周华
- 作品数：7 被引量：20H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市渝中区科技计划项目国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HBV血清学标志物研究进展被引量：5
- 2022年
- 疫苗的接种、人类卫生意识的提高、抗病毒药物的逐渐开发降低了乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的感染,但HBV的消除仍是一大难题,因此HBV的精准检出率极为重要。传统的血清标志物HBV DNA和乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)在准确反映共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)转录活性与用药检测方面存在一定的局限性。为此,研究者陆续开发出新型HBV血清标志物,如HBV表面抗原、HBV RNA、HBV核心相关抗原、HBV大表面蛋白。基于不同标志物在疾病诊断中的不同参考价值,本文简要对这些标志物的临床应用及面临挑战进行小结,旨在为HBV的高效、准确检出及临床预后提供参考。
- 刘俊叶周华伍晓莉汪德强
- 关键词：乙型肝炎病毒血清学标志物
- 血清超氧化物歧化酶在系统性红斑狼疮中的临床应用被引量：5
- 2019年
- 目的探讨血清超氧化物岐化酶(SOD)在系统性红斑狼疮(SLE)中的临床应用。方法收集2017年6月到2018年6月该院的SLE患者115例作为试验组,平均年龄32岁,按照SLE活动度(SLEDAI)评分进一步将其分为活动组和稳定组,选择同期健康体检者50例作为对照组,平均年龄28岁,检测各组血清SOD等抗氧化物水平,分析其与SLEDAI评分的相关性,探讨SOD与实验室相关指标的关系。结果SLE患者活动组血清SOD和血清总胆红素(TBIL)水平与稳定组和对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),稳定组与对照组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05);活动组血清尿酸(UA)和清蛋白(ALB)水平较稳定组与对照组均低(P<0.05),而稳定组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经Spearman相关分析显示SLE患者血清TBIL、UA、SOD水平与SLEDAI评分呈中度负相关关系,ALB与SLEDAI评分呈轻度负相关关系,SOD与红细胞沉降率(ESR)、血小板(PLT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、抗双链DNA抗体(anti-dsDNA)、IgG呈轻度负相关关系,与补体C3呈轻度正相关关系,SLE患者血清SOD的ROC曲线下面积为0.968。结论血清SOD水平与SLEDAI评分及实验室相关指标有一定相关关系且对SLE有较高的辅助诊断价值。
- 燕玲周华陈维贤
- 关键词：超氧化物歧化酶
- CysC和RBP水平评价血清肌酐参考范围的截断值研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨血清胱抑素C(CysC)和视黄醇结合蛋白(RBP)水平评价血清肌酐(Scr)参考范围调整的临床价值。方法对重庆医科大学附属第二医院2017年12月21日至2018年4月25日体检中心20 126例病例Scr测定情况进行回顾性分析,1 874例同时有Scr和CysC结果,对372例按照WS/T 404参考区间(新参考区间)Scr升高但无CysC结果的样本重新测定CysC和RBP。结果新参考区间更加适用于临床95%置信区间。采用CysC升高为评价肾损伤的参考方法,以新参考区间为截断值时,Scr阳性与CysC阳性差异有统计学意义(χ^2=198.648,P=0.000);以132.3μmol/L(旧参考区间上限)为截断值时,Scr阳性与CysC阳性差异有统计学意义(χ^2=82.337,P=0.000)。以新参考区间为截断值的Scr与CysC的相关性较旧参考区间更好。当Scr>108μmol/L时,RBP才出现升高,存在正相关。结论新参考区间的截断值更加有助于临床辅助诊断。
- 蒋慧晖张帆满雪芹燕玲李庆琳李慧陈维贤周华
- 关键词：肌酸酐半胱氨酸蛋白酶抑制剂
- 一种新的抗菌药物靶标蛋白质(3,4-二羟基-2-丁酮-4-磷酸合成酶)的克隆、表达、纯化及酶活性鉴定
- 2012年
- 【目的】核黄素(vitamin B12,riboflavin)是辅因子黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)和黄素单核苷酸(flavin mononucleotide,FMN)的前体物,对生物体的生物合成至关重要。如果细菌不能够从外界摄取足够的黄素(flavin)就需要自身合成核黄素以维持菌体的生存与增殖。3,4-二羟基-2-丁酮-4-磷酸合成酶(3,4-Dihydroxy-2-butanone-4-phosphate synthase,DHBPs)为核黄素生物合成途径中关键酶之一。在镁离子存在的情况下,DHBPs将5-磷酸核酮糖(ribulose-5-phosphate,Ru5P)转换成3,4-二羟基-2-丁酮-4-磷酸(3,4-dihydroxy-2-Bu-tanone-4-Pho-sphate,DHBP)和甲酸盐(formate),生成的DHBP为核黄素合成的必需原料之一。人类没有合成核黄素的相关途径,因此细菌参与合成核黄素的DHBPs等相关酶就有望成为抗菌药物作用的靶位点。本课题通过对肺炎链球菌的DHBPs进行克隆表达纯化与酶学性质鉴定,为开展其三维结构的解析和抗菌药物设计提供重要的工作基础。