目的:研究缺氧条件下体外培养人视网膜色素上皮(reti-nal pigment epithelium,RPE)细胞中信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的活性状态。方法:将培养的人RPE细胞置于含10mL/LO2,50mL/LCO2和940mL/LN2的培养箱内建立缺氧模型。于缺氧后1,3,6,12和24h,用激光共聚焦显微镜观察STAT3蛋白在RPE细胞内的定位,Western blot检测STAT3蛋白的磷酸化水平。结果:常氧状态下,STAT3蛋白荧光主要分布于RPE细胞胞质内。缺氧后,细胞质内绿色荧光强度减弱,细胞核荧光强度明显增强。随缺氧时间的延长,STAT3蛋白的磷酸化水平逐渐增高,至12h表达最强,24h开始下降。结论:缺氧后体外培养人RPE细胞内STAT3蛋白磷酸化水平增高,STAT3蛋白活化,由胞质向胞核内转位。
目的:了解缺氧条件下体外培养人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的凋亡情况。方法:将培养的人RPE细胞置于含10mL/LO2、50mL/LCO2和940mL/LN2的培养箱内建立缺氧模型。于缺氧后1,3,6,12,24h,利用扫描电镜、透射电镜、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucle-otidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)技术和流式细胞仪测定RPE细胞凋亡水平。结果:常氧状态下RPE细胞生长良好,几乎没有凋亡(TUNEL法测凋亡指数为1.2)。缺氧条件下,RPE细胞发生了不同程度的凋亡,缺氧后3h凋亡水平达峰值(凋亡指数为34.43)。结论:缺氧可导致体外培养的人RPE细胞凋亡,提示RPE凋亡可能参与了某些缺血缺氧性眼病的发生。
