师义
- 作品数：11 被引量：34H指数：3
- 供职机构：云南省第一人民医院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金NSFC—云南联合基金云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 免疫基因CD1d和绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体的构建
- 2013年
- 目的:构建人免疫基因CD1d与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得CD1d的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定。取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞,荧光显微镜观察荧光表达。结果:电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的CD1d基因序列完全一致。重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光。结论:成功构建了CD1d与GFP融合基因慢病毒表达载体,为进一步研究CD1d基因的相关功能提供了适合的稳定转染载体。
- 刘为军任庆莹师义陈贤玉郭世奎雷毅徐玉王昆华
- 关键词：慢病毒绿色荧光蛋白基因构建
- CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和胎盘蜕膜组织中的表达及与血清雌孕激素的相关性研究
- 2012年
- 目的探讨细胞周期调节蛋白CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达水平及与血清雌孕激素的相关关系。方法选择早期自然流产患者30例,采用反转录-聚合酶链反应法检测绒毛和蜕膜组织中CyclniB1的表达情况,同时采用化学发光法检测流产日患者血清中雌孕激素的水平,采用线性回归法分析CyclniB1的表达与雌孕激素之间的相关关系。结果 CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的水平与血清中雌孕激素均呈正相关关系。结论雌孕激素可通过下调CyclinB1表达参与早期自然流产的发生。
- 唐莉宿凌云董云华师义雷毅林娜
- 关键词：早期自然流产CYCLINB1血清雌激素
- CyclinB1与早期自然流产的相互关系
- 2012年
- 目的探讨细胞周期调节蛋白CyclinB1与早期自然流产发生的相关性.方法选择早期自然流产和正常早孕人流患者绒毛和蜕膜组织各30例,采用逆转录-聚合酶链反应法检测两种组织中CyclniB1的表达.结果CyclinB1在早期自然流产组绒毛和蜕膜组织中的表达量显著低于正常早孕人流组绒毛和蜕膜组织中的表达量,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 CyclinB1可能与早期自然流产的发生相关.
- 唐莉宿凌云师义雷毅董云华陈熙琳
- 关键词：早期自然流产CYCLINB1
- 慢病毒载体介导CD1d和GFP融合基因转染PANC-1细胞的实验研究
- 2013年
- 目的构建人免疫基因CD1d与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)融合基因慢病毒载体并转染人胰腺癌细胞(PANC-1).方法实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得CD1d的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定.通过慢病毒转染预实验确定MOI,进行人CD1d重组慢病毒载体转染胰腺癌PANC-1细胞株.结果电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的CD1d基因序列完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染PANC-1细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光.结论成功构建了CD1d与GFP融合基因慢病毒表达载体并转染人胰腺癌细胞.
- 刘为军王昆华师义陈贤玉郭世奎徐玉
- 关键词：GFP基因慢病毒转染
- 实时荧光定量PCR在测定艾滋病患者肠道菌群量变化中的应用及意义被引量：18
- 2012年
- 目的:应用实时荧光定量PCR观察艾滋病患者肠道菌群量的变化,研究艾滋病对肠道微生态的影响及其在发病中的作用。方法:分别设计双歧杆菌属、乳酸杆菌属、大肠杆菌、粪肠球菌及屎肠球菌的特异性引物。收集艾滋病患者粪便标本30份及正常对照标本30份,提取细菌基因组DNA,应用实时荧光定量PCR反应测定5种细菌的数量。结果:艾滋病患者组双歧杆菌属、乳酸杆菌属的数量较正常对照组明显减少;大肠杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:艾滋病患者肠道微生态发生了明显变化,提示艾滋病患者肠道微生态紊乱。
- 雷毅王昆华龚昆梅肖乐包维民师义郭世奎白劲松
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征肠道菌群实时荧光定量PCR
- CD1d分子研究进展被引量：3
- 2012年
- 传统观点认为，肽类抗原是引起T淋巴细胞免疫反应的唯一物质。然而近年来研究发现，脂类、糖脂类抗原也可通过CDld介导特异性激活自然杀伤T细胞（NKT细胞）。CDld是CDl家族中的一员，在胸腺细胞、B细胞亚群、表皮朗罕细胞、树突状细胞亚群、肠道上皮细胞中表达，是一类功能类似于MHCI类分子又独立于MHC1分子之外的具有抗原提呈作用的非多肽性跨膜糖蛋白分子。CDld分子激活NKT细胞后具有抗肿瘤、抗病毒、抗病菌作用。因此，成为国内外学者研究热点。本文拟对CDld分子的最新研究进展作一综述。
- 师义王昆华刘为军徐玉
- 关键词：自然杀伤T细胞树突状细胞亚群NKT细胞细胞免疫反应肠道上皮细胞
- 艾滋病患者肠内营养的研究进展
- 艾滋病是由HIV 病毒感染所致危害人类健康的重大疾病，HIV 破坏机体免疫系 统，使患者免疫力低下，感染一旦发生很难控制。营养不良和感染导致多器官功能衰竭是艾 滋病患者死亡的主要原因。肠道是机体最大的免疫器官，也是储存细...
