张力
- 作品数：15 被引量：10H指数：2
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省高等教育教学改革工程项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学语言文字更多>>
- 全细胞胞质内注射法生产猪重构胚的研究(简报)被引量：4
- 2008年
- 自从1997年克隆羊“Dolly”出生以来。体细胞核移植技术得到广泛应用,已经有十余种克隆哺乳动物出生，但克隆效率仍然很低。核移植方法的不够完善是其重要原因之一。传统的核移植方法——电融合法和胞质内注射法虽然都取得了成功。但还存在操作复杂及需要辅助设备等问题。为了能够找出一种既容易操作，又不需要特殊设备的核移植方法，本研究对胞质内注射技术进行了改进,尝试了一种新的核移植方法——非Piezo辅助的全细胞胞质内注射法，即不通过Piezo辅助。不破坏供体细胞膜直接将供体细胞注入卵母细胞内，并且比较了这种方法与电融合法对猪体细胞核移植效率的影响。探讨了非Piezo辅助的全细胞胞质内注射法在猪体细胞核移植上的可行性。
- 孔庆然罗一博田江天王振坤张力刘忠华
- 关键词：体细胞核移植
- 湖南省蜱及5种蜱传病原研究
- 2023年
- 蜱传病呈全球分布,危害人类和动物健康。为了研究湖南省娄底市现存蜱媒病原体,于2021—2022年在湖南省娄底市采集1395只微小牛蜱样本,提取蜱样品基因组DNA。选取蜱线粒体COI基因扩增特异性的基因片段,对微小牛蜱进行鉴定。为了对该蜱携带的病原进行检测,采用PCR方法对立克次体ompA和gltA基因,无形体groEL和23S rRNA基因,埃立克体groEL和16S rRNA基因,螺旋体16S rRNA和23S rRNA基因进行扩增,对阳性产物进行克隆测序,测序获得的基因序列进行系统发育分析来确定病原的基因型。结果显示,从蜱样本中检测出5种蜱传细菌病原,包括敬信立克次体(Candidatus Rickettsia jingxinensis)、中央无形体(Anaplasma centrale)、扁平无形体(Anaplasma platys)、米氏埃立克体(Ehrlichia minasensis)和宫本疏螺旋体(Borrelia miyamotoi)。其中敬信立克次体、米氏埃立克体和宫本疏螺旋体阳性率均为2.16%,扁平无形体阳性率为0.30%,中央无形体阳性率为5.79%。本研究利用物种鉴定与分子生物学相结合的方法,从分子流行病学角度解析这些病原体在蜱体内存在及流行情况,并且在湖南省蜱中检测到扁平无形体和宫本疏螺旋体两种人兽共患病原体,可为湖南省的虫媒疾病的研究和防控提供数据参考。
- 丁立张力刘全
- 关键词：立克次体无形体埃立克体螺旋体
- 应用双重PCR技术鉴定猪胎儿性别及其细胞系建立被引量：5
- 2008年
- sry和zfy/x是与哺乳动物性别决定有关的重要基因。本试验针对猪sry基因设计了两对PCR引物,以zfy/x为内参基因,利用双重PCR技术对6只30d左右猪胎儿的性别进行鉴定。结果表明,所有的6个样品都有447bp(雄性)或445bp(雌性)的zfy或zfx序列的扩增带,而采用两对不同的引物对sry序列扩增后,有1个样品出现241bp和166bp的扩增带为雄性,其余的无特异性扩增带为雌性,然后采用胶原酶消化培养法建立已知性别的猪胎儿成纤维细胞系。该方法具有简单、快速、准确的特点,为转基因克隆动物研究中尽早转染目的基因以及培养特定性别的胎儿成纤维细胞系提供了可靠的依据。
- 尹智孔庆然格日乐其木格王振坤张力刘忠华
- 关键词：双重PCRSRY性别鉴定
- siRNA-757干扰旋毛虫Ts-ODC基因对其抗酸能力的影响
- 2023年
- 旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最佳干扰siRNA分子及最佳干扰条件;并在pH 1.5、2.5、4.5和6.6的条件下将肌幼虫分别培养0.5、1和2 h,从肌幼虫Ts-ODC基因转录水平、酶活性及存活率等方面分析Ts-ODC基因干扰对旋毛虫肌幼虫抗酸能力的影响;将Ts-ODC基因被干扰的旋毛虫肌幼虫感染小鼠,在7和42 d时分别收集成虫和肌幼虫,分别计算其减虫率;将子一代肌幼虫在pH 2.5的酸性条件下培养2 h,计算其存活率,对Ts-ODC基因干扰的遗传性进行分析。