刘露
- 作品数：5 被引量：30H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
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- 相关领域：农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 重组毕赤酵母表达棘孢木霉几丁质酶Tachi1的酶学性质研究及表达条件优化被引量：11
- 2012年
- 【目的】对转棘孢木霉几丁质酶基因tachi1的毕赤酵母工程菌GS-tachi1-K进行诱导表达,研究重组几丁质酶Tachi1的酶学性质,优化表达条件。【方法】对GS-tachi1-K进行甲醇诱导培养,纯化目的蛋白Tachi1进行几丁质酶酶学性质的研究;通过单因素和正交试验对GS-tachi1-K菌株产几丁质酶Tachi1表达条件进行优化。【结果】GS-tachi1-K表达的几丁质酶Tachi1表观分子量约为44 kDa,酶反应最适的温度和pH分别为50℃和5.5,具有较宽的温度、pH适用范围;50℃以下保持较高的酶活力,在碱性条件下稳定性较差;受Ag+、Hg2+、Cu2+、Fe2+和高浓度的SDS及β-巯基乙醇强烈抑制。该菌株的最佳表达条件为:pH为6.5,甲醇诱导浓度为0.5%,起始细胞浓度为OD600=2,甲醇诱导时间为180 h;几丁质酶Tachi1活力可达17.93 U/mL,蛋白表达量为6.19 g/L。【结论】成功实现了棘孢木霉新几丁质酶基因tachi1的毕赤酵母高效分泌表达,工程菌GS-tachi1-K具有高表达量和表达产物酶活性高两个特点,明确了几丁质酶Tachi1的酶学性质和最佳诱导表达条件,为该几丁质酶及其基因的深入研究和开发利用奠定了基础。
- 汤伟李雅华刘露张军霞咸洪泉
- 关键词：毕赤酵母几丁质酶酶学性质
- 连作花生田根际土壤优势细菌的分离和鉴定被引量：1
- 2011年
- 采用土壤稀释分离法,从不同连作年限花生根际土壤中分离优势细菌,结合菌株形态特征、培养性状、生理生化特征及16S rDNA序列分析结果,对优势细菌进行鉴定。结果表明,种植过花生及花生连作后,土壤中优势细菌种类发生明显变化,从连作花生田根际土壤中分离鉴定出7种优势细菌,分别为Leifsonia xyli、氯酚节杆菌(Arthrobacter chlorophenolicus)、黄色微杆菌(Mi-crobacterium flavescens)、鞘氨醇单胞菌属细菌(Sphingomonassp.)、巴斯德菌属细菌(Pasteurel-lasp.)、简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。未发现花生病原细菌,说明花生连作障碍的主要因素不是细菌引发花生病害所导致,但花生种植后土壤中优势细菌种类会发生明显变化。细菌与花生连作障碍之间的关系还需进一步研究。
- 颜艳伟张红刘露咸洪泉崔德杰
- 关键词：花生连作根际土壤细菌
- 连作花生田根际土壤优势微生物的分离和鉴定被引量：17
- 2011年
- 【目的】从不同连作年限的花生田根际土壤中分离优势微生物并进行鉴定,为研究花生连作后优势微生物的变化奠定基础。【方法】采用土壤稀释分离法从不同连作年限花生根际土壤中分离优势细菌、真菌和放线菌,结合菌株形态特征、培养性状、生理生化特征及16S rDNA序列分析对细菌、放线菌进行鉴定,通过形态特征、培养特征和分子鉴定方法对优势真菌进行鉴定。【结果】从连作花生田根际土壤中分离鉴定出7种优势细菌、7种优势真菌和7种优势放线菌。7种优势细菌分别为Leifsonia xyli、氯酚节杆菌(Arthrobacterchlorophenolicus)、黄色微杆菌(Microbacterium flavescens)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)、巴斯德菌属(Pasteurella sp.)、简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。7种优势真菌分别为枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)、产紫青霉(Penicillium purpurogenum)、哈茨木霉有性型(Hypocrea lixii)、Exophiala pisciphila、微紫青霉(Penicillium janthinellum)、曲霉(Aspergillus sp.)和大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)。7种优势放线菌分别为紫红链霉菌(Streptomyces violaceoruber)、华丽黄链霉菌(Streptomyces flaveus)、Streptomyces panaciterrae、不产色链霉菌(Streptomyces achromogenes)、假浅灰链霉菌(Streptomyces pseudogriseolus)、纤维素链霉菌(Streptomyces cellulosae)和金色链霉菌(Streptomyces aureus)。【结论】本研究是第一次系统的从连作花生根际土中分离鉴定优势微生物,种植花生后根际土壤中优势微生物的种类发生了明显变化,但变化没有规律。
- 颜艳伟张红刘露咸洪泉崔德杰
- 关键词：花生连作障碍真菌放线菌
- 一株鸭源莫拉菌的分离与鉴定被引量：1
- 2014年
- 为了研究莫拉菌对蛋鸭的致病性及耐药性,试验采用分离培养、生化试验和PCR检测的方法进行细菌的分离鉴定及药敏试验。结果表明:分离出的革兰阴性球杆菌为莫拉菌;该分离菌对青霉素已不敏感,对硫酸庆大霉素、诺氟沙星、头孢曲松钠、丁胺卡那霉素和氧氟沙星高度敏感。说明莫拉菌的耐药性正逐渐增强。
- 邹玲刘文华刘露张金玲
- 关键词：莫拉菌PCR药敏试验
- 农杆菌介导生防棘孢木霉菌转化体系的优化
- 2012年
- 目的:实现棘孢木霉菌T4的遗传转化并优化其转化体系。方法:以潮霉素抗性为选择标记,利用农杆菌转化法介导转化棘孢木霉菌。结果:潮霉素基因成功整合到受体菌基因组中,转化子抗性基因可稳定遗传。结论:最优的转化体系和条件为:IM和CM培养基中AS浓度为200μg/mL,棘孢木霉T4孢子浓度为106/mL,农杆菌浓度为200μL(OD600约0.8),共培养时间为48 h,转化效率约为50个转化子/106个孢子。
- 刘露李雅华咸洪泉
- 关键词：农杆菌潮霉素抗性
