寇志华
- 作品数：80 被引量：109H指数：4
- 供职机构：许昌市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 抗肝癌活性单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗肝癌活性单克隆抗体及其应用。该单克隆抗体，是可以与GPC3抗原表位特异性结合的单克隆抗体；所述GPC3抗原表位的氨基酸序列为自GenBank accession Number为AAA98132.1的氨基...
- 周育森李军锋张慧娜于虹寇志华陈万荣
- 文献传递
- 钩端螺旋体膜表面蛋白LipL41基因的克隆、序列分析及表达被引量：2
- 2002年
- 目的：进一步分析钩端螺旋体LipL－41的免疫原性。方法：通过PCR的方法，以我国特有的钩端螺旋体流感伤寒群临海型lin6株（56609）的 DNA为模板，扩增目的基因 LipL41，克隆至 PcDNA3载体上，以自动测序仪测序后进行序列分析，然后克隆至原核表达载体pGEX－5T进行原核表达，Western印迹分析其免疫原性。珐票：获得长 1068 hp的片段，DNA序列分析表明该菌株的LipL41基因与文献报道具有很高的同源性（95．0％～99．4％），在大肠杆菌中获得了表达，并与抗钩端螺旋体血清反应。结论：该抗原为致病性钩端螺旋体所具有的保守性抗原成分，可能在钩端螺旋体病的诊断和预防中发挥作用。
- 寇志华孙树汉郭嬴军陈祖欢施柯胡振林张洪英周凤娟
- 关键词：免疫原性钩端螺旋体外膜蛋白原核表达基因克隆
- 具备中和中东呼吸综合征冠状病毒活性的单克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的制备并鉴定对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)具有中和活性的单克隆抗体,为进一步开展MERS-CoV感染与免疫保护机制研究,以及发展诊断与治疗手段奠定基础。方法 MERS-CoV S蛋白受体结合区与人IgG Fc片段融合表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过ELISA筛选出阳性克隆,随后通过多次亚克隆筛选出稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定;通过MERS-CoV假病毒及活病毒中和试验筛选出中和单抗。结果获得了10株能够稳定分泌抗原特异性单抗的杂交瘤细胞株。制备的腹水单抗亚类均为IgG1;其中7株单抗抗体ELISA效价达到10 000以上,并有1株单抗对MERS-CoV具有良好的中和活性。结论本研究获得了1株对MERSCoV具有良好中和活性的单克隆抗体。
- 于虹邱洪杰潘婷李琳唐健郭彦孙世惠寇志华赵光宇周育森
- 关键词：单克隆抗体中和活性
- 2011年许昌市疾控机构盐碘实验室质控分析
- 2013年
- 目的对2011年许昌市疾控机构盐碘实验室检测能力进行评价。方法采用相对误差评分等统计学方法对盐碘质控结果进行分析。结果许昌市疾控机构参加盐碘外质控的实验室中,6个实验室质控结果合格,1个实验室质控考核不合格。结论通过近几年参加全国碘缺乏病实验室间质量控制,许昌市、县(区)实验室整体检测质量有了很大提高,今后应继续做好实验室内部质量控制和人员培训等工作。
- 俎建文寇志华贾永强胡辉玲
- 微波消解氢化物发生原子荧光法测定尿汞被引量：4
- 2014年
- 目的研究快速准确检测尿汞的方法。方法采用微波消解氢化物发生原子荧光法测定。结果尿汞结果在0～10μg／L范围内，线性良好，相关系数r=0．9997，检出限为0．003μg／L，相对标准偏差为0．74％，回收率为95．2％～104．0％。结论该方法具有简便、快速、灵敏度高等优点，是测定尿汞含量的可靠方法。
- 高丽红俎志平仝玉平寇志华胡辉玲
- 关键词：汞微波消解原子荧光法
- 离子色谱法测定牛奶中的硫氰酸根被引量：4
- 2012年
- 目的:建立牛奶中的硫氰酸根的离子色谱测定方法。方法:样品经前处理后,选用7.0 mmol/LNa2CO3及1.0 mmol/L NaHCO3及15%丙酮作淋洗液,进行测定。结果:本法线性良好r=0.9997,相对标准偏差(n=6)为1.08%,回收率为99.7%～100.2%。结论:方法简单可靠,是一种较理想的分析方法。
- 寇志华
- 关键词：离子色谱牛奶硫氰酸根