结果显示,Ts-ODC siRNA-757为最佳干扰分子,转染12 h、浓度为2μmol·L^(-1)培养3 d时为最佳干扰条件;各组pH 2.5培养2 h时Ts-ODC基因转录水平最高,pH 1.5培养2 h时虫体的存活率明显低于其他培养条件(P<0.01),pH 4.5培养0.5 h时虫体体内酶活性最高;转染Ts-ODC siRNA-757的肌幼虫接种小鼠后,7 d时成虫和42 d时肌幼虫的减虫率分别为58.95%和65.91%;其子一代肌幼虫在pH 2.5的培养液内培养2 h时其存活率为49%。综上表明,旋毛虫肌幼虫体内具有鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究首次通过siRNA技术干扰旋毛虫肌幼虫Ts-ODC基因,且证实干扰Ts-ODC基因可降低肌幼虫抗酸能力,为后期旋毛虫病的防治提供新思路。
- 薄禄琪王雪莹侯嘉茗张力张鉴慧阮入琳张博涵王爽宋铭忻张子群
- 关键词：旋毛虫鸟氨酸脱羧酶RNA干扰
- 中国高校学生英语语调习得现状与教学对策
- 2020年
- 本文总结了中国高校英语学习者的语调学习现状，描述了英语语调学习问题：调群切分错误、调核误置、调型运用失
误等功能性错误。针对以上问题，提出了高校英语语调教学训练对策：结合传统的通过听辨感知模仿操练校正语音的方法和语音
实验软件可视化教学。
- 张力张新勇马海燕
- 关键词：英语语调实验语音学
- 猪Nanog基因四环素诱导干扰载体的构建和鉴定
- 2011年
- Nanog基因是在早期胚胎和干细胞等多能性细胞中特异表达的重要基因,但有关猪Nanog基因功能的相关研究甚少。四环素诱导干扰载体是一种可通过四环素等药物条件性诱导干扰目的基因的载体,尤其适用于在发育过程中起着关键作用的基因沉默。常规的四环素干扰系统为二元载体,与一元载体相比获得针对特定基因干扰的稳定细胞系所需周期更长。首先通过构建pGenesil1.0-shRNA重组干扰载体,瞬时转染稳定过表达猪Nanog基因的猪胎儿成纤维细胞后通过Realtime-PCR筛选出干扰效率可达80%以上的干扰片段。之后将筛选得到的干扰片段插入到改造的一元四环素诱导干扰载体TREsilencer,对稳定表达猪Nanog基因的猪胎儿成纤维细胞进行了瞬时转染。实验分别通过光密度检测以及Realtime-PCR检测了不同浓度doxycycline的诱导效率和干扰效率。结果表明,所构建的四环素诱导干扰载体TREsilencer-shRNA5随着四环素浓度的增加,诱导Nanog基因的干扰效率增加,在处理浓度为1μg/ml时干扰效率可达70%以上,为后续得到可诱导的稳定干扰猪Nanog基因的细胞系和进一步研究猪Nanog基因功能奠定了基础。
- 张力罗一博牟彦双朱江李慧刘忠华
- 关键词：四环素NANOG
- PiggyBac转座子介导EGFP在猪体细胞和克隆胚胎中的表达
- PiggyBac转座子是来源于鳞翅目昆虫Trichoplusia ni.的DNA转座子,因其可以携带长达14kb的DNA片段在多个物种的基因组上进行转座,所以可以作为良好的遗传操作工具。本实验以EGFP为标记基因,转座子...
- 罗一博张力武美玲朱江刘忠华
- 关键词：PIGGYBAC猪体细胞克隆胚胎转基因
- 文献传递
- 猪Nanog基因在成纤维细胞与克隆胚胎中的过表达研究
- Nanog是在早期胚胎发育和干细胞多能性维持中起到关键作用的基因之一。在大型哺乳动物中,有关Nanog基因功能的研究甚少。原因之一是目前为止仍未建立起真正的胚胎干细胞系并且缺乏类似在小鼠和人胚胎干细胞中对相关转录因子的细...
- 张力
- 关键词：NANOG基因基因克隆核移植
- 文献传递
- 一种旋毛虫间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种旋毛虫间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中包含有旋毛虫海藻糖酶(TsTRE)重组蛋白包被的酶标板。本发明通过包被纯化的TsTRE蛋白，优化建立了旋毛虫的间接ELISA抗体检测试剂盒，后使用...
- 宋铭忻侯嘉茗王雪莹薄禄琪张鉴慧张博涵阮入琳张力王爽
- 猪Nangog基因在成纤维细胞与克隆胚胎中的过表达研究
- Nanog是在早期胚胎发育和干细胞多能性维持中起到关键作用的基因之一。在大型哺乳动物中,有关Nanog基因功能的研究甚少。原因之一是目前为止仍未建立起真正的胚胎干细胞系并且缺乏类似在小鼠和人胚胎干细胞中对相关转录因子的细...
- 张力
- 关键词：成纤维细胞胚胎克隆基因表达
- 文献传递
