张丹
- 作品数:5 被引量:34H指数:2
- 供职机构:南京工业大学食品与轻工学院更多>>
- 发文基金:江苏省农业科技自主创新基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:一般工业技术生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 适用于野生型枯草芽孢杆菌转化有机溶剂方法的建立和优化被引量:4
- 2011年
- 用经典的spizizen方法将穿梭质粒pLJ导入Bacillus subtilis 168、Bacillus subtilisWB600、Bacillus subtilis WB800中,均能达到70多个转化子/μg DNA的较高转化效率,但用此方法将该质粒导入由本实验室筛选并保存的野生型Bacillus subtilis NX-2中,不能获得转化子。本研究对spizizen转化方法进行了改进,通过添加不同浓度的吐温-80,DMSO、丙酮、甲苯、乙醇等有机溶剂,均能获得转化子。同时,本研究对转化条件进行了优化,分别选取吐温-80、DMSO、甲苯等3种效果较好的添加剂设计正交实验。试验结果表明,在添加4%吐温-80、3%DMSO、1%甲苯的条件下得到了34个转化子/μg DNA的较高转化效率。还研究了质粒与感受态共培养时间和感受态稀释倍数对转化的影响,当质粒与感受态共培养时间为3 h,感受态稀释5倍时,转化效率较高。
- 魏艳张丹蔡恒徐虹李莎冯小海许宗奇汪晨
- 关键词:枯草芽孢杆菌有机溶剂
- 通过透明颤菌血红蛋白基因表达提高γ-聚谷氨酸的生物合成被引量:2
- 2016年
- γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的微生物合成是高消耗氧的生物过程,采取基因工程手段改造γ-PGA生产菌株Bacillus subtilis NX-2,以提高细胞利用氧的能力。利用重叠PCR方法将P43强启动子与透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb拼接,插入大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p MA5上,得到重组质粒p MA5-P43-vgb,并将其转化至B.subtilis NX-2中,从而获得重组菌B.subtilis NX-2(vgb+)。经SDS-PAGE分析和CO差光谱法证明VHb能在γ-PGA生产菌株中成功表达,且具有生理活性,大小约为1.6×104。在7.5 L发酵罐上对重组菌B.subtilis NX-2(vgb+)进行发酵性能考察,结果显示:重组菌比出发菌的生物量提高了41.2%,γ-PGA的产量提高了7.5%,传代多次表明重组菌具有良好的发酵稳定性。该研究为γ-PGA的进一步工业化生产奠定了基础。
- 汤宝冯小海张丹许宗奇姜永翔李莎徐虹
- 关键词:BACILLUSSUBTILIS透明颤菌血红蛋白
- Bacillus subtilis NX-2聚谷氨酸合成酶基因pgsBCA的克隆及生物信息学分析
- 2011年
- 克隆Bacillus subtilis NX-2中的聚谷氨酸合成酶基因pgsBCA并进行测序。应用生物信息学分析方法和工具对PgsB、PgsC、PgsA蛋白质的理化性质、跨膜区域、信号肽、细胞定位等进行分析和预测,并探讨它们的作用方式。结果表明:PgsB蛋白不含有跨膜区,它与ATP结合并催化ATP的水解,为PGA合成提供能量;PgsC蛋白保守性最高,其含有4个跨膜区域,是疏水性膜结合蛋白;PgsA为亲水性稳定蛋白,在N端存在1个跨膜区域。
- 张丹徐虹李莎许宗奇魏艳
- 关键词:BACILLUSSUBTILIS生物信息学
- 肥料增效剂γ-聚谷氨酸对小青菜产量和品质的影响被引量:28
- 2012年
- 研究了γ-聚谷氨酸(γ-PGA)肥料增效剂对盆栽小青菜产量和品质的影响。结果表明:正常施肥条件下,施用50 mg/kg的γ-PGA可以显著提高小青菜叶绿素、地下部鲜质量,使小青菜地上部鲜质量最大增产幅度达8.8%,与对照相比差异显著;同时还可以明显提高土壤铵态氮的含量,氮肥利用率增加10.6%。施用100 mg/kg的γ-PGA与对照相比,可降低小青菜中的硝酸盐含量44.8%,维生素C(Vc)含量提高18.1%,小青菜品质达到最好;当减施15%质量的氮肥时,20 mg/kg的γ-PGA可提高氮肥利用率10.2%~11.6%,说明在肥料缺乏时γ-PGA对小青菜产量、品质的改善效果显著。
- 许宗奇万传宝许仙菊张丹徐虹
- 关键词:小青菜肥料Γ-聚谷氨酸
- 氧载体对聚谷氨酸发酵的影响
- 以环境友好型高分子材料聚谷氨酸(γ-PGA)的生产为研究背景,针对发酵过程中高黏度发酵体系溶氧传质差的问题,研究了氧载体对发酵过程的影响.通过添加正烷烃类氧载体(正己烷,正庚烷,正十六烷),有效地改善了发酵体系的氧传递速...
- 张丹周哲徐虹
- 关键词:聚谷氨酸发酵工艺氧载体
- 文献传递