张艳艳 作品数:92 被引量:141 H指数:7 供职机构: 新疆农垦科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 新疆生产建设兵团科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
牛巴贝斯虫病诊断技术研究进展 被引量:5 2021年 牛巴贝斯虫病是一种寄生于红细胞内的巴贝斯虫所引起的血液原虫病,可导致红细胞裂解从而出现溶血性贫血,严重时可导致牛的死亡。该病的流行情况与其传播媒介硬蜱的消长、活动规律密切相关,具有明显的季节性和地方流行性,对于世界的畜牧业造成了极大的经济损失。因此,能够及早地检测到巴贝斯虫显得尤为重要。论文在查阅国内外文献的基础上,对牛巴贝斯虫病的诊断技术进行了综述,以期为牛巴贝斯虫病的检测及防控提供参考。 张峰 王正荣 蒋建军 薄新文 张艳艳关键词:巴贝斯虫病 血清学试验 扁虫中Wnt信号通路的作用 高度保守的Wnt信号通路调控动物的生长、发育、疾病、衰老和死亡等许多生命过程。Wnt/β-catenin信号通路的主要成员包括:Wnt家族分泌蛋白(Wnt)、跨膜受体卷曲蛋白(Frizzled,Frz/Fzd)、β-连接... 王智欣 薄新文 王正荣 张艳艳关键词:WNT信号通路 涡虫 吸虫 绦虫 文献传递 BOULE基因在精子发生中的作用及其机制 DAZ基因家族,包括DAZ、DAZL和BOULE基因,是精子生成的重要调控因子。DAZ基因缺失可出现少精子症或无精子症,从而导致雄性不育。BOULE基因作为DAZ家族重要的一员,是精子发生过程中调控减数分裂的关键因子。B... 卢平萍 王正荣 张艳艳 薄新文关键词:细粒棘球绦虫 文献传递 细粒棘球绦虫nanos基因的分子克隆及序列分析 2015年 为了研究细粒棘球绦虫nanos基因的序列及结构并为疫苗及新的药物研制提供靶标,试验采用注释并克隆细粒棘球绦虫nanos基因的方法,并对其序列结构进行分析;利用在线生物信息学软件分析细粒棘球绦虫nanos基因的序列结构及与其他虫属的进化关系。结果表明:细粒棘球绦虫nanos基因ORF为687 bp,编码228个氨基酸,理论分子质量为58 090.6 u,等电位点为5.08;细粒棘球绦虫NANOS蛋白由3个α螺旋和4个β片层组成;发现共有1个丝氨酸位点,1个苏氨酸位点,2个酪氨酸位点,可能的磷酸化位点是7,8,13,18,19,23位。说明该基因可能在细粒棘球绦虫生殖细胞发育过程中发挥着重要作用。 叶倩 马勋 薄新文 王正荣 张艳艳关键词:细粒棘球绦虫 氨基酸 磷酸化位点 生殖细胞 Th1/Th2型免疫反应相关基因在巨噬细胞RAW264.7应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激时的表达谱研究 被引量:2 2022年 本研究旨在解析巨噬细胞RAW264.7在应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激时其Th1、Th2型免疫反应相关基因的差异表达规律,为进一步揭示巨噬细胞抗细粒棘球绦虫原头蚴免疫调控机制奠定理论基础。将细粒棘球绦虫原头蚴和巨噬细胞RAW264.7共培养6、24、72 h,收集RAW264.7细胞,提取总RNA,构建cDNA文库,利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明,当细粒棘球绦虫原头蚴(PSC)与巨噬细胞RAW264.7共培养6、24、72 h后,和PBS对照组相比,PSC处理组分别有848、3745和7009个基因的表达出现显著差异变化,其中上调的基因分别为415、1159和2237个,下调的基因分别为433、2586和4772个。对Th1、Th2型免疫反应相关基因的差异表达分析结果显示,当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养6 h时,共有31个Th1、Th2型免疫反应相关基因的表达出现显著变化,其中15个基因出现显著上调,16个出现显著下调。当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养24 h时,共有111个Th1、Th2型免疫反应相关基因的表达出现显著变化,其中34个基因出现显著上调,78个出现显著下调。