- 王昆华郭世奎龚昆梅刘为军包维民肖乐雷毅师义徐玉
- 关键词：艾滋病肠内营养生态免疫营养辣木
- 慢病毒载体介导人CD1d基因转染PANC-1实验研究
- 目的为了寻找胰腺癌基因治疗新方法,利用基因克隆、慢病毒载体构建、细胞转染等方法使人CDld基因稳定转染胰腺癌细胞株PANC-1,为后期以CDld-NKT为桥梁,研究细胞免疫原性变化、免疫上下游通路奠定基础。 方法利用基因...
- 师义
- 关键词：胰腺癌慢病毒载体基因转染
- 结肠癌手术对肠道菌群微生态的影响被引量：11
- 2011年
- 目的观察结肠癌手术处理对肠道菌群微生态的影响。方法收集手术前后结肠癌患者的粪便标本60份,采用实时荧光定量PCR法检测肠道拟杆菌属、梭杆菌属及梭菌属量的变化。结果手术前后粪便中细菌数量分别为:拟杆菌属(9.64±0.58 vs.6.21±0.37),梭杆菌属(9.87±0.72 vs.6.36±0.68),梭菌属(7.01±0.37 vs.5.30±0.29);拟杆菌属中的脆弱拟杆菌为(5.92±0.24 vs.3.24±0.78),梭杆菌属中的坏死梭杆菌为(7.12±0.97 vs.3.70±1.21),梭菌属中的肉毒梭菌为(5.68±0.36 vs.1.52±1.06),艰难梭菌为(3.45±0.38 vs.1.42±0.25)。术后患者粪便中细菌数量明显低于术前,P均<0.05。结论结肠癌患者粪便中拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属术后数量较术前明显降低,提示手术对肠道菌群有一定抑制。
- 郭世奎王昆华龚昆梅肖乐包维民雷毅师义
- 关键词：结肠癌手术肠道菌群微生态拟杆菌属梭杆菌属梭菌属
- Stathmin在早期自然流产绒毛和胎盘蜕膜组织中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨细胞周期调节蛋白Stathmin与早期自然流产发生的相关性。方法:选取行人工流产负压吸宫手术(A组)和先兆流产(B组)妇女各30例,收集其绒毛和蜕膜组织,采用蛋白免疫印迹法和免疫组织化学法检测两组妇女绒毛和蜕膜组织中Stathmin的表达水平。结果:Stathmin主要表达于绒毛和蜕膜组织的细胞浆中,Stathmin在A组绒毛组织中的阳性表达比例为25/30,在蜕膜组织中的阳性表达比例为23/30;在B组绒毛组织中的阳性表达比例为17/30,在蜕膜组织中的阳性表达比例为14/30。A组绒毛和蜕膜组织中Stathmin的表达显著高于B组相应组织中的表达(P均<0.01)。结论:Stathmin可能与早期自然流产的病理发生相关。
- 唐莉宿凌云师义雷毅李密吴琨
- 关键词：自然流产STATHMIN绒毛蜕膜组织