- 重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的佐剂活性被引量：1
- 2011年
- 目的探讨重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的免疫佐剂作用。方法在大肠杆菌原核表达系统中获得融合了pET32(+)表达载体蛋白trxA和M2e三联体的重组蛋白TrxA-M2e3作为高致病性禽流感M2e疫苗分子;在大肠杆菌中截短表达盘尾丝虫活化相关蛋白ASP,获得截短片段ASP-1作为佐剂蛋白。将纯化后的重组蛋白TrxA-M2e3和ASP-1混合或者单独使用,免疫BALB/c小鼠后检测血清中M2e抗体水平。使用不同进化分支H5N1病毒对免疫小鼠进行致死性攻击,检测交叉免疫保护效果。结果获得了纯化的重组蛋白TrxA-M2e3和ASP-1;与TrxA-M2e3单独免疫组相比,应用佐剂蛋白ASP-1可显著提高免疫小鼠血清中M2e特异性IgG抗体滴度(P<0.05)。在不同进化分支H5N1病毒的致死性攻击后,应用ASP-1与TrxA-M2e3联合免疫小鼠的肺组织病毒复制得到有效抑制,免疫小鼠全部存活。而其它免疫组小鼠全部死亡。结论 M2e是发展新型禽流感疫苗应对病毒变异的理想靶抗原分子,而重组蛋白ASP-1可以为一种新型佐剂在M2e疫苗分子诱导交叉免疫保护中发挥关键作用。
- 俞建萍赵光宇肖文珺郭彦孙世惠寇志华于虹温晶何后军周育森
- 关键词：高致病性禽流感疫苗佐剂
- 人源靶向补体抑制物CR2-CD59在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达
- 2010年
- 目的构建人源靶向补体抑制物CR2-CD59,并筛选中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)高效表达细胞株。方法运用FuGENE6转染试剂,将含有人CR2-CD59的重组PEE14.1质粒转入CHO细胞,蛋氨酸亚氨基代砜(MSX)筛选出阳性克隆,并利用无血清培养基对CHO细胞表达株进行培养获得重组蛋白,以ELISA、SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定。结果成功构建PEE14.1-CR2-CD59重组质粒,获得CHO细胞稳定表达株。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CR2-CD59的相对分子质量同预期结果一致。ELISA和Western blot鉴定重组蛋白CR2-CD59可与CR2、CD59多克隆抗体特异性结合。且与含血清培养基相比,无血清培养基能明显提高CHO细胞的蛋白表达量(P<0.05)。结论在CHO细胞中成功表达人源靶向补体抑制物CR2-CD59。
- 郭彦寇志华孙世惠张传福赵光宇于虹宋宏彬乔飞陈万荣周育森
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞补体
- 一种伤寒沙门氏菌菌蜕、制备方法及作为递送系统的应用
- 本发明公开了一种伤寒沙门氏菌菌蜕，其制备方法以及其作为递送系统的应用。所述菌蜕由裂解基因E裂解伤寒沙门氏菌菌体而成，可以作为递送载体将目的分子递送至靶目标。
- 周育森寇志华温晶郭彦于虹赵光宇
- 文献传递
- 应用碘元素自动检测仪测定尿中碘含量的方法评价实验被引量：1
- 2021年
- 目的评价碘元素自动检测仪测定尿中碘含量方法的应用价值。方法应用DAT-50S碘元素自动检测仪测定尿中碘含量,对该方法进行方法学适用性实验,包括标准曲线以及检出限、精密度、标准物质测定、加标回收、方法对比实验等。结果在碘含量0~800μg/L范围内,标准曲线的相关系数为-0.9997,检出限为6.2μg/L。精密度:标准曲线范围内测定低、中、高3个碘含量尿样的相对标准偏差(RSD)分别为1.6%、1.1%、0.7%(n=8)。准确度:2个尿碘标准物质的测定值均在参考值范围内;标准曲线范围内低、中、高3个碘含量尿样的平均回收率为99.6%,范围为97.6%~101.2%。方法对比实验:与砷铈催化分光光度法(WS/T 107.1-2016)对比测定20份尿样,结果差异无统计学意义(t=0.984,P>0.05)。结论应用碘元素自动检测仪测定尿中碘含量的精密度、准确度均较高,操作简单,适宜在疾病预防控制机构推广应用。
- 葛荣正寇志华
- 关键词：碘