【方法】利用PCR技术扩增DHBPs基因,构建重组表达载体pW28-DHBPs。将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,用Ni离子亲和层析及离子交换(DEAE)纯化获得有活性的DHBPs后,进行酶学性质鉴定。【结果】酶切和测序证实成功构建了质粒pW28-DHBPs,在E.coli BL21中表达了可溶性DHBPs,纯化后获得了纯度为95%的靶蛋白质,经分子筛分析DHBPs在溶液中以二聚体形式存在。对DHBPs进行酶学性质分析表明,在25℃、pH为7.5和Mg2+存在的情况下,DHBPs具有将5-磷酸核酮糖转换成DHBP和甲酸盐的活性。【结论】第一次成功克隆并在E.coli BL21中表达了一种肺炎链球菌合成核黄素的相关酶—DHBPs,纯化后的重组DHBPs具有较好的5-磷酸核酮糖分解活性,这为解析其三维结构和基于结构进行的新一代抗菌药物设计提供重要的工作基础。
- 金丽周华赵沙沙杨伟牛司强汪德强
- 稀有密码子对人源Id2基因表达的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化。结果:正确构建了Id2基因的基因突变表达质粒,基因突变表达的Id2蛋白在E.coli BL21中为可溶性上清表达,成功纯化了目的蛋白,且分子筛结果显示其在溶液中呈现二聚体状态。结论:稀有密码子对Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表达有重要影响。
- 杨伟周华赵沙沙金丽郭珍张绍城陈检汪德强
- 关键词：ID2突变纯化
- miR-382-5p通过Akt/mTOR信号通路影响乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞极化被引量：4
- 2021年
- 目的探讨乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)中miR-382-5p的表达对巨噬细胞极化表型以及乳腺癌生物学特性的影响和可能机制。方法收集2018-2020年本院25例临床乳腺癌患者的肿瘤相关巨噬细胞及配对癌旁组织巨噬细胞,用qRT-PCR检测miR-382-5p的表达;利用miR-382-5p过表达慢病毒转染小鼠腹腔巨噬细胞(mouse peritoneal macrophages, PMs),qRT-PCR、Western blot检测巨噬细胞的M1/M2极化指标(iNOS、TNF-α、Arg-1、IL-10等)、miR-382-5p以及Akt/mTOR信号通路变化,采用流式细胞仪检测CD86、CD206的表达;将4T1细胞与TAMs、过表达miR-382-5p的TAMs共培养或培养上清液处理后,CCK-8实验检测4T1细胞的增殖能力,Transwell实验检测4T1细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测4T1细胞的迁移能力。结果 25例临床标本的乳腺癌TAMs的miR-382-5p表达水平较配对癌旁组织巨噬细胞明显降低(P<0.05);与对照组比较,过表达miR-382-5p的TAMs的M1型极化标记物(iNOS、TNF-α、CD86等)的表达水平升高,M2型极化标记物(Arg-1、IL-10、CD206)的表达水平降低(P<0.05);Akt/mTOR信号通路相关蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.05);4T1细胞的增殖、侵袭、迁移能力被抑制(P<0.05)。结论 miR-382-5p可能通过改变乳腺癌TAMs的极化状态影响乳腺癌细胞的侵袭、迁移等过程;其机制可能与miR-382-5p介导Akt/mTOR信号通路调节巨噬细胞极化相关。
- 周华王园园林子晶明佳
- 关键词：乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞MICRORNA
- miR-382通过PGC-1α对三阴性乳腺癌细胞株4T1生物学特性的影响
- 2019年
- 目的研究乳腺癌4T1细胞内miR-382下调PGC-1α对细胞生物学特性的影响。方法①以4T1细胞作为研究对象,miR-382mimics或抑制性探针anti-miR-382转染4T1细胞后,以qRT-PCR检测4T1中miR-382水平变化,qRT-PCR和Western blot检测各组PGC-1α的表达水平变化;②荧光素酶报告基因检测miR-382与PGC-1α3′UTR的结合位点;③将miR-382mimics或对照miR分别与pCDNA3.1或pCDNA-PGC1α共转染于4T1细胞,Transwell迁移实验检测细胞迁移能力的变化;CCK8实验检测细胞增殖活力的变化;皮下移植瘤实验和尾静脉肺移植瘤实验分别检测小鼠体内肿瘤生长及肺转移的变化。结果转染miR-382 mimics之后乳腺癌细胞PGC-1α表达明显降低(P<0.05),转染抑制性探针anti-miR-382后PGC-1α表达明显升高(P<0.05);miR-382与PGC-1α存在靶向调控核心序列,其作用位点位于PGC-1α3′UTR 565-582(核心序列ACAACTT)。相比对照+pCDNA3.1组,miR-382+pCDNA3.1组的细胞迁移和增殖活力明显降低,4T1皮下移植瘤体积和尾静脉移植瘤肺转移灶的面积显著减小(P<0.05);对照+pCDNA-PGC-1α较对照+pCDNA3.1组,细胞迁移和增殖活力明显提高,4T1皮下移植瘤体积和尾静脉移植瘤肺转移灶的面积显著增加(P<0.05);miR-382的抑瘤效应因PGC-1α过表达而被阻断。结论miR-382可能通过PGC-1α抑制4T1细胞株的增殖和肺转移能力,其作用位点可能位于PGC-1α3′UTR 565-582。
- 雷优扬周华代朦靳鑫明佳
- 关键词：三阴性乳腺癌PGC-1Α
