目的:研究真武汤及温阳组、利水组对肾小管上皮细胞氧化损伤的干预作用,为中医治则治法的科学性提供实验依据。方法:不同浓度H2O2作用于肾小管上皮细胞HK-2,诱导HK-2细胞氧化损伤模型,采用真武汤组含药血清、温阳组含药血清、以及利水组含药血清进行干预,分别检测各中药组对损伤细胞的增殖作用,对缺氧损伤相关基因HO-1、HIF-1α、生存素(s urvivin)表达的影响,以及对肾纤维化和肾小管上皮转分化相关基因转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、钙黏蛋白(E-c a dherin)基因表达的影响。结果:H2O2作用不同时间可造成HK-2细胞损伤明显。与模型组比较,真武汤组和利水组具有明显修复HK-2细胞生长的作用(P<0.05),温阳组作用不显著;真武汤组、温阳组及利水组均可上调HO-1、HIF-1α的表达,抑制s urvivin的表达(P<0.05),但三者之间差异不明显。真武汤组、温阳组及利水组可降低SMA及E-c a dherin的表达,温阳组可下调TGF-β1的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:真武汤对体外HK-2细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用,利水组对损伤模型的修复作用比较明显,温阳组抗肾纤维化及肾小管上皮转分化作用比较明显。本研究为中医治则治法的科学性提供了实验依据。
目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治疗新冠后CFS提供理论支持。方法使用R语言4.2.1中的“Seurat”包处理新冠后CFS患者与正常受试者的外周血单细胞测序数据,“CellChat”包进行细胞通讯分析,“scMetabolism”包评估细胞代谢特征,综合5种算法(AddModuleScore、AUCell、UCell、singscore和ssGSEA)计算新冠后CFS患者与正常受试者中5种免疫细胞炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分,并比较两者间的差异。使用“scCODE”包鉴定各类免疫细胞在正常受试者与新冠后CFS患者之间的差异表达(differential expression,DE)基因。Upset图分析得到新冠后CFS炎症反应相关基因(inflammatory response related genes,IRGs)、氧化应激相关基因(oxidative stress related genes,OSRGs)和细胞凋亡相关基因(apoptosis related genes,ARGs)。使用“ClusterProfiler”包分别对IRGs、OSRGs、ARGs进行基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)富集分析。基于STRING数据库及Cytoscape软件构建“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互复杂网络,使用cytoHubba插件筛选关键基因。利用COREMINE数据库预测调控关键基因的中药,并通过古今医案云平台统计中药的性味归经、药物功效分类。结果共鉴定出5种免疫细胞,分别为B细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞和单核细胞。相比于正常受试者,新冠后CFS患者的细胞通讯更为丰富且强度更大,两者之间并无明显差异的细胞代谢特征。新冠后CFS患者中各类免疫细胞的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分普遍高于正常受试者。共得到33个IRGs、17个OSRGs和54个ARGs。“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互网络显示,IRGs、OSRGs和ARGs之间存在密切联�
