孙栋
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院微生物及植物遗传工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 琼氏不动杆菌GXP04的苯酚羟化酶基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2006年
- 提取琼氏不动杆菌GXP 04的总DNA,采用限制性内切酶E coRⅠ酶切处理后,构建以pLAFR 3为载体的基因组文库。通过TA IL-PCR扩增出苯酚羟化酶的上游基因,对菌落原位杂交获得的11个转化子进一步鉴定,最终确定其中的8个转化子含有完整的苯酚羟化酶基因,选取其中的pLAFR 3-7对GXP 04的苯酚羟化酶基因的核苷酸序列进行分析,并对其蛋白质基本性质进行预测。
- 唐莉丽孙栋武波
- 关键词：苯酚基因组文库苯酚羟化酶
- 高盐极端环境土壤基因组DNA的分离纯化方法研究及基因文库的构建被引量：7
- 2006年
- 以钦州市犀牛角镇晒盐池内（盐浓度〉25％）的土壤样品为研究对象，对土壤混合基因组DNA的提取和纯化方法进行了深入研究，结果表明。冻融法、十二烷基磺酸钠（SDS）和蛋白酶K联合使用的提取法，能有效提高DNA得率，DNA的产量达到每克土壤样品10～15μg。交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、SeDhadex G-200树脂以及大量胶回收的使用，可有效纯化DNA。纯化的DNA产量可达每克土壤样品4～6μg，DNA片段大小〉30kb，将纯化的DNA用BamH Ⅰ部分酶切后构建以pLAFR3为载体的混合基因组文库，该文库包含15600个克隆，外源片段DNA平均大小为18kb。通过DNA序列测定和同源性比较，对从文库中随机挑取的10个克隆进行了序列分析，发现9个外源插入片段包含未知DNA序列。
- 孙栋唐莉丽王倩倩杨冬梅蒋承建武波
- 关键词：土壤DNA提取DNA纯化
- 碱性土壤基因组DNA的分离纯化和基因文库的构建被引量：6
- 2004年
- 直接从广西南宁市凤凰纸业排污沟碱性土壤样品中抽提和分离纯化混合基因组 DNA,所获得DNA的产量为每克土壤样品 1 0～ 3 0μg。采用限制性内切酶 Eco R1酶处理后 ,构建了以 p GEM-3 Zf(+)为载体的 DNA部分文库。文库的容量为 2 3 65 0个转化子 ,外源片段 DNA平均大小为 3 .2 kb。建库效率为每克环境样品获得 60 0 0个左右的含 1～ 1 5 kb外源随机插入片段的克隆。通过 DNA序列测定和同源性比较 ,对从文库随机调取的 1 6个转化子序列进行分析 ,发现 1 3个外源插入片段包含序列尚未确定的 DNA片段。
- 蒋承建隆文杰梁璇孙栋武波
- 关键词：碱性土壤基因组纯化基因文库
- 碱性土壤基因组DNA的分离纯化和基因文库的构建
- 直接从广西南宁市凤凰纸业排污沟碱性土壤样品中抽提和分离纯化混合基因组DNA,所获得DNA的产量为每克土壤样品10～30g。采用限制性内切酶EcoR1酶处理后,构建了以pGEM—3Zf(+)为载体的DNA部分文库。文库的容...
- 蒋承建隆文杰梁璇孙栋武波
- 关键词：克隆
- 文献传递
- 高盐极端环境土壤宏基因组文库的构建及一个新的淀粉酶基因的克隆
- 本研究以高盐极端环境下的土壤为研究对象，对目前已报道的土壤混合基因组提取与纯化法进行比较研究，探索出了一套高效的高盐极端环境土壤混合基因组的提取、纯化法，能有效获取大片段DNA，且DNA纯度可达到进行分子操作水平的纯度。...
- 孙栋
- 关键词：未培养微生物宏基因组文库淀粉酶基因克隆
- 文献传递
