
- 一种直接PCR检测猪支原体肺炎病原的试剂盒及其应用
- 本发明涉及一种试剂盒及其应用，尤其涉及一种直接PCR检测猪支原体肺炎病原的试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明的试剂盒包含以下试剂：裂解液，PCR扩增试剂，阳性对照和阴性对照。该试剂盒能快速、准确的检测出猪支原体肺炎...
- 李海利徐引弟王治方张青娴朱文豪方剑玉侯自花
- 文献传递
- 华北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒变异分析被引量：4
- 2017年
- 为了解华北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异情况,通过对2014—2016年从河南、河北、山东、山西4省采集的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病料进行检测,将扩增得到的PRRS阳性样品的ORF5基因进行测序,分析华北地区2014—2016年PRRSV的变异情况。结果表明,2014—2016年华北地区流行毒株与国内外代表性毒株核苷酸同源性在84.6%~99.8%;抗原位点比对结果显示,变异株中和表位第37—44位氨基酸为SH(I/L/F)QLIY(N/K),诱骗表位27—30位氨基酸为(V/A)L(V/A)N;系统进化树分析表明,以CH-1a为代表的变异株、以VR-2332为代表的经典毒株以及NADC30毒株在华北地区同时存在。可见,华北地区PRRSV流行情况复杂。
- 焦文强白献晓徐引弟王克领郎利敏朱文豪李海利张青娴张立宪游一王治方许峰
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5进化
- 猫科动物专用导尭针
- 本实用新型公开了一种猫科动物导尭针，包括针座、针管和针头，所述针头包括端部的球形头，其表面为球面，在球形头的后侧为膨胀体，膨胀体的宽度大于球形头直径，厚度不大于球形头直径，针口位于膨胀体一侧。本实用新型能够一次准确地对猫...
- 师志海王文佳李万利郎利敏徐引弟孟红丽兰亚莉徐照学
- 文献传递
- 兽用滴鼻注射器组件
- 本发明公开了一种兽用滴鼻注射器组件，基柄和摆柄的下端通过转轴铰接在一起，基柄上部的穿孔用于插装注射筒，穿孔上部的上延长部通过销轴铰接有压板,用于固定注射筒，摆柄用于滑动安装注射器活塞杆的杆后座。本发明能够与各种注射器配合...
- 焦文强陈直吴胜军王克领王治方徐引弟许峰
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型快速直接PCR检测方法的建立与流行病学调查被引量：7
- 2018年
- 为了解河南省猪圆环病毒2型(PCV2)的流行病学情况,参考Gen Bank的PCV2 ORF2的序列,设计1对引物,建立PCV2的快速直接PCR检测方法,并进行特异性和敏感性试验。运用该方法对2016年5月至2017年5月采集到的河南省共125份疑似猪圆环病毒2型的病料进行PCV2检测,阳性样品测序,分析河南省PCV2的遗传变异情况。结果显示,建立的PCR检测方法快速、特异、敏感,适用于临床检测或流行病学调查;所检测的125份样品中,55份样品为PCV2阳性,阳性率高达44%。阳性结果序列分析显示,核苷酸序列同源性在88.7%~99.8%,42份在PCV2b基因群。结果表明,河南省PCV2感染率较高,PCV2b为流行血清亚型,病毒变异严重。
- 徐引弟闫静娟焦文强焦文强张青娴王治方李海利张青娴
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2
- 伪狂犬病病毒Ea株gE基因主要抗原区在巴斯德毕赤酵母中的表达被引量：8
- 2002年
- 伪狂犬病病毒gE蛋白是一种重要的诊断抗原 ,可用于伪狂犬病根除计划中的鉴别诊断。为了获得大量的抗原 ,将编码gE主要抗原区域的基因片段插入毕赤酵母表达载体中 ,得到的重组表达载体转化GS1 1 5酵母 ,通过G41 8抗性筛选得到一株多拷贝的重组酵母 ,经甲醇诱导表达了截短的gE蛋白 ,并分泌到胞外。Westernblotting分析显示表达的蛋白大小为3 3kD。ELISA结果表明表达蛋白具有良好的抗原性 ,重组酵母的诱导培养上清不需纯化可直接作为抗原检测gE的抗体 。
- 覃雅丽陈焕春唐勇何启盖徐引弟
- 关键词：伪狂犬病病毒GE基因巴斯德毕赤酵母
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的检测被引量：4
- 2020年
- 为研究河南省及临近周边地区的规模化猪场猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia)放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)氨基糖苷类抗生素药物的耐药情况,调查了河南省及周边地区56个规模化猪场,对猪的肺脏和气管中分离鉴定的85株APP进行了研究。血清型鉴定结果显示,分离菌株为1、3、7、8、9、10、12、15型APP,采用纸片扩散法对分离株进行了耐药表型鉴定和采用PCR方法对氨基糖苷类抗生素药物耐药基因(aac3-Ⅳ、aac3-Ⅱc、ant2-Ⅰa)进行了检测。药敏试验结果显示,APP对氨基糖苷类抗生素药物耐药基因(aac3-Ⅱc)和(aac3-Ⅳ)的耐药率分别为57.6%(49/85)、81.2%(69/85);未检测出ant2-Ⅰa耐药基因。
- 李海利冯丽丽王英华徐引弟张青娴王治方朱文豪许峰游一王克领
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌氨基糖苷类抗生素耐药表型耐药基因
- 河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学研究被引量：1
- 2018年
- 为了解河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学情况,2015—2017年应用染色镜检、生化试验和PCR检测等方法进行支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)的分离与鉴定,从全省规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状猪的1 022份样品中,共分离鉴定到82株Bb,总分离率为8.0%。其中,有30份组织病料只分离出波氏杆菌,52份共感染病料以S.suis,HPS,E.coli,Pm居多,且鼻拭子分离率低于肺脏组织。说明Bb在河南省猪群的感染十分普遍,且与其他细菌协同感染情况非常普遍,在猪萎缩性鼻炎的发生中具有重要作用。
- 张青娴徐引弟徐引弟朱文豪王治方李海利朱文豪郎利敏焦文强游一李海利郑万录方剑玉
- 关键词：猪源支气管败血波氏杆菌流行病学