当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养72 h时,共有212个Th1、Th2型免疫反应相关基因的表达出现显著变化,其中50个基因出现显著上调,162个出现显著下调。这些差异表达的基因主要包括富亮氨酸重复序列蛋白LRRCs、G蛋白偶联受体GPCRs、C型凝集素受体CLRs、清道夫受体SRs等,同时还有一些模式识别受体PRR下游信号分子以及一些PRR下游效应分子。同时分析结果显示,当细粒棘球绦虫原头蚴与巨噬细胞RAW264.7共培养6、24 h时,其Th1型的免疫反应相关的细胞因子编码基因,诸如Tnfrsf1a、Ifnar1的Tnfrsf12a等,它们的表达显著上调;而72 h时,其Th2型免疫反应相关细胞因子编码基因,诸如IL4和IL6等,它们的表达显著上调。同时研究随机选取了部分差异表达的基� 王正荣 马勋 张艳艳 孟季蒙 薄新文关键词:细粒棘球绦虫 细粒棘球绦虫EGR-03347基因的原核表达及其对小鼠免疫效果的初步研究 被引量:2 2021年 为了阐明细粒棘球绦虫3-羟基酰基-CoA脱氢酶基因(EGR-03347)生物学功能及其免疫原性,本研究通过分析已发表细粒棘球绦虫原头蚴高通量mRNA测序数据,从中筛选出细粒棘球绦虫脂肪酸代谢主要的调控基因之一—EGR-03347,将其克隆于原核表达载体pET-32a中,构建的重组质粒经诱导、纯化后通过SDS-PAGE及western blot检测。结果显示,重组EGR-03347蛋白(rEGR-03347)以包涵体的形式存在,分子量约47 ku;western blot结果显示,纯化的蛋白可与犬棘球蚴阳性血清特异性结合,具有较好的反应原性。将纯化的rEGR-03347与弗氏佐剂等体积混合并乳化后对小鼠经皮下多点注射(50μg/只),共免疫4次,分别于首免后不同时间采血分离血清,经ELISA检测小鼠血清抗体水平;同时采用qPCR方法检测首免后不同时间小鼠脾细胞因子(IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ)的转录水平。结果显示,随着免疫次数的增加,免疫组小鼠血清抗体水平逐渐升高,且在首免后56 d,即第4次免疫后抗体水平达到峰值,与对照组(PBS及佐剂组)相比差异极显著(p<0.01)。qPCR结果显示,rEGR-03347可诱导小鼠产生IFN-γ、IL-4和IL-10细胞因子,其中免疫后14 d~56 d rEGR-03347可致Th1型细胞因子IFN-γ的表达上调,免疫后56 d,可诱导Th 2型细胞因子IL-4和IL-10的表达上调,表明rEGR-03347可诱导小鼠产生Th1和Th2两种类型的免疫反应。综上,本研究首次初步证明细粒棘球绦虫EGR-03347具有作为诊断抗原及疫苗候选抗原的潜力,为后期其诊断方法及疫苗研发提供了参考依据。 县锦雯 王炜烨 王芸菲 张艳艳 马勋 孟季蒙 王正荣 薄新文关键词:细粒棘球绦虫 原核表达 蛋白纯化 细粒棘球绦虫EGR-07243和EGR-07244基因生物信息学分析及原核表达 被引量:1 2023年 【目的】分析细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)2个Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因EGR-07243和EGR-07244的生物信息学特性,并进行原核表达,以期检测EGR-07243和EGR-07244蛋白的免疫原性。【方法】利用PCR扩增EGR-07243、EGR-07244基因全长序列,采用生物信息学软件对EGR-07243、EGR-07244蛋白的理化性质、结构特点及亲缘进化关系进行分析;构建重组质粒pET32a-EGR-07243、pET32a-EGR-07244并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用SDS-PAGE检测蛋白的表达,并通过Western blotting对蛋白进行抗原性分析。【结果】EGR-07243基因全长228 bp,编码75个氨基酸,蛋白分子式为C 686 H 1146 N 228 O 292 S 63,相对分子质量约19258,含有3个B细胞抗原表位,理论等电点为5.30,脂肪系数为17.98,亲水性为0.714,为稳定蛋白;EGR-07244基因全长228 bp,编码75个氨基酸,蛋白分子式为C 675 H 1124 N 228 O 287 S 56,相对分子质量约18800,含有3个B细胞抗原表位,理论等电点为5.32,脂肪系数为20.61,亲水性为0.689,为稳定蛋白。二者氨基酸序列相似性为72.00%。二者与绦虫属的功能结构域氨基酸序列一致性为95%以上,亲缘关系极近;而与人的功能结构域氨基酸序列一致性为46.3%,亲缘关系较远。通过双酶切鉴定及测序分析证明,pET32a-EGR-07243、pET32a-EGR-07244重组质粒构建成功。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后成功诱导表达蛋白,Western blotting结果显示,2种蛋白能被感染原头蚴的犬阳性血清识别且不被健康犬血清识别,表明其均具有良好的反应原性。【结论】EGR-07243和EGR-07244蛋白能够作为预防细粒棘球绦虫感染的疫苗免疫靶点,结果为抗包虫病疫苗候选分子的筛选提供了试验材料。 贾新月 马静 张艳艳 马勋 王正荣 薄新文关键词:细粒棘球绦虫 生物信息学分析 原核表达 一种绦虫染色固定装置 一种绦虫染色固定装置,包括底板(3)其特征在于;所述底板(3)中部设有若干染色孔B(5),所述染色孔B(5)为通孔,且一端直径小于另一端,底板(3)上方设有上盖板(1),所述上盖板(1)中部设有若干与染色孔B(5)对应的... 王正荣 薄新文 张艳艳 孟季蒙 刘乙 卢平萍 徐梦飞微口膜壳绦虫不同发育阶段及成虫不同节片形态结构的观察 2023年 为观察人工感染小鼠肝胆管中微口膜壳绦虫Hymenolepis microstoma的组织形态结构,以及微口膜壳绦虫似囊尾蚴与虫卵的组织形态结构,本研究解剖受感染的面粉甲虫,收集似囊尾蚴,每只小鼠灌胃新鲜采集的似囊尾蚴50个。感染15 d后,取小鼠肝胆管中微口膜壳绦虫成虫,琼脂糖预包埋后制备石蜡切片,经苏木素-伊红(HE)染色后,采用光学显微镜观察并拍照。解剖微口膜壳绦虫成虫孕节,收集虫卵,使用共聚焦显微镜观察似囊尾蚴与虫卵并拍照。结果显示,在光学显微镜下微口膜壳绦虫成虫头节呈球形,具有4个吸盘和1个顶突;颈节位于头节的后端;未成熟节片内主要分布有肌肉、渗透调节管以及部分未发育成熟的生殖器官;成节内有睾丸、卵巢、卵黄腺、子宫等雌性和雄性生殖器官;孕节内其他生殖器官则逐渐退化,唯有子宫扩大并充满虫卵。共聚焦显微镜下观察到似囊尾蚴呈梨形或葫芦形;虫卵呈圆球形,胚膜内含有1个六钩蚴。本研究明确了微口膜壳绦虫不同发育阶段以及成虫不同节片的组织形态结构,为进一步研究其发育学与病原学奠定基础。 马静 张艳艳 贾新月 马勋 王正荣 薄新文关键词:生殖器官 石蜡切片 HE染色 新疆奎屯部分地区奶牛球虫感染现状调查 被引量:9 2014年 为调查奎屯地区奶牛球虫感染与流行现状,试验选取奎屯不同地区的5个规模化奶牛养殖场,对2~3月龄、6月龄、1~2岁、5~6岁的牛直肠采集粪便共290份进行球虫检测。结果发现被检5个规模化奶牛场均存在球虫感染,感染率最高为58.14%;共检出8种艾美耳属球虫,分别是牛艾美耳球虫(Eimeriabovis)(8.62%)、邱氏艾美耳球虫(Eimeriazuernii)(9.31%)、椭圆艾美耳球虫(Eimeria ellipsoidalli)(11.03%)、柱状艾美耳球虫(Eimeria cylindrce)(5.86%)、阿拉巴艾美耳球虫(Eimeria alabamensis)(4.13%)、亚球艾美耳球虫(Eimeria subspherica)(9.31%)、奥博艾美耳球虫(Eimeria auburnensis)(5.17%)、加拿大艾美耳球虫(Eimeria canadensis)(3.44%),且优势虫种为椭圆艾美耳球虫(Eimeria ellipsoidalli)、邱氏艾美耳球虫(Eimeria zuernii)、亚球艾美耳球虫(Eimeriasubspherica)、牛艾美耳球虫(Eimeriabovis)。 蒋业慧 王正荣 张艳艳 薄新文关键词:奶牛 球虫 感染